第一部分AngⅡ誘導(dǎo)非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化及機(jī)制研究目的:轉(zhuǎn)移和侵襲已成為惡性腫瘤的基本特征和重要標(biāo)志,上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化（EMT）已被證實(shí)可促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的局部浸潤(rùn)和癌癥的全身散播。腎素-血管緊張素系統(tǒng)（RAS）是體內(nèi)一個(gè)重要的神經(jīng)-體液調(diào)節(jié)系統(tǒng),其中血管緊張素II（Ang II）是其主要的效應(yīng)分子。近年來(lái)發(fā)現(xiàn)Ang II在局部組織,特別是腫瘤組織中表達(dá)明顯,已被證實(shí)對(duì)腫瘤的發(fā)生、發(fā)展和轉(zhuǎn)移起到重要作用,但其對(duì)腫瘤細(xì)胞EMT的作用則鮮有研究。目前RAS在腫瘤中的相關(guān)研究主要集中于血管緊張素轉(zhuǎn)化酶抑制劑（ACEI）和血管緊張素Ⅱ受體拮抗劑（ARB）對(duì)腫瘤細(xì)胞的影響,而AngⅡ?qū)δ[瘤細(xì)胞直接影響的研究較少。因此,本研究探討AngⅡ?qū)Ψ切〖?xì)胞肺癌（NSCLC）細(xì)胞EMT的影響和相關(guān)作用機(jī)制,旨在從新的角度完善RAS在腫瘤領(lǐng)域的研究,以期為腫瘤治療提供新的理論基礎(chǔ)和可能的治療策略。方法:以A549細(xì)胞和H460細(xì)胞為研究對(duì)象開(kāi)展如下實(shí)驗(yàn):（1）采用劃痕實(shí)驗(yàn)和Transwell遷移實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞的遷移運(yùn)動(dòng)能力;（2）采用Transwell小室侵襲實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞的侵襲能力;（3）采用Western b... 

【文章來(lái)源】：吉林大學(xué)吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁(yè)數(shù)】：116 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【文章目錄】：
中文摘要
abstract
第1章 緒論
    綜述1 腎素-血管緊張素系統(tǒng)與肺癌關(guān)系研究進(jìn)展
        1.1 腎素-血管緊張素系統(tǒng)
        1.2 血管緊張素合成酶與肺癌的關(guān)系
        1.3 AngⅡ與肺癌細(xì)胞生長(zhǎng)有關(guān)
        1.4 ACEI和 ARBS對(duì)肺癌發(fā)生的影響
        1.5 ACEI和 ARBs對(duì)肺腫瘤的影響血管生成
        1.6 Ang(1-7)和肺癌
        1.7 展望
    綜述2 SIRT1:抑制癌細(xì)胞上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化的潛在靶點(diǎn)
第2章 AngⅡ?qū)Ψ切〖?xì)胞肺癌EMT的影響
    2.1 引言
    2.2 實(shí)驗(yàn)材料
        2.2.1 細(xì)胞株
        2.2.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及飼料
        2.2.3 主要試劑與儀器
    2.3 實(shí)驗(yàn)方法
        2.3.1 細(xì)胞復(fù)蘇、傳代及凍存
        2.3.2 形態(tài)學(xué)觀察
        2.3.3 細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)
        2.3.4 Transwell遷移實(shí)驗(yàn)
        2.3.5 EMT相關(guān)基因RNA水平(qRT-PCR)檢測(cè)
        2.3.6 Western blot檢測(cè)
        2.3.7 裸鼠體內(nèi)A549 細(xì)胞尾靜脈肺轉(zhuǎn)移實(shí)驗(yàn)
        2.3.8 HE染色
        2.3.9 統(tǒng)計(jì)方法
    2.4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        2.4.1 Ang Ⅱ?qū)?NSCLC細(xì)胞遷移能力的影響
        2.4.2 Ang Ⅱ?qū)?NSCLC細(xì)胞侵襲能力的影響
        2.4.3 Ang Ⅱ?qū)Ψ切〖?xì)胞肺癌EMT的影響
        2.4.4 裸鼠尾靜脈轉(zhuǎn)移實(shí)驗(yàn)檢測(cè)AngⅡ?qū)549 細(xì)胞體內(nèi)轉(zhuǎn)移的影響
    2.5 討論
    2.6 小結(jié)
第3章 AngⅡ誘導(dǎo)A549 細(xì)胞EMT機(jī)制研究
    3.1 引言
    3.2 實(shí)驗(yàn)材料
        3.2.1 細(xì)胞株
        3.2.2 主要試劑與儀器
    3.3 實(shí)驗(yàn)方法
        3.3.1 細(xì)胞復(fù)蘇、傳代及凍存
        3.3.2 細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)
        3.3.3 Transwell遷移實(shí)驗(yàn)
        3.3.4 TGF-β1及EMT相關(guān)基因mRNA水平(qRT-PCR)檢測(cè)
        3.3.5 Western Blot檢測(cè)
        3.3.6 免疫熒光實(shí)驗(yàn)
        3.3.7 培養(yǎng)液上清中TGF-β1 含量檢測(cè)
        3.3.8 統(tǒng)計(jì)方法
    3.4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        3.4.1 Ang Ⅱ?qū)?A549 細(xì)胞中TGF-β1 表達(dá)的影響
        3.4.2 TGF-β受體拮抗劑(SB431542)對(duì)Ang Ⅱ誘導(dǎo)的A549 細(xì)胞EMT及遷移能力的影響
        3.4.3 Ang Ⅱ?qū)549 細(xì)胞中p-Smad2 表達(dá)的影響
        3.4.4 Ang Ⅱ?qū)549 細(xì)胞中SIRT1 表達(dá)的影響
        3.4.5 SIRT1 抑制劑(EX527)對(duì)Ang Ⅱ誘導(dǎo)的A549 細(xì)胞EMT及遷移能力的影響
        3.4.6 SB431542 對(duì)Ang Ⅱ誘導(dǎo)EMT過(guò)程中SIRT1 蛋白表達(dá)的影響
    3.5 討論
    3.6 小結(jié)
第4章 PPD抑制Ang Ⅱ誘導(dǎo)A549 細(xì)胞EMT
    4.1 引言
    4.2 實(shí)驗(yàn)材料
        4.2.1 細(xì)胞株
        4.2.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及飼料
        4.2.3 主要試劑與儀器
    4.3 實(shí)驗(yàn)方法
        4.3.1 細(xì)胞復(fù)蘇、傳代及凍存
        4.3.2 細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)
        4.3.3 Transwell實(shí)驗(yàn)
        4.3.5 Western Blot檢測(cè)
        4.3.6 免疫熒光實(shí)驗(yàn)
        4.3.7 EMT相關(guān)mRNA水平(qRT-PCR)檢測(cè)
        4.3.8 裸鼠體內(nèi)A549 細(xì)胞尾靜脈轉(zhuǎn)移實(shí)驗(yàn)
        4.3.9 HE染色
        4.3.10 統(tǒng)計(jì)方法
    4.4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        4.4.1 PPD對(duì)Ang Ⅱ誘導(dǎo)的A549 細(xì)胞遷移能力的影響
        4.4.2 PPD對(duì)Ang Ⅱ誘導(dǎo)的A549 細(xì)胞EMT的影響
        4.4.3 PPD對(duì)Ang Ⅱ誘導(dǎo)的A549 細(xì)胞裸鼠轉(zhuǎn)移瘤形成的影響
    4.5 討論
    4.6 小結(jié)
第5章 PPD抑制Ang Ⅱ誘導(dǎo)A549 細(xì)胞EMT機(jī)制研究
    5.1 引言
    5.2 實(shí)驗(yàn)材料
        5.2.1 細(xì)胞株
        5.2.2 主要試劑與儀器
            5.2.2.1 藥品與試劑
            5.2.2.2 抗體
            5.2.2.3 qRT-PCR引物
            5.2.2.4 主要儀器設(shè)備
    5.3 實(shí)驗(yàn)方法
        5.3.1 細(xì)胞復(fù)蘇、傳代及凍存
        5.3.2 細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)
        5.3.3 Transwell遷移實(shí)驗(yàn)
        5.3.4 EMT相關(guān)基因RNA水平(QPCR)檢測(cè)
        5.3.5 Western Blot檢測(cè)
        5.3.6 SIRT1 過(guò)表達(dá)質(zhì)粒的轉(zhuǎn)染
        5.3.7 培養(yǎng)液上清中TGF-β1 含量檢測(cè)
        5.3.8 統(tǒng)計(jì)方法
    5.4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        5.4.1 PPD抑制Ang Ⅱ誘導(dǎo)的A549 細(xì)胞自分泌TGF-β1
        5.4.2 PPD抑制Ang Ⅱ誘導(dǎo)的A549 細(xì)胞SIRT1上調(diào)
    5.5 討論
    5.6 小結(jié)
第6章 結(jié)論
本論文創(chuàng)新性
參考文獻(xiàn)
作者簡(jiǎn)介及在讀期間取得科研成果
致謝



本文編號(hào)：3367758