目的:1)通過分析晚期非小細胞肺癌患者的EGFR突變類型,探討EGFR外顯子19和21基因突變與患者臨床病理特征的關系,探索非小細胞肺癌晚期患者口服EGFR-TKIs的療效是否與EGFR突變類型有關,從而指導臨床非小細胞肺癌患者個體化治療;2)通過高通量測序方法對非小細胞肺癌患者的13種與靶向治療相關的驅動基因的突變情況進行測序分析,從而分析不同的變異類型與臨床病理特征以及預后的關系,為臨床精準治療提供理論依據;3)通過研究小分子蛋白酶抑制劑Oprozomib（OPZ）對肺癌細胞發(fā)生發(fā)展的作用,探討第二代蛋白酶體抑制劑Oprozomib對肺癌的抗腫瘤效果以及抗腫瘤作用的初步分子機制。方法:1)收集新疆醫(yī)科大學附屬腫瘤醫(yī)院組織病理學確證為非小細胞肺癌患者140例,分析患者的臨床資料和EGFR突變類型。利用卡方檢驗和Fisher檢驗分析患者的臨床資料與EGFR突變類型的相關性,除此之外,采用Kaplan-Meier生存分析比較EGFR19號外顯子缺失突變和EGFR21號外顯子突變的兩類非小細胞肺癌患者的中位無進展生存期（mPFS）和中位總生存期（mOS）;2)收集新疆醫(yī)科大學附屬腫瘤醫(yī)院2... 

【文章來源】：新疆醫(yī)科大學新疆維吾爾自治區(qū)

【文章頁數(shù)】：111 頁

【學位級別】：博士

【部分圖文】：

外顯子19缺失突變與外顯子21點突變患者EGFR-TKI治療的PFS生存曲線

第一部分·討論23圖1-2IHC方法檢測非小細胞肺癌中ALK蛋白表達A：ALK3（+）；B：ALK2（+）；C：ALK1（+）；D：ALK0（-）。Figure1-2DetectionofALKproteinexpressioninnon-smallcelllungcancerbyIHCA：ALK3（+）；B：ALK2（+）；C：ALK1（+）；D：ALK0（-）.3討論肺癌是世界上發(fā)病率和死亡率較高的惡性腫瘤之一[89]，雖然EGFR酪氨酸激酶抑制劑（TKIs）現(xiàn)在是專屬的用于患有致敏EGFR突變的NSCLC患者，這些藥物最初是針對未經選擇的患者群體開發(fā)的。根據觀察發(fā)現(xiàn)，NSCLCs占很大比例表達EGFR。2004年，厄洛替尼成為FDA批準的第一個分子靶向治療用于治療晚期NSCLC在癌癥先前化療進展的患者中。值得注意的是，此批準是基于2個月的PFS與安慰劑相比的優(yōu)勢，它的使用并沒有特定的必需的生物標志物。在早期研究中探討了EGFRTKI未選擇的NSCLC患者的整體活動，這些藥物在很大程度上令人失望。亞組分析通常有一小部分患者年輕，東亞女性，吸煙史很少或沒有吸煙史的患者對TKI存在“戲劇性的反應”（Fujiwara等，2003）。腫瘤分析來自應答者的標本導致發(fā)現(xiàn)了一種關聯(lián)，存在激活EGFR激酶結構域的突變和反應。在過去的十幾年里，我們認識到了解疾病的必要性分子水平以識別特定的分子靶標可以鑒定或設計藥物以抑制藥物。隨著分子生物學在腫瘤的發(fā)生發(fā)展的機制研究中的應用，尤其是分子靶向藥物概念的提出

第二部分·研究內容與方法35通過末端修復將DNA片段兩端變?yōu)槠侥┒�，在DNA片段的5’端加磷酸基團，在DNA的3’端加堿基A；3）通過TA連接將接頭序列加到DNA片段的兩端并純化回收連接產物；4）隨后通過一輪擴增并純化獲得可測序基因文庫。具體建庫流程如下圖所示：圖2-1建庫流程圖Figure2-1Constructionflowchart1.2.4.3簇生成當DNA文庫上樣到流動槽上，F(xiàn)lowcell上隨機分布了兩種不同的寡核苷酸序列，待測DNA片段通過接頭和槽內寡核苷酸配對連接。隨后每個片段通過橋式法擴增成簇克攏接下來合成的雙鏈被解鏈，再分別與Flowcell上的接頭雜交互補，通過延伸解鏈等步驟重復35個橋式PCR，利用變性劑NAOH將雙鏈解鏈，并利用甲酰胺基嘧啶糖苷酶和對8-氧鳥嘌呤糖苷的選擇性切斷作用，將測序引物雜交至目標部位一端的通

【參考文獻】：
期刊論文
[1]2014年中國分地區(qū)惡性腫瘤發(fā)病和死亡分析[J]. 陳萬青,孫可欣,鄭榮壽,張思維,曾紅梅,鄒小農,赫捷.  中國腫瘤. 2018(01)



本文編號：3346321