目的:糖尿病腎病是一種較常見的糖尿病并發(fā)癥,其特有的病理生理學改變提高了麻醉風險,越來越受到臨床麻醉醫(yī)生的重視。右美托咪定作為α2-腎上腺素受體激動劑,具有較穩(wěn)定的鎮(zhèn)靜、鎮(zhèn)痛作用,且對急性腎損傷和腎缺血再灌注損傷具有保護作用。糖尿病患者體內長期處于高血糖狀態(tài),可導致組織和細胞氧化應激損傷,進而引起腎小管上皮-間質轉化（epithelial-mesenchymal transition,EMT）,其與腎間質纖維化關系密切,嚴重影響腎臟功能。本研究利用體外細胞實驗和體內動物實驗,探討右美托咪定對糖尿病腎病的保護作用及其相關機制,旨在為糖尿病腎病的麻醉藥物選擇提供可靠的理論依據,并為糖尿病腎病的臨床麻醉管理提供一定的指導作用。方法:1.體外建立高糖對人腎小管上皮細胞（HK-2細胞）損傷模型,加入不同濃度（0 m M、10 m M、20 m M、30 m M、40 m M、50 m M、60 m M）葡萄糖處理HK-2細胞6 h,通過CCK-8法檢測不同濃度各組細胞存活率,利用倒置顯微鏡鏡下觀察不同濃度葡萄糖各組細胞形態(tài)學改變,通過Western blotting法檢測不同濃度各組細胞AKT、... 

【文章來源】：吉林大學吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：94 頁

【學位級別】：博士

【部分圖文】：

1痛覺通路的相關調節(jié)遞質[103]

第4章結果31第4章結果4.1高糖誘導人腎小管上皮細胞細胞上皮間質轉化4.1.1CCK-8法檢測不同濃度葡萄糖處理HK-2細胞存活率如圖4.1.1A所示，和Normal組（0mM組）相比，20mM、30mM、40mM、50mM、60mM濃度的Glu組細胞存活率均有明顯下降，差異均具有統(tǒng)計學意義（P<0.05）并且在相同時間隨著葡萄糖處理濃度的增高，HK-2細胞存活率逐漸下降，呈劑量依賴性。與Normal組相比較，甘露醇濃度為20mM（M20mM組）和40mM（M40mM組）時的細胞存活率與Normal組差異不具有統(tǒng)計學意義（P>0.05）。與Normal組相比較，在葡萄糖濃度為40mM處理6h時，HK-2細胞存活率約在85%。通過查閱文獻，結合上述研究結果，最終選擇40mM處理6h作為本研究高糖對HK-2損傷的建模條件。圖4.1.1不同濃度葡萄糖對HK-2細胞存活率的影響Fig.4.1.1Effectsofglucoseconcentrationonsurvivalrateofhk-2cellsA．隨著葡萄糖處理濃度的增高，HK-2細胞存活率逐漸下降。與Normal組相比，20mM、30mM、40mM、50mM和60mM組的細胞存活率明顯下降，差異具有統(tǒng)計學意義（P<0.05）；與Normal組相比，10mM、M20mM和M40mM組的細胞存活率差異不具有統(tǒng)計學意義（P>0.05）

吉林大學博士學位論文324.1.2不同濃度葡萄糖處理對人腎小管上皮細胞的形態(tài)學影響在6孔板中按照前述方法鋪好HK-2細胞，確保不同濃度的孔內細胞密度均勻一致，分組情況為：Normal組（0mM組）、10mM組、20mM組、30mM組、40mM組、50mM組，分別加入相應濃度的葡萄糖處理6小時后通過倒置顯微鏡觀察，我們發(fā)現(xiàn)，如圖4.1.2A所示，Normal組HK-2細胞呈圓形或橢圓形（鋪路石樣）緊密排列，貼壁生長狀態(tài)較好，但隨著葡萄糖處理濃度的增加，細胞形狀由近似圓形逐漸變?yōu)殚L梭形，且細胞間隙變大、貼壁細胞減少，生長狀態(tài)變差。A圖4.1.2人腎小管上皮細胞葡萄糖不同濃度的形態(tài)學改變Fig.4.1.2MorphologicalchangesofhumantubularepithelialcellsindifferentglucoseconcentrationA．隨著葡萄糖濃度增加，HK-2細胞形態(tài)學明顯改變，貼壁細胞數(shù)量明顯減少標尺=200μm4.1.3不同濃度葡萄糖處理HK-2細胞AKT和ERK蛋白表達通過Westernblot檢測不同濃度葡萄糖處理各組HK-2細胞的AKT和ERK蛋白表達情況，如圖4.1.3A所示，和Normal組（0mM組）相比，相同時間隨著葡萄糖處理濃度的升高，HK-2細胞總蛋白AKT表達略有下降（P0.05），p-AKT表達稍有上調（P0.05），但p-AKT和AKT比值（p-AKT/AKT）明顯升高（P0.01）。和Normal組（0mM組）相比，相同時間隨著葡萄糖處理濃度的升高，HK-2細胞總蛋白ERK表達明顯上調（P0.01），p-ERK表達明顯上調（P0.05），

【參考文獻】：
期刊論文
[1]How tubular epithelial cells dictate the rate of renal fibrogenesis?[J]. Kevin Louis,Alexandre Hertig.  World Journal of Nephrology. 2015(03)



本文編號：3298061