天然免疫系統(tǒng)是宿主用來抵抗微生物、毒素、過敏原及損傷信號的一種防御系統(tǒng),主要通過辨別“自我”-“非我”來實(shí)現(xiàn)。在天然免疫系統(tǒng)作用模式的分子水平上,模式識別受體（PRR）作為天然免疫受體最先接觸上述這些危險信號,并可通過誘導(dǎo)各種炎性細(xì)胞因子,趨化因子和干擾素來啟動一系列宿主防御體系。雙鏈DNA（dsDNA）主要作為許多生物體中的遺傳密碼而存在,因而對宿主和許多入侵的微生物都至關(guān)重要,也正因如此,dsDNA的暴露通常指向危險信號。但由于dsDNA結(jié)構(gòu)復(fù)雜度低且在環(huán)境中幾乎無所不在,生物體便進(jìn)化出了對自身dsDNA的區(qū)室化,典型的有真核生物中的細(xì)胞核和線粒體,以規(guī)避這“自我”的成分被宿主自身的免疫監(jiān)察鎖定為“非我”。胞質(zhì)內(nèi)的dsDNA可以被多個蛋白識別,但多細(xì)胞生物中最主要的可以識別dsDNA的PRR當(dāng)屬“環(huán)狀鳥苷單磷酸-腺苷單磷酸合成酶”（cGAS,又名MB21D1）。cGAS在識別dsDNA后催化生成“環(huán)狀鳥苷單磷酸-腺苷單磷酸”（cGAMP）,后者則激活STING-TBK1-IRF3通路而誘導(dǎo)干擾素的表達(dá)（STING:“干擾素基因誘導(dǎo)因子”,又名STING1,TMEM173,MITA,... 

【文章來源】：中國科學(xué)院大學(xué)(中國科學(xué)院上海巴斯德研究所)上海市

【文章頁數(shù)】：79 頁

【學(xué)位級別】：博士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
第1章 引言
    1.1 天然免疫系統(tǒng)
    1.2 模式識別受體
    1.3 識別細(xì)胞內(nèi)DNA的受體
    1.4 cGAS-STING通路的調(diào)控
    1.5 UNC93B1 與核酸識別型TLR
    1.6 自噬
    1.7 本研究的目的
第2章 材料與方法
    2.1 試劑與抗體
    2.2 引物及其它寡核苷酸
    2.3 細(xì)胞培養(yǎng)
    2.4 質(zhì)粒構(gòu)建
    2.5 轉(zhuǎn)染
    2.6 慢病毒包裝和感染
    2.7 以shRNA來實(shí)行的RNA干擾
    2.8 以CRISPR/Cas9 來實(shí)行的基因敲除
    2.9 細(xì)胞單克隆的分離
    2.10 流式細(xì)胞術(shù)
    2.11 RNA抽提和逆轉(zhuǎn)錄-定量PCR
    2.12 SDS-PAGE和免疫印跡
    2.13 免疫共沉淀
    2.14 免疫熒光和激光共聚焦成像
    2.15 數(shù)據(jù)及統(tǒng)計
    2.16 其它
第3章 結(jié)果
    3.1 UNC93B1 表達(dá)缺陷可增強(qiáng)由胞質(zhì)內(nèi)雙鏈DNA引起的天然免疫反應(yīng)
    3.2 UNC93B1 表達(dá)缺陷所造成的天然免疫反應(yīng)的增強(qiáng)有賴于STING
    3.3 UNC93B1與STING在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)及溶酶體上有相互作用
    3.4 UNC93B1 不影響STING出內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的過程
    3.5 UNC93B1 可影響STING蛋白的表達(dá)水平
    3.6 UNC93B1 影響了STING通過自噬體-溶酶體進(jìn)行的降解
第4章 討論
    4.1 STING的降解
    4.2 UNC93B1 的生物學(xué)功能
    4.3 總結(jié)與展望
參考文獻(xiàn)
致謝
作者簡歷及攻讀學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文與研究成果
文獻(xiàn)綜述
    參考文獻(xiàn)



本文編號：3187262