Sigma受體是具有伴侶蛋白活性的一類受體蛋白。鑒于其與其他哺乳動物蛋白沒有同源性以及與其他受體相比所具有的獨特的生理功能,現在也被認為是一類孤兒受體。目前認為Sigma受體家族包括兩個亞型,一個亞型為Sigma-1受體,另一個亞型為Sigma-2受體。由于到現在為止,還未獲得Sigma-2受體的克隆,也不清楚其氨基酸序列和結構,所以對它的研究比較少也比較滯后,研究重點一般集中在Sigma-1受體。Sigma-1受體主要聚集于細胞內質網,并廣泛分布在MAM膜、細胞膜以及核膜等細胞膜系統(tǒng)上。經過研究人員對該受體將近40年的研究,尤其在獲得Sigma-1受體的克隆及Sigma-1受體敲除鼠后,我們對其在結構和功能上的認識越來越清晰。Sigma-1受體是包含223個氨基酸的一條蛋白質單鏈,其分子量大小約為26 k Da。之前大多數研究認為Sigma-1受體包括兩個跨膜結構域,且N端和C端均位于膜內側。而在2016年,對人源Sigma-1受體的晶體結構解析結果表明,Sigma-1受體是以寡聚體（一般是三聚體）形式存在的一類單次跨膜蛋白,其N端在膜外,C端則位于膜內側。在其功能方面,Sigma-... 

【文章來源】：中國人民解放軍軍事科學院北京市

【文章頁數】：87 頁

【學位級別】：博士

【部分圖文】：

ChIs中Sigma-1受體與N型鈣通道的表達

第 1 章 Sigma-1 受體在 ChIs 上對鈣離子通道的調節(jié)作用of ChAT, Sigma-1 receptor and 1A-C in ChIs by scRT-PCR. The 1B subunit ofN-type Ca2+channel was found in 92.1% detected cells.3.2 免疫熒光染色為了從蛋白水平證實 Sigma-1 受體的表達，我們在 5 m 連續(xù)切片上進行免疫熒光染色，由于是連續(xù)切片，熒光顯示的細胞形態(tài)并不完全相同，從細胞的相對位置我們可以看出箭頭標示出的細胞確實來源于同一個神經元。實驗結果見圖1-2，其中 ChAT 染色結果以紅色熒光表示，表明這些神經元是 ChIs；綠色熒光代表對 Sigma-1 受體的染色結果。對結果進行分析比較，可以確定 Sigma-1 受體在蛋白水平上在背側紋狀體內的 ChIs 中有表達。

圖 2-1 N 型鈣通道以及 Sigma-1 受體在爪蟾卵母細胞上的表達。(A) 上圖：向卵母細胞中注射 N 型鈣通道 cRNA 后記錄到的 N 型鈣電流；下圖：記錄被 0.2 μM的 CTX 阻斷后的 N 型鈣電流。表明 N 型鈣通道已在卵母細胞中成功表達。(B)A圖中所記錄到的電流的I-V曲線。(C) 注射了Sigma-1受體cRNA的卵母細胞 (以“+”表示，第一泳道) 與空白細胞 (以“-”表示，中間三條泳道) 的全蛋白 WesternBlot 實驗結果，該結果表明 Sigma-1 受體已在卵母細胞中成功表達。最后一條泳道為蛋白 Marker。Fig 2-1 Expression of N-type Ca2+channel and Sigma-1 receptor in xenopus oocytes.(A) Upper panel: the current of N-type Ca2+channel recorded in oocytes aftermicroinjection with N-type Ca2+channel cRNA. Lower panel: the current wasblocked by N-type Ca2+channel blocker CTX (0.2 μM). (B) I-V plot of the recordedN-type Ca2+channel current in Figure 3A. (C) Schematic Western blot strap ofoocytes injected with Sigma-1 cRNA (the first lane) and control group (the middlethree lanes), which indicated the Sigma-1 receptor expressed successfully. The last


本文編號：3125068