目的:1.檢測高爾基體堆疊蛋白65（GRASP65）在卵巢漿液性和粘液性腫瘤組織中的表達(dá)水平,探討GRASP65蛋白表達(dá)與臨床病理指標(biāo)之間的關(guān)系。2.探討二氫楊梅素（DHM）對(duì)卵巢癌SKOV3和A2780細(xì)胞的侵襲及遷移能力、細(xì)胞凋亡、細(xì)胞自噬及超微結(jié)構(gòu)等方面的影響,明確DHM通過JNK和ERK通路調(diào)控GRASP65發(fā)揮抗卵巢癌作用的機(jī)制。3.探討DHM干預(yù)處理對(duì)卵巢癌裸鼠的體內(nèi)移植瘤生長的抑制作用及機(jī)制。方法:1.收集湖北民族大學(xué)附屬民大醫(yī)院收治確診后進(jìn)行手術(shù)切除、經(jīng)病理診斷為卵巢腫瘤的患者118例,取患者術(shù)后腫瘤組織的石蠟標(biāo)本,及6例卵巢漿液性癌患者術(shù)后的新鮮癌組織及癌旁組織為研究對(duì)象,采用免疫組織化學(xué)染色（IHC）和蛋白免疫印跡技術(shù)（Western blot,WB）檢測GRASP65蛋白在組織細(xì)胞內(nèi)的陽性定位及表達(dá)水平,并分析GRASP65表達(dá)與腫瘤患者的臨床病理各指標(biāo)之間的關(guān)系。2.不同濃度的DHM分別處理卵巢癌SKOV3和A2780細(xì)胞至既定時(shí)間后,采用CCK8法檢測各組細(xì)胞的活力;劃痕（Wound healing）實(shí)驗(yàn)和Transwell分析癌細(xì)胞遷移及侵襲能力的變化;流式... 

【文章來源】：重慶醫(yī)科大學(xué)重慶市

【文章頁數(shù)】：128 頁

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【部分圖文】：

卵巢組織及各腫瘤的形態(tài)(HE,200×,標(biāo)尺示100μm)

采用IHC染色檢測不同類型的卵巢腫瘤組織中GRASP65蛋白的細(xì)胞內(nèi)定位及表達(dá)情況,結(jié)果如圖1.2所示,GRASP65蛋白的陽性表達(dá)分布在細(xì)胞漿內(nèi),呈棕黃/褐色、細(xì)顆粒狀。正常卵巢組織中GRASP65幾乎不表達(dá)、或呈低表達(dá);與良性卵巢腫瘤組織相比,GRASP65蛋白在惡性及交界性腫瘤組織中的表達(dá)增高。粘液性腫瘤中GRASP65的表達(dá)亦高于漿液性腫瘤組織中的表達(dá)(統(tǒng)計(jì)分析結(jié)果見表1.13)。2.3 WB檢測卵巢癌患者的手術(shù)標(biāo)本中GRASP65蛋白的表達(dá)

WB檢測分析6例卵巢漿液性癌患者的癌組織(T1-6)和癌旁正常的卵巢組織(Para-carcinoma tissue,PT1-6)內(nèi)GRASP65蛋白的表達(dá)水平,屬相同個(gè)體來源的卵巢癌組織和癌旁正常組織,每個(gè)組織樣本隨機(jī)取三小塊(約50mg),注意避開壞死區(qū)、剔除腫瘤包膜,提取組織總蛋白進(jìn)行檢測分析。結(jié)果如圖1.3所示,癌組織內(nèi)的GRASP65蛋白表達(dá)比癌旁的正常卵巢組織中的表達(dá)明顯增加(P<0.01)。2.4 GRASP65表達(dá)與臨床病理指標(biāo)的關(guān)系分析

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