真菌多糖主要存在于真菌子實(shí)體、菌絲體和發(fā)酵液中,研究表明真菌多糖具有抗腫瘤、免疫增強(qiáng)、抗病毒等多種生物活性,尤其在抗腫瘤方面,真菌多糖可通過直接或間接途徑來抑制腫瘤細(xì)胞增殖并誘導(dǎo)其發(fā)生凋亡,引起廣大學(xué)者的關(guān)注。結(jié)腸癌是世界排名第三的消化道惡性腫瘤,隨著人們生活方式和飲食習(xí)慣的改變,中國結(jié)腸癌的發(fā)病率和死亡率逐年上升。目前,治療結(jié)腸癌的主要方式是手術(shù)切除、輔以化療為主,但患者通常預(yù)后不良,出現(xiàn)嚴(yán)重的毒副作用。因此,尋找治療或輔助治療結(jié)腸癌的新型、無毒副作用的藥物是必要的。擬康氏木霉（Trichoderma kanganensis）是本實(shí)驗(yàn)室從玉米秸稈中分離到的一株菌株,經(jīng)鑒定,屬于真菌類半知菌亞門、絲胞綱、木霉屬,前期研究發(fā)現(xiàn)擬康氏木霉具有抑菌作用,但是并未對(duì)該菌的其它活性進(jìn)行深入研究。黑根霉（Rhizopus nigricans）是一種接合菌絲狀真菌,本課題組前期從其發(fā)酵液中提取分離到一種分子量為9,682 Da的活性多糖EPS1-1,證實(shí)EPS1-1具有免疫增強(qiáng)活性,可誘導(dǎo)人結(jié)腸癌細(xì)胞HCT-116和小鼠結(jié)腸癌細(xì)胞CT26凋亡,抑制S180荷瘤和CT26移植瘤小鼠腫瘤的生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移以及... 

【文章來源】：山東大學(xué)山東省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：158 頁

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【部分圖文】：

圖２．１擬康氏木霉菌絲體多糖的發(fā)酵及形態(tài)

?山東大學(xué)博士畢業(yè)論文???交換柱進(jìn)行初步分離，可見在〇－〇．５ＭＮａＣｌ緩沖液處有組分被洗脫出來，根據(jù)洗??脫曲線的峰形收集洗脫下來的組分（圖２．２Ａ）；對(duì)上述得到的多糖經(jīng)ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－??１００凝膠層析柱進(jìn)一步純化，可得到單一且對(duì)稱的峰，將組分進(jìn)行收集（圖２．２Ｂ）；??最后將上述得到的多糖再經(jīng)Ｓｅｐｈａｃｒｙｌ?Ｓ－３００ＨＲ進(jìn)一步純化，呈現(xiàn)單一的洗脫峰??（圖２．２Ｃ），透析后冷凍千燥，并命名為ＴＰＳ。??Ｉ?ＨＵ－ｙ??１?ｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ?ｋａｎｇａｎｃｎｓｉｓ?Ｌｉｑｕｉｄ－ｃｕｌｔｕｒｅｄ?ｍｙｃｅｌｉａ?Ｍｙｃｃｌｉａ?ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ??圖２．１擬康氏木霉菌絲體多糖的發(fā)酵及形態(tài)。??Ｆｉｇ．?２．１?Ｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎ?ａｎｄ?ｍｏｑ３ｈｏｌｏｇｙ?ｏｆ?ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ?ｆｒｏｍ?ｔｈｅ?ｍｙｃｅｌｉａ?ｏｆ?Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ??ｋａｎｇａｎｅｎｓｉｓ．??Ａ?Ｂ?Ｃ??ｉ?＇丨廠?—?．?］?Ｉ??！?＇?Ｌｌ?Ｉ；?Ｉ??｜?／?「ｆ?Ｉ?Ｉ＂＇?＇?��；??＇ｉ＇ＵＬ—１?ｕ＼—??￣?０?２０?４０?６０?ＨＯ?－■??、ｕｍｂｅｒ?ｏｒｉｕｂｅＭ＾ｔｍｌｌｕｂｅｔ?Ｎ〇ｍｌ？？ｒ?ｎｆ?ｌｕｂｅ?（ｉ．ｆｍＭｕｂｒ）??＼ｕｍｂｅｒ?ｏｆ?ｌｕｂｔ－?（３ｍｌ＇ｌｕｈｃ）??圖２．２擬康氏木霉菌絲體粗多糖的分禺純化。（Ａ?）?ＤＥＡＥＳｅｐｈａｒｏｓｅＦａｓｔＦｉｏｗ層析圖；??（Ｂ）?ＳｅｐｈａｄｅｘＧ＿１００?層析圖；（Ｃ）?ＳｅｐｈａｃｒｙｌＳ－３００?ＨＲ?層析圖。??Ｆｉｇ．

?山東大學(xué)博士畢業(yè)論文???根據(jù)回歸方程Ｙ＝０．００５６ｘ＋０．０９３，相關(guān)系數(shù)為Ｒ２＝０．９９８６，即可計(jì)算出ＴＰＳ的總??糖含量為９９．５２９％。ＴＰＳ中沒有檢測(cè)出蛋白含量。ＴＰＳ的碘－碘化鉀反應(yīng)表現(xiàn)為陰??性，表明ＴＰＳ樣品中不含淀粉。對(duì)ＴＰＳ進(jìn)行全波長(zhǎng)紫外掃描，在２６０ｎｍ和２８０??ｎｍ處均未見明顯的吸收峰，表明ＴＰＳ中不含蛋白質(zhì)和核酸（圖２．３）。??２?５??１：＼??０５?■?＼??〇??■?ｒ?．??????２００?２５０?３００?３５０?４００?４５０?５００??Ｗａｖｅｌｅｎｇｔｈ（ｎｍ）??圖２．３?ＴＰＳ的紫外全波長(zhǎng)掃描圖譜??Ｆｉｇ．?２．３?Ｕｌｔｒａｖｉｏｌｅｔ?ｆｕｌｌ?ｗａｖｅｌｅｎｇｔｈ?ｓｃａｎｎｉｎｇ?ｓｐｅｃｔｒｕｍ?ｏｆ?ＴＰＳ．??２．３．３?ＴＰＳ的純度和平均分子童分析??ＨＰＳＥＣ－ＭＡＬＳ可用于分析ＴＰＳ的純度及分子量分布情況。在ＲＩ信號(hào)圖譜??中，ＴＰＳ表現(xiàn)出對(duì)稱且尖銳的峰Ｃ圖２．４），而在圖２．５中ＴＰＳ分子量分布范圍較??窄，表明ＴＰＳ是均一的多糖組分。表２．１中總結(jié)了?ＴＰＳ的分析結(jié)果。ＴＰＳ的重??均分子量（Ｍｗ）、數(shù)均分子量（Ｍｎ）和ｚ－均分子量（Ｍｚ）分別為３．０７４ｅ＞＜１０５Ｄａ、??１．７２８ｅｘｌ〇５Ｄａ?和?３．１６６ｅｘｌ〇６Ｄａ，多分散指數(shù)（Ｍｗ／Ｍｎ）為?１．７２５。ＴＰＳ?的重均均??方半徑（Ｒｗ）、數(shù)均均方半徑（Ｒｎ）和Ｚ均均方半徑分別為３１．１?ｎｍ、３４．７ｎｍ和??３３．５?ｎｍ。表明ＴＰＳ均一且結(jié)構(gòu)較為緊密，與多糖的分離純化結(jié)果較為一致。??２７??

【參考文獻(xiàn)】：
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