研究背景和目的:耐順鉑人上皮性卵巢癌和晚期卵巢癌的治療已成為目前臨床醫(yī)師治療上棘手問(wèn)題,尋找安全有效的抗耐順鉑化療藥物的卵巢癌中藥意義重大。我們前期工作發(fā)現(xiàn)雷公藤內(nèi)酯醇（TP）對(duì)耐順鉑藥物的人上皮性卵巢癌有抑制作用,并研究了其相關(guān)抑制機(jī)制。腫瘤相關(guān)巨噬細(xì)胞（TAMs）可誘導(dǎo)惡性腫瘤的生長(zhǎng),TAMs的極化在惡性腫瘤的發(fā)生、發(fā)展中起重要作用,而PI3K/Akt/NF-κB信號(hào)通路在TAMs極化扮演著重要的角色。我們前期工作也發(fā)現(xiàn),TP可阻斷PI3K/AKT信號(hào)通路進(jìn)而抑制耐順鉑人上皮性卵巢癌生長(zhǎng)。據(jù)此提出假設(shè):TP可通過(guò)抑制PI3K/AKT/NF-κB信號(hào)通路促進(jìn)TAMs向M1型巨噬細(xì)胞極化,抑制其向M2型巨噬細(xì)胞極化,從而促進(jìn)卵巢癌細(xì)胞凋亡。因此,本實(shí)驗(yàn)從分子水平、細(xì)胞水平、組織以及動(dòng)物水平等多層次探討了TP作用于耐藥上皮性卵巢癌后TAMs極化情況及PI3K/AKT/NF-κB信號(hào)通路相關(guān)蛋白的變化,從而驗(yàn)證了TP通過(guò)對(duì)PI3K/AKT/NF-κB信號(hào)通路調(diào)節(jié)及調(diào)控腫瘤微環(huán)境進(jìn)而發(fā)揮抗腫瘤作用。這個(gè)新視點(diǎn)為T(mén)P為耐順鉑化療藥物的上皮性卵巢癌和晚期卵巢癌患者的治療提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)和理論基礎(chǔ)。方... 

【文章來(lái)源】：南昌大學(xué)江西省 211工程院校

【文章頁(yè)數(shù)】：80 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【部分圖文】：

八P13K/Akt/NF-κB信號(hào)通路及其下游因子示意圖

在PI3K/Akt信號(hào)通路中,Akt(也稱為PKB)是PI3K最顯著的效應(yīng)物,由Akt1、Akt2、Akt3組成,可調(diào)節(jié)細(xì)胞活性、增殖、分化和中間代謝等。研究顯示PI3K/Akt信號(hào)通路在TAMs極化中起到重要作用。Akt1激酶對(duì)巨噬細(xì)胞極化的影響有差異,敲除Akt1基因引起了M1極化,而敲除Akt2導(dǎo)致M2極化,調(diào)節(jié)巨噬細(xì)胞的生存。NF-κB是調(diào)節(jié)巨噬細(xì)胞誘導(dǎo)的炎癥細(xì)胞因子和免疫應(yīng)答中重要的轉(zhuǎn)錄因子,在PI3K/Akt信號(hào)通路中也是一個(gè)關(guān)鍵信號(hào)因子,NF-κB激活可導(dǎo)致M1極化,促進(jìn)炎性細(xì)胞因子分泌[88-90]。PI3K/AKT信號(hào)通路又參與了巨噬細(xì)胞的極化。如圖十九。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,DDP和TP分別單獨(dú)和聯(lián)合作用于A2780/DDP細(xì)胞成瘤裸鼠后,各組AKT及P65蛋白表達(dá)一致,無(wú)明顯差異;而P-AKT及P-P65蛋白表達(dá)存在差異。DDP、TP及聯(lián)合組中P-P65和P-AKT蛋白表達(dá)低于對(duì)照組,而聯(lián)合組中P-P65和P-AKT蛋白表達(dá)低于DDP和TP單獨(dú)組。PI3K/AKT信號(hào)通路是條生存通路,耐藥腫瘤細(xì)胞中AKT及NF-κB蛋白未發(fā)生磷酸化,故腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)旺盛。當(dāng)化療藥物或其他藥物干預(yù)后,信號(hào)通路相關(guān)蛋白發(fā)生磷酸化后,M1極化增加,M2極化減少。促凋亡作用機(jī)制可能與下調(diào)P-AKT及磷酸化NF-κB蛋白表達(dá)有關(guān),從而抑制PI3K/AKT/κB信號(hào)生存通路,促進(jìn)腫瘤凋亡。

鏡下觀察見(jiàn)THP-1細(xì)胞培養(yǎng)24小時(shí)后,細(xì)胞形態(tài)均一圓形懸浮生長(zhǎng),分布均勻,折光度良好,無(wú)顆粒,形態(tài)典型,細(xì)胞分裂生長(zhǎng)明顯,細(xì)胞數(shù)量增多,成對(duì)數(shù)期生長(zhǎng)。隨培養(yǎng)時(shí)間延長(zhǎng),細(xì)胞數(shù)目過(guò)多、生長(zhǎng)空間及營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的相對(duì)不足,導(dǎo)致THP-1細(xì)胞生長(zhǎng)逐步停止,之后細(xì)胞數(shù)量下降,細(xì)胞分裂消失。如圖一。3.1.2 佛波酯誘導(dǎo)THP-1 細(xì)胞結(jié)果

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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碩士論文
[1]雷公藤氯內(nèi)酯醇通過(guò)PI3K信號(hào)通路誘導(dǎo)肺癌細(xì)胞的自噬并增加A549/DDP對(duì)順鉑的敏感性[D]. 宋天嬌.福建醫(yī)科大學(xué) 2017
[2]雷公藤內(nèi)酯醇對(duì)人多發(fā)性骨髓瘤耐藥細(xì)胞株MM.1R的作用研究[D]. 潘含章.浙江大學(xué) 2006



本文編號(hào)：2896567