本文選題：白蠟　切入點：白蠟高級烷醇　出處：《中國林業(yè)科學研究院》2017年博士論文

【摘要】：脂溢性脫發(fā)是當今三大脫發(fā)之一,多發(fā)生于男性,且隨著壓力和飲食結(jié)構(gòu)的改變,脂溢性脫發(fā)越來越偏向于年輕化,給年輕人的自尊帶來了很大的傷害。目前國際上公認的用于治療雄激素性脫發(fā)的藥物主要為米諾地爾和非那雄胺。但是這兩種藥物具有明顯的副作用。尋找安全性好、對脫發(fā)生物活性高的藥物成為當今研究的熱點。白蠟是半翅目Hemiptera蚧總科Coccoidea白蠟蚧屬Ericerus的白蠟蟲雄性幼蟲分泌的次生代謝物質(zhì)。在中國民間白蠟常用作生發(fā)劑。但是對于白蠟治療脫發(fā)的類型及其作用機理還未見報道。白蠟高級烷醇是采用氫化鋁鋰或還原法從白蠟中提取得到的一元飽和醇的混合物。研究表明高級烷醇具有廣泛的藥理活性,但是其對脫發(fā)治療效果方面的研究鮮有報道。為了明確白蠟及白蠟高級烷醇治療脫發(fā)的類型和作用機理,本論文從動物和細胞兩個層面研究白蠟及白蠟高級烷醇對脂溢性脫發(fā)的作用效果及機理。動物方面以KM小鼠為研究對象探討白蠟及白蠟高級烷醇對小鼠毛發(fā)外觀、毛囊形態(tài)、小鼠血液中激素水平、小鼠皮膚內(nèi)生長因子表達量的影響;細胞方面以人真皮乳頭細胞為研究對象探討白蠟及白蠟高級烷醇對人真皮乳頭細胞的增殖作用以及對蛋白表達量的調(diào)節(jié)作用。主要的研究結(jié)果顯示:(1)白蠟及白蠟高級烷醇對小鼠毛發(fā)外觀和毛囊形態(tài)變化的影響。模式組和溶劑對照組小鼠背部毛發(fā)脫落明顯并散布有斑禿塊,毛色發(fā)暗,毛囊長度縮短,毛囊微型化。而在模式小鼠背部涂抹白蠟及白蠟高級烷醇后小鼠背毛順滑有光澤,背部脫毛不明顯,相同面積范圍內(nèi)小鼠毛發(fā)重量明顯高于模式組和溶液組。此外白蠟及白蠟高級烷醇能明顯促進毛囊長度、毛球直徑、生長期(A)/休止期(T)比值以及毛囊密度的增加。其中10%白蠟和1%白蠟高級烷醇促進毛囊生長的活性高于非那雄胺。(2)白蠟及白蠟高級烷醇對激素的調(diào)節(jié)作用給藥期間,白蠟及白蠟高級烷醇對小鼠體內(nèi)雌二醇的含量沒有調(diào)節(jié)作用。而對睪酮含量和睪酮與雌二醇(TE/E2)比例的調(diào)節(jié)作用隨著給藥時間的延長而發(fā)生變化。其中給藥第28d,白蠟及白蠟高級烷醇能明顯降低小鼠血液中睪酮的含量和TE/E2比例,調(diào)整紊亂的激素水平。給藥第60d,給藥組和模式組小鼠血液中TE/E2比值與CK組之間差異不顯著,小鼠激素水平趨于正常。然而2%白蠟高級烷醇組小鼠血液中睪酮的含量明顯低于模式組。體外研究發(fā)現(xiàn)白蠟及白蠟高級烷醇能夠降低睪酮轉(zhuǎn)換為二氫睪酮的量,抑制5α-還原酶的活性,其對5α-還原酶的抑制中濃度高于2%非那雄胺。(3)白蠟及白蠟高級烷醇對生長因子表達量的調(diào)節(jié)作用與模式組相比,白蠟及白蠟高級烷醇能明顯提高小鼠皮膚內(nèi)血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)、表皮生長因子(EGF)和堿性磷酸酶的表達量。其中,白蠟及白蠟高級烷醇促進小鼠皮膚內(nèi)VEGF和EGF表達量的作用與劑量無關(guān)。其中白蠟及白蠟高級烷醇對VEGF的作用效果與5%米諾地爾差異不顯著,白蠟與白蠟高級烷醇之間小鼠皮膚內(nèi)的VEGF的表達量差異不顯著。雖然不同濃度白蠟之間或者不同濃度白蠟高級烷醇之間EGF的表達量差異不顯著。但是,在白蠟組中10%白蠟組小鼠皮膚內(nèi)EGF的表達量最低,在白蠟高級烷醇組中1%白蠟高級烷醇組小鼠皮膚內(nèi)的EGF表達量最高。其中1%白蠟高級烷醇組小鼠皮膚內(nèi)EGF的表達量明顯高于10%白蠟組和5%米諾地爾組,而10%白蠟組小鼠皮膚內(nèi)EGF的表達量與5%米諾地爾組差異不顯著。小鼠皮膚內(nèi)堿性磷酸酶的活性隨著給藥時間發(fā)生改變。其中10%白蠟組和1%白蠟高級烷醇組小鼠皮膚內(nèi)堿性磷酸酶的含量變化趨勢與5%米諾地爾組相似。5%白蠟組和2%白蠟高級烷醇小鼠皮膚內(nèi)堿性磷酸酶的含量在試驗第28d到45d出現(xiàn)平臺期,隨后小鼠皮膚內(nèi)堿性磷酸酶含量降低。(4)白蠟及白蠟高級烷醇對細胞生長的影響吐溫80能夠增加白蠟及白蠟高級烷醇在水中的溶解度,其最佳制備條件為吐溫80:白蠟=50:1或吐溫80:白蠟高級烷醇=5:1,溶液pH3~4,加熱溫度為91℃,攪拌時間30min。吐溫80用量在1.25~6.25μg/mL范圍內(nèi)對人真皮乳頭細胞沒有傷害,細胞能夠安全生長。在吐溫80安全用量范圍內(nèi)白蠟及白蠟高級烷醇能促進健康細胞和模式細胞的增殖,并且能抑制TGF-β、caspase3、caspase8和caspase9蛋白的表達。其中,白蠟用量為1.25μg/mL,白蠟高級烷醇用量為12.5μg/mL時人真皮乳頭細胞的增值率最高。白蠟及白領(lǐng)高級烷醇對TGF-β2蛋白的調(diào)節(jié)作用差異不明顯,但是這兩個物質(zhì)對caspase蛋白的調(diào)節(jié)作用差異比較明顯。白蠟對caspase9的調(diào)節(jié)作用較強,白蠟高級烷醇對caspase3和caspase8的調(diào)節(jié)作用較強。綜上所述,白蠟及白蠟高級烷醇能促進脂溢性脫發(fā)模式小鼠毛發(fā)的生長。其作用的靶標位點為毛球、5-α還原酶、二氫睪酮與受體的結(jié)合三個部位。白蠟及白蠟高級烷醇促進毛囊生長的作用機理為延長毛囊的生長期和阻止激素對毛囊的傷害兩個方面。其中延長毛囊的生長期主要與促進血管內(nèi)皮生長因子和表皮生長因子的表達以及促進真皮乳頭細胞的增殖有關(guān)。阻止激素對毛囊傷害方面的機理主要表現(xiàn)為降低小鼠體內(nèi)睪酮的含量,抑制5α-還原酶的活性,阻止二氫睪酮與雄激素受體的結(jié)合,并且能抑制caspase細胞凋亡信號通路。其中白蠟抑制內(nèi)源性細胞凋亡信號通路,白蠟高級烷醇抑制外源性新版信號通路
[Abstract]:This paper deals with the effect and mechanism of higher alkanol on hair appearance , hair follicle morphology , hair follicle morphology and hair follicle morphology in mice . The effects of white wax and high alkanol on the growth of human dermal papilla cells were studied .

【學位授予單位】：中國林業(yè)科學研究院
【學位級別】：博士
【學位授予年份】：2017
【分類號】：R758.71;R-332

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本文編號：1685419