本文選題：高血壓　切入點(diǎn)：丹參有效成份　出處：《河北醫(yī)科大學(xué)》2017年博士論文　論文類型：學(xué)位論文

【摘要】：第一部分均勻設(shè)計(jì)與正交設(shè)計(jì)聯(lián)用篩選丹參有效成份抑制成纖維細(xì)胞增值的最佳配伍配比目的:丹參是我國(guó)用于治療心腦血管疾病的傳統(tǒng)中藥,包含4種主要水溶性成份:丹參素(DSS,S)、丹酚酸A(Sal-A,A)、丹酚酸B(Sal-B,B)和原兒茶醛(PAL,P),我們簡(jiǎn)稱為(SABP)。大量的研究已經(jīng)證實(shí),每種成份都可通過(guò)不同的作用機(jī)理起到心血管保護(hù)作用。血管外膜成纖維細(xì)胞(adventitial fibroblast,AF)作為一個(gè)生物學(xué)處理中心從外向內(nèi)(outside-in)調(diào)節(jié)血管的結(jié)構(gòu)和功能,血管在應(yīng)答應(yīng)激和損傷的過(guò)程中,AF首先被快速激活,通過(guò)本身改編而顯示不同功能和結(jié)構(gòu)的行為,被視為血管應(yīng)答的始動(dòng)因素。目前中藥有效成份配伍研究已經(jīng)成為中藥創(chuàng)新研究的一種新模式。因此,我們?cè)O(shè)想運(yùn)用均勻設(shè)計(jì)和正交設(shè)計(jì)聯(lián)合應(yīng)用的方法,通過(guò)觀察其對(duì)AF增殖的作用,找出丹參4種主要水溶性成份的最佳配伍配比關(guān)系。方法:本實(shí)驗(yàn)選用成年Sprague Dawley(SD)大鼠,培養(yǎng)其胸主動(dòng)脈外膜成纖維細(xì)胞,運(yùn)用MTT方法,觀察藥物對(duì)其增殖的抑制作用,應(yīng)用酶標(biāo)儀讀取結(jié)果并計(jì)算抑制率。篩選步驟如下:1、初步篩選注射用丹參(凍干)粉(salvia miltiorrhiza lyophilized powder,SMLP)及丹參的四種有效成份各自的有效應(yīng)用劑量范圍。2、采用均勻設(shè)計(jì)和正交設(shè)計(jì)聯(lián)用的方法,進(jìn)行成份劑量和配伍的篩選。3、把實(shí)驗(yàn)得到的最優(yōu)組合再次排列組合進(jìn)行驗(yàn)證。結(jié)果:1藥物濃度初篩結(jié)果:每種藥物對(duì)AF的抑制率最顯著的有效濃度范圍是:Sal-A,Sal-B,DSS的有效濃度范圍都是(10-3 mol/L,10-4 mol/L,10-5 mol/L),PAL的有效濃度范圍是(10-2 mol/L,10-3 mol/L,10-4 mol/L),但是SMLP對(duì)血管外膜成纖維細(xì)胞無(wú)明顯的抑制作用,且各濃度之間沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異;2均勻設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果:結(jié)合初篩藥物濃度實(shí)驗(yàn)得到的結(jié)果,四個(gè)成份各選取有效劑量范圍內(nèi)6個(gè)不同濃度,然后按照均勻設(shè)計(jì)表,即4因素6水平均勻表u6(64)安排實(shí)驗(yàn),結(jié)果顯示第3組是最有效的配伍組合,抑制作用最顯著,有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。即:s3(10-4mol/l),a6(10-6mol/l),b2(5×10-4mol/l),p4(5×10-4mol/l);3正交設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果:結(jié)合均勻設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)得到的結(jié)果,在最優(yōu)的處理中,根據(jù)各成份對(duì)應(yīng)劑量相距較近的范圍內(nèi),再次選擇低、中、高3個(gè)不同劑量,對(duì)dss、sal-a、sal-b、pal四個(gè)成份的有效劑量低、中、高進(jìn)行正交設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)研究,選擇l9(34)正交表,結(jié)果顯示第6組是抑制作用最顯著的配伍組合,具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。即:s2(1.5×10-4mol/l),a3(7×10-6mol/l),b1(3×10-4mol/l),p2(5×10-4mol/l);4將丹參4種成份再次進(jìn)行排列組合,進(jìn)一步驗(yàn)證最佳配伍配比。根據(jù)均勻設(shè)計(jì)和正交設(shè)計(jì)的結(jié)果,為各成份確定一個(gè)最適宜有效劑量,對(duì)dss、sal-a、sal-b、pal四個(gè)成份再次排列組合:s、a、b、p,sa、sb、sp、ab、ap、bp、sab、sap、sbp、abp、sabp共15個(gè),再次考察各種配伍組合對(duì)af增殖的影響,結(jié)果顯示sabp組的抑制率最大,為最佳配伍配比組合。結(jié)論:本實(shí)驗(yàn)運(yùn)用均勻設(shè)計(jì)和正交設(shè)計(jì)聯(lián)合應(yīng)用的實(shí)驗(yàn)方法,篩選出丹參的四種主要水溶性成份(dss、sal-a、sal-b、pal),抑制血管外膜成纖維細(xì)胞增殖的最佳配伍配比關(guān)系和濃度,即s(1.5×10-4mol/l),a(7×10-6mol/l),b(3×10-4mol/l),p(5×10-4mol/l),比例為(150，

本文編號(hào)：1586762