養(yǎng)血固腎湯對大鼠骨折愈合影響的實驗觀察研究
本文關(guān)鍵詞: 養(yǎng)血固腎湯 骨折愈合 試驗研究 鈣磷乘積 出處:《廣州中醫(yī)藥大學》2017年博士論文 論文類型:學位論文
【摘要】:目的:骨折是臨床上常見的疾病之一,主要分為骨小梁中斷裂和骨皮質(zhì)斷裂,而當中最棘手的問題是骨折不愈合或延遲愈合。骨折的愈合過程是一個極其復雜的過程,當中牽涉組織學、生物學、內(nèi)分泌學及生物力學等知識。影響骨折愈合的因素眾多,包括全身因素和局部因素、醫(yī)源性因素、骨生長因子、微量元素、生物力學因素。對于如何促進骨折的愈合過程、恢復骨的正常功能及結(jié)構(gòu)一直是醫(yī)學界研究的焦點及熱點。學者們經(jīng)過不同的研究及實驗方法,從多角色去探討,才有現(xiàn)今對骨折愈合過程的認識,F(xiàn)行的治療骨折的方法很多,而且部份療效顯著,但亦有好多的不足,在這樣立足點上,祖國醫(yī)治骨折病癥的長遠經(jīng)驗及技術(shù)累積可以好好發(fā)揮作用,因其有簡單方便、安全有效、毒副作用低及成本低廉等優(yōu)點,一直被醫(yī)生及患者認可。本課題在祖國醫(yī)學理論指導下,展開"養(yǎng)血固腎湯"對骨折愈合過程的促進作用效果的研究,嘗試從多角度著手,透過不同層面的觀察,剖析養(yǎng)血固腎湯對骨折愈合的干涉作用及解釋當中的機制。基于文獻記錄上,有關(guān)觀察"養(yǎng)血固腎湯"對骨折愈合過程的促進作用效應(yīng)研究目前未見報導。本文起著先導的作用,于不同研究層面上,對"養(yǎng)血固腎湯"進行觀察,從而提高對"養(yǎng)血固腎湯"于骨折愈合過程的理解,以利指導臨床工作,為推動中醫(yī)藥的普及使用出一分綿力。研究方法:動物模型準備工作:80只SD雄性大鼠,開始體重為168.5~237.2g,四肢無畸形,活動自如,生命體征平穩(wěn),飲食正常,無傳染病,整個飼養(yǎng)及實驗過程在SPF級環(huán)境內(nèi)進行。到體重合適時實驗開始,于大鼠左脛骨中段行開放性骨折模型造模,行克氏針骨髓腔逆行內(nèi)固定,縫合切口,不包扎。手術(shù)后挑選造模成功的72只大鼠,按體重隨機分為空白組、對照組及養(yǎng)血固腎湯劑組,每組24只。空白組、對照組及養(yǎng)血固腎湯劑組分別給予純凈水、恒古骨傷愈合劑及養(yǎng)血固腎湯按體重灌胃給藥。第一部份生化指標觀察:術(shù)后d7,d14,d24及d35各組按之前隨機編定的數(shù)字,各解剖6只動物,采取血液樣本。用全自動生化檢測儀器,檢查血鈣、血磷及ALP三項生化指標。第二部份組織病理學觀察:于前述每段時間隨機解剖的6只動物中,處死后取左下肢脛骨連股骨中下段的部分作成標本,作組織病理學分析;根據(jù)組織病理學指導下,檢測組織標本,用光學顯微鏡隨性取3個視野點,觀察骨小梁面積百分數(shù)、成骨細胞指數(shù)及破骨細胞指數(shù)。第三部份微計算器斷層掃描技術(shù)(Micro-CT)觀察:于前述每段時間隨機解剖的6只動物中,隨機取當中3只動物,取左下肢脛骨連股骨中下段的部分作成標本,送往檢測中進行Micro-Ct檢測。使用Micro-CT檢測骨折部位,選取感興建區(qū)(region of interest,ROD),利用軟件重塑圖像,透過分析圖像及系統(tǒng)檢測,采集BMD,BV/TV,TV,Tb.Th,Tb.Sp,Tb.N及SMI等多項骨參數(shù)。統(tǒng)計學分析:所有數(shù)據(jù)采用(x±s)表示,應(yīng)用SPSS 21.0軟件進行統(tǒng)計分析;計量資料數(shù)據(jù)方差齊,或數(shù)據(jù)經(jīng)轉(zhuǎn)換后方差齊,則采用單因素方差分析;若數(shù)據(jù)經(jīng)轉(zhuǎn)換后方差仍不齊,采用秩和檢驗進行統(tǒng)計分析。成果:于生化指標上,養(yǎng)血固腎湯劑組實驗早期相比空白組及對照組明顯增加血磷值(P0.05),以及增加鈣磷乘積值(P0.01),促進鈣鹽沉積,血鈣值伴隨減低(P0.05),從而令到血液中的鈣離子進入基質(zhì),由于成骨細胞的作用,使鈣及磷積聚及結(jié)合,形成鈣鹽沉積,加速骨痂的建立及重塑,有利于骨折愈合的發(fā)展。而當中血清的鈣離子濃度亦會相應(yīng)降低。于組織病理學上,d7,相比空白組,養(yǎng)血固腎湯劑組在骨痂出現(xiàn)的基礎(chǔ)上,更早出現(xiàn)軟骨痂及骨小梁的排列,個別動物可見機化的血腫,骨痂內(nèi)可見大量軟骨細胞及稀疏的骨小梁。d14,相比空白組,養(yǎng)血固腎湯劑組動物骨折處可見纖維性骨痂及大量軟骨、致密的骨小梁,于數(shù)量上比較多。d24,相比空白組,養(yǎng)血固腎湯劑組大部分動物的骨小梁及骨痂轉(zhuǎn)變加快,表現(xiàn)為骨小梁明顯增粗,外骨痂開始形成板狀骨,骨痂內(nèi)可見少量軟骨細胞,個別動物骨髓腔再通幾方面。d35,空白組與養(yǎng)血固腎湯劑組部分動物俱見外骨痂形成板狀骨,骨髓腔內(nèi)可見骨髓細胞,部分動物骨痂內(nèi)可見少量軟骨細胞和增粗的骨小梁。反映養(yǎng)血固腎湯能促進骨痂的產(chǎn)生時間,而且對骨痂其后的改變,如軟骨性骨痂及硬骨痂的產(chǎn)生時間都有促進作用;于骨小梁結(jié)構(gòu)方面同樣有作用,表現(xiàn)為催使骨小梁的結(jié)構(gòu)提早出現(xiàn)及結(jié)構(gòu)稠密度增加兩方面,更能促進骨折愈合。于Micro-CT采集的骨參數(shù)結(jié)果中,有關(guān)BMD,BV/TV,TV,Tb.Th,Tb.Sp,Tb.N及SMI各組間未見統(tǒng)計學差異。d35,相比空白組,SMI數(shù)值明顯接近0,代表骨小梁多呈板狀骨,亦代表骨小梁的強度相比較高,對比Micro CT數(shù)據(jù)所整合的平面圖像,相比空白組,養(yǎng)血固腎湯能加促骨髓腔再通的時間,于骨小梁結(jié)構(gòu)方面同樣有作用,表現(xiàn)為催使骨小梁的結(jié)構(gòu)提早出現(xiàn)及結(jié)構(gòu)稠密度增加兩方面,更能促進骨折愈合。結(jié)論:1.養(yǎng)血固腎湯能夠升高血磷,使鈣磷乘積高峰顯著升高,促進鈣鹽沉積,提高骨折愈合中血清堿性磷酸酶的活性,增強體內(nèi)成骨細胞的活動,促進骨折愈合。2.養(yǎng)血固腎湯能促進骨痂的產(chǎn)生時間,而且對骨痂其后的改變,如軟骨性骨痂及硬骨痂的產(chǎn)生時間都有促進作用;于骨小梁結(jié)構(gòu)方面同樣有作用,表現(xiàn)為催使骨小梁的結(jié)構(gòu)產(chǎn)生及結(jié)構(gòu)稠密度增加兩方面,促進骨折愈合。3.養(yǎng)血固腎湯于Micro-CT采集的骨參數(shù)及所整合的平面圖像中,反映能加促骨髓腔再通的時間,致密性骨小梁及骨性骨痂的出現(xiàn)提早。
[Abstract]:Objective : To study the effect of nourishing blood and kidney soup on fracture healing process . A total of 72 rats were randomly divided into blank group , control group and blood - nourishing solid - kidney decoction group . In comparison with the blank group , there was no statistical difference in bone callus formation and bone callus formation . Compared with blank group , nourishing blood and strengthening kidney soup can increase blood phosphorus , increase the activity of serum alkaline phosphatase in fracture healing and promote fracture healing .
【學位授予單位】:廣州中醫(yī)藥大學
【學位級別】:博士
【學位授予年份】:2017
【分類號】:R285.5
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,本文編號:1525167
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