本文關(guān)鍵詞：小檗堿對同型半胱氨酸損傷內(nèi)皮細胞保護機制研究　出處：《北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院》2017年博士論文　論文類型：學(xué)位論文

  更多相關(guān)文章： 人臍靜脈內(nèi)皮細胞 一氧化氮 非對稱性二甲基精氨酸 同型半胱氨酸 小檗堿

【摘要】：背景與目的在心血管疾病的發(fā)生發(fā)展中,內(nèi)皮細胞功能不全是重要的發(fā)病機制和表現(xiàn),其中內(nèi)皮細胞產(chǎn)生一氧化氮(nitric oxide,NO)下降,引起內(nèi)皮介導(dǎo)的血管舒張功能、抑制血管平滑肌增殖和遷移等功能受損,是心血管疾病中內(nèi)皮功能不全的研究熱點。高同型半胱氨酸血癥是心血管危險因素之一,同型半胱氨酸(homocysteine,Hcy)可影響非對稱性二甲基精氨酸(asymmetric dimethylarginine,ADMA)代謝的相關(guān)酶,導(dǎo)致ADMA累積,而ADMA可競爭性抑制一·氧化氮合酶(nitric oxide synthase,NOS)的活性,降低內(nèi)皮細胞NO產(chǎn)量,損傷內(nèi)皮功能。小檗堿(berberine,BBR)是從中草藥黃連等植物中提取分離得到的一類異喹啉類生物堿。細胞及動物研究發(fā)現(xiàn),小檗堿具有保護內(nèi)皮的功能,可減少氧化應(yīng)激、增加NO的表達、減少凋亡等,臨床研究也發(fā)現(xiàn),小檗堿在控制血壓、血糖、抗心室重構(gòu)等方面有良好作用。但目前尚無研究探究小檗堿在同型半管氨酸損傷條件下對內(nèi)皮功能的保護作用,以及此保護作用是否與ADMA代謝通路相關(guān)。本研究在人臍靜脈內(nèi)皮細胞(human umbilical vein endothelial cell,HUVEC)體系中,探究小檗堿對同型半胱氨酸損傷的保護作用及機制,為小檗堿的內(nèi)皮保護機制提供新的思路。方法在體外培養(yǎng)人臍靜脈內(nèi)皮細胞。細胞同步化后,在培養(yǎng)體系中加入3000μM或5000μM濃度的同型半胱氨酸,培養(yǎng)12h、24h、48h后收集細胞和上清,并提取細胞中總mRNA,逆轉(zhuǎn)錄為cDNA。用CCK8試劑盒細胞活性,用Griess法測定細胞上清液中NO濃度,用LC-MS法測定細胞上清液中ADMA濃度,并用熒光定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(quantitative polymerase chain reaction,qPCR)法測定 NO 及 ADMA代謝相關(guān)酶mRNA表達水平的變化,以探究Hcy損傷內(nèi)皮細胞的表現(xiàn)和機制。之后,在上述加入Hcy的損傷體系中,加用0、1.25μM、2.5μM、5.OμM、10.0μM濃度的小檗堿干預(yù),培養(yǎng)12h、24h、48h后,用同樣的方法收集細胞和上清,并測定上述指標(biāo)的變化情況,以探究小檗堿對Hcy損傷條件下的內(nèi)皮細胞的保護作用。結(jié)果同型半胱氨酸在3000μM濃度下對HUVEC細胞活性無顯著影響,但500μM濃度則可引起細胞活性顯著降低。同型半胱氨酸可降低eNOS和DDAH1表達、增加PRMT表達,導(dǎo)致ADMA累積,損傷內(nèi)皮細胞產(chǎn)生NO的能力。在同型半胱氨酸損傷條件下,小檗堿干預(yù)可提高HUVEC細胞活性,降低ADMA水平,增加HUVEC的NO產(chǎn)量,但在大劑量同型半胱氨酸損傷、小檗堿干預(yù)時間較長以后,可導(dǎo)致NO水平進一步降低。在某些條件下,小檗堿可增加eNOS和DDAH1的表達,降低PRMT1表達,發(fā)揮內(nèi)皮保護作用。結(jié)論同型半胱氨酸對HUVEC細胞活性和NO產(chǎn)生有損傷作用,可能與降低eNOS和DDAH1表達、增加PRMT1表達,從而引起ADMA累積有關(guān),但具體機制尚需進一步研究。小檗堿可提高HUVEC細胞活性,降低同型半胱氨酸損傷條件下的ADMA水平,增加NO產(chǎn)量,保護作用持續(xù)時間大約為12～24h,若濃度不足以拮抗同型半胱氨酸損傷,或超出保護作用持續(xù)時間,小檗堿干預(yù)反而會使NO水平進一步降低。小檗堿的保護作用可能與影響eNOS、DDAH1和PRMT1等NO和ADMA代謝相關(guān)酶的表達有關(guān),但具體機制尚需進一步實驗證實。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號】：R285

【相似文獻】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 劉欣,石應(yīng)康,祝彼得;培養(yǎng)內(nèi)皮細胞的分化[J];生物醫(yī)學(xué)工程學(xué)雜志;1999年02期

2 衛(wèi)朝霞,劉永波;一種新的內(nèi)皮細胞分離方法[J];河南職工醫(yī)學(xué)院學(xué)報;2003年03期

3 任德成;胡娟娟;張均田;杜冠華;;血管內(nèi)皮細胞損傷機制研究[J];醫(yī)學(xué)研究通訊;2003年10期

4 潘虹;王庭槐;;內(nèi)皮細胞caveolae,caveolin-1的生理功能[J];醫(yī)學(xué)綜述;2006年22期

5 殷觀梅;;血管內(nèi)皮細胞生長抑制因子研究進展[J];河北醫(yī)藥;2008年12期

6 劉寶宜,陳鐵鎮(zhèn),張寶庚,宋繼業(yè);動脈粥樣硬化形成過程中內(nèi)皮細胞病變的研究(摘要)——主動脈內(nèi)皮細胞平掙,掃描電鏡及透射電鏡的觀察[J];中國醫(yī)科大學(xué)學(xué)報;1981年S1期

7 劉寶宜,陳鐵鎮(zhèn),張寶庚,宋繼業(yè);動脈粥樣硬化形成過程中內(nèi)皮細胞的形態(tài)學(xué)變化的研究(主動脈內(nèi)皮細胞平鋪技術(shù),掃描電鏡及透射電鏡的方法)[J];中國醫(yī)科大學(xué)學(xué)報;1982年03期

8 張連元;;動脈粥樣硬化發(fā)病機理中平滑肌和內(nèi)皮細胞的機能[J];煤礦醫(yī)學(xué);1983年04期

9 劉懷瓊;李德馨;;內(nèi)皮細胞的功能與休克的關(guān)系[J];國外醫(yī)學(xué).麻醉學(xué)與復(fù)蘇分冊;1985年04期

10 何澤涌;;關(guān)于內(nèi)皮細胞研究的某些進展[J];山西醫(yī)藥雜志;1987年03期

相關(guān)會議論文 前10條

1 應(yīng)大君;陳衛(wèi)軍;周丁華;;內(nèi)皮細胞機械感受功能的實驗研究[A];面向21世紀(jì)的科技進步與社會經(jīng)濟發(fā)展（下冊）[C];1999年

2 鄧紅;李懿萍;來茂德;;高糖環(huán)境細胞間相互作用對內(nèi)皮細胞產(chǎn)生活性氧和血管內(nèi)皮細胞生長因子的影響[A];中華醫(yī)學(xué)會病理學(xué)分會2005年學(xué)術(shù)年會論文匯編[C];2005年

3 林萍章;PualJ.Pearson;RaymondCartier;KazuhiroHashimoto;HartzellV.Schaff;;內(nèi)膜再生過程中,內(nèi)皮細胞之反應(yīng)[A];海峽兩岸電子顯微學(xué)討論會論文專集[C];1991年

4 趙彭濤;李志超;董明清;賈斌;張莉莉;;LPS對培養(yǎng)的BPAECsⅠ型Na~+/H~+交換器活性的影響[A];第六次全國缺氧和呼吸病理生理學(xué)術(shù)會議論文摘要匯編[C];2003年

5 熊建瓊;朱佩芳;王正國;蔣建新;;髓樣分化蛋白-2在內(nèi)毒素與內(nèi)皮細胞結(jié)合中的作用[A];第十一次全國急診醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)會議暨中華醫(yī)學(xué)會急診醫(yī)學(xué)分會成立二十周年慶典論文匯編[C];2006年

6 王心華;甄永蘇;;烯二炔類抗生素力達霉素抑制內(nèi)皮細胞生長和誘導(dǎo)內(nèi)皮細胞凋亡[A];2000全國腫瘤學(xué)術(shù)大會論文集[C];2000年

7 李彥榮;應(yīng)晨江;易海維;衣衛(wèi)杰;孟依;劉烈剛;孫秀發(fā);;綠茶多酚對牛內(nèi)皮細胞窖蛋白-1表達的影響[A];湖北省、武漢市營養(yǎng)學(xué)會第十一屆學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2007年

8 蔡紹皙;張莉;韓亞剛;蔣稼歡;;流動腔底面內(nèi)皮細胞圖型化研究與圖像處理[A];第十次中國生物物理學(xué)術(shù)大會論文摘要集[C];2006年

9 汪毅;陳允欽;;高密度脂蛋白與內(nèi)皮功能[A];第六次全國中西醫(yī)結(jié)合心血管會學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2002年

10 馬向紅;黃體鋼;楊萬松;周麗娟;;四氫生物喋呤對內(nèi)皮細胞產(chǎn)生一氧化氮和超氧陰離子的影響[A];中華醫(yī)學(xué)會心血管病分會第八次全國心血管病學(xué)術(shù)會議匯編[C];2004年

相關(guān)重要報紙文章 前6條

1 ;中藥抗血栓機理及對內(nèi)皮細胞的生物醫(yī)學(xué)研究取得佳績[N];科技日報;2000年

2 趙軍;耳毒性藥物對耳蝸螺旋動脈平滑肌和內(nèi)皮細胞電生理特性的影響項目[N];科技日報;2007年

3 華朋;熱愛老年事業(yè) 投身老年醫(yī)藥[N];中國老年報;2000年

4 高國起;提升ACE2活性可消退動脈硬化斑塊[N];中國醫(yī)藥報;2010年

5 佳愉;中藥善調(diào)理 降壓重保腎[N];中國中醫(yī)藥報;2009年

6 劉道安;保護動脈內(nèi)膜 減少冠心病發(fā)生[N];中國醫(yī)藥報;2005年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前10條

1 白云城;LPS調(diào)控靜脈內(nèi)皮細胞膜形態(tài)及通透性引發(fā)血栓形成的實驗研究[D];昆明醫(yī)科大學(xué);2015年

2 宋恩;內(nèi)皮細胞源性KLF15調(diào)控TM激活蛋白C抗凝血途徑及MCP-1介導(dǎo)炎性反應(yīng)影響DVT形成的實驗研究[D];昆明醫(yī)科大學(xué);2015年

3 宋凱;口腔癌—內(nèi)皮細胞融合的分子調(diào)控機制及潛在作用[D];武漢大學(xué);2014年

4 薛珊珊;用代謝組學(xué)方法研究DNA甲基化對花生四烯酸代謝的影響及血管內(nèi)皮激活的機制[D];天津醫(yī)科大學(xué);2015年

5 李強;Rho GTPases及其信號通路在1-磷酸鞘胺醇介導(dǎo)的內(nèi)皮細胞功能變化中的作用[D];南方醫(yī)科大學(xué);2013年

6 陳學(xué)軍;SUR2B/Kir6.1通道開放劑介導(dǎo)內(nèi)皮細胞保護效應(yīng)分子途徑的研究[D];中國人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院;2016年

7 王蘇陽;埃他卡林對體循環(huán)、腦循環(huán)、肺循環(huán)微動脈內(nèi)皮細胞SUR2B/Kir6.1通道的激活作用及能量代謝物質(zhì)的調(diào)節(jié)作用[D];中國人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院;2016年

8 苑t，

本文編號：1351038