本文關(guān)鍵詞：黑素瘤細胞與間充質(zhì)基質(zhì)細胞通過外泌體相互作用的研究　出處：《南京醫(yī)科大學》2017年博士論文　論文類型：學位論文

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【摘要】：黑素瘤是惡性程度較高的腫瘤之一,對普通的化療和放療均不敏感�，F(xiàn)已發(fā)現(xiàn),黑素瘤的生長和轉(zhuǎn)移也依賴于微環(huán)境的激活。2011年,Wickline實驗室發(fā)現(xiàn),黑素瘤通過分泌的外泌體(exosome)改造前哨淋巴結(jié),從而促進癌細胞向該淋巴結(jié)的轉(zhuǎn)移。外泌體在此細胞間交流中扮演信息媒介的作用。然而,目前對于黑素瘤來源的外泌體如何與正常細胞相互作用,以及正常細胞受到哪些影響的報道還很少,相關(guān)的認識也很不充分。為研究惡性黑素瘤與周圍微環(huán)境之間的相互作用,揭示其可能的分子機制,指導(dǎo)治療黑素瘤的新藥研發(fā),進行此項研究。主要研究內(nèi)容和結(jié)果如下:一、從小鼠黑素瘤B16細胞的培養(yǎng)液上清中提取并鑒定外泌體(B16-外外泌體)利用超速離心法從細胞上清中分離外泌體,透射電鏡對其外形進行鑒定,nanosight進行粒徑分析,western blot對其表面標記CD81、Alix進行定量分析,通過上述結(jié)果,證明成功從B16上清中提取出外泌體。二、觀察B16-外泌體對間充質(zhì)基質(zhì)細胞(MSC)增殖遷移的影響及可能的分子機制首先,使用共聚焦熒光顯微鏡體外觀察B16-外泌體可以成功被間充質(zhì)基質(zhì)細胞攝取。其次,CCK-8實驗證實,攝取B16-外泌體的間充質(zhì)基質(zhì)細胞增殖率明顯增高,transwell小室實驗發(fā)現(xiàn),后者遷移率亦明顯增高。最后,免疫熒光檢測及western blot發(fā)現(xiàn),攝取B16-外泌體的MSC中的α-平滑肌肌動蛋白(α-SMA)表達量明顯上升,這種趨勢可部分被TGF-β受體的阻斷劑SB431542所阻斷。
【學位授予單位】：南京醫(yī)科大學
【學位級別】：博士
【學位授予年份】：2017
【分類號】：R739.5

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