本文關(guān)鍵詞：化合物GA對(duì)肺腺癌的實(shí)驗(yàn)性治療作用及相關(guān)機(jī)制研究

  更多相關(guān)文章： 化合物GA 肺腺癌 實(shí)驗(yàn)性治療 毒性 聯(lián)合用藥

【摘要】：目的:肺癌是發(fā)病率、死亡率上升最快的惡性腫瘤之一,目前多種治療效果不理想�；衔颎A是從一系列赤霉素衍生物中篩選得到、具有抗腫瘤活性的新四環(huán)二萜類化合物,前期研究發(fā)現(xiàn)對(duì)肺癌細(xì)胞有生長(zhǎng)抑制作用,本課題將在前期研究的基礎(chǔ)上,重點(diǎn)針對(duì)人非小細(xì)胞肺腺癌,以人非小細(xì)胞肺腺癌細(xì)胞株A549、SPCA1和宣威肺癌細(xì)胞株XWLC-05為體外實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ�、以A549和XWLC-05裸小鼠異種移植瘤為體內(nèi)實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ?重點(diǎn)評(píng)價(jià)化合物GA的體內(nèi)外抗腫瘤作用和體內(nèi)荷瘤動(dòng)物重要器官毒性評(píng)估,探討GA潛在的臨床應(yīng)用價(jià)值及可能的應(yīng)用模式,為推動(dòng)其臨床轉(zhuǎn)化奠定基礎(chǔ)。方法:第一部分:1.以人非小細(xì)胞肺腺癌細(xì)胞株A549、SPCA1和宣威肺癌細(xì)胞株XWLC-05為體外實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ?應(yīng)用MTT法檢測(cè)化合物GA對(duì)肺癌細(xì)胞增殖的抑制作用;2.以小鼠移植性肉瘤S180、人非小細(xì)胞肺腺癌A549和XWLC-05裸小鼠異種移植瘤為體內(nèi)實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ?以抑瘤率、腫瘤相對(duì)生長(zhǎng)率(T/C)為指標(biāo),評(píng)估化合物GA灌胃給藥體內(nèi)對(duì)腫瘤生長(zhǎng)的抑制作用,并同步評(píng)估GA對(duì)荷瘤小鼠體重、重要免疫器管-胸腺、脾臟的影響。第二部分:裸小鼠體內(nèi)抑瘤實(shí)驗(yàn)結(jié)束后,留取骨髓、腸道及腎臟組織檢測(cè)化合物GA的毒性。骨髓涂片采用瑞氏-姬姆薩染色法觀察荷瘤裸小鼠骨髓增殖情況;腸道、腎臟組織制成病理切片,采用HE染色、鏡下觀察形態(tài)學(xué)變化,研究化合物GA的相關(guān)毒性。第三部分:1.以人非小細(xì)胞肺腺癌細(xì)胞株A549、SPCA1和XWLC-05為實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ?采用TUNEL染色、流式細(xì)胞術(shù)(FCM)檢測(cè)肺癌細(xì)胞經(jīng)過GA作用后的凋亡情況及形態(tài)學(xué)變化。Western Blot技術(shù)檢測(cè)化合物GA作用肺癌細(xì)胞后,凋亡線粒體途徑相關(guān)標(biāo)志性蛋白表達(dá)的變化、細(xì)胞色素C釋放及線粒體膜電位的變化。同樣通過Western Blot技術(shù)檢測(cè)死亡受體途徑、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)途徑誘導(dǎo)凋亡的標(biāo)志性蛋白變化。2.體內(nèi)A549裸小鼠移植瘤實(shí)驗(yàn)結(jié)束后,通過電鏡觀察化合物GA作用后,A549移植瘤組織細(xì)胞形態(tài)、細(xì)胞質(zhì)及細(xì)胞核的變化。應(yīng)用免疫組織化學(xué)法,觀察腫瘤組織Caspase3、Caspase8、Caspase9表達(dá)的變化,并采用TUNEL法檢測(cè)腫瘤組織細(xì)胞凋亡發(fā)生。第四部分:1.以人非小細(xì)胞肺腺癌細(xì)胞株A549、SPCA1和宣威肺癌細(xì)胞株XWLC-05為體外實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ?MTT法初步評(píng)估化合物GA聯(lián)合低濃度DDP對(duì)肺癌細(xì)胞是否具有增效/等效作用。以小鼠移植性肉瘤S180及人非小細(xì)胞肺腺癌A549和XWLC-05裸小鼠移植瘤為體內(nèi)實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ?以抑瘤率、腫瘤相對(duì)生長(zhǎng)率(T/C)及聯(lián)合指數(shù)為指標(biāo),評(píng)估化合物GA與低劑量DDP聯(lián)用的體內(nèi)抑瘤作用,同時(shí)通過骨髓、腸道、腎臟的相關(guān)病理學(xué)檢測(cè),初步評(píng)估對(duì)DDP毒性的影響。結(jié)果:1.化合物GA的體內(nèi)外抑瘤作用及毒性評(píng)估1.1化合物GA抑制A549、SPCA1和XWLC-05細(xì)胞增殖,其中對(duì)A549和SPC-A-1的抑制作用較強(qiáng),對(duì)XWLC-05細(xì)胞的抑制作用較弱。高濃度GA的作用強(qiáng)度與陽性對(duì)照DDP相近。1.2化合物GA對(duì)小鼠移植性肉瘤S180的生長(zhǎng)有抑制作用,中、高劑量抑瘤作用較為明顯。GA對(duì)人肺腺癌A549和XWLC-05裸小鼠移植瘤的生長(zhǎng)有抑制作用,以中、高劑量作用明顯。1.3化合物GA對(duì)荷S180小鼠重要免疫器官-胸腺/脾臟、荷人肺癌裸小鼠脾臟、荷瘤動(dòng)物體重未觀察到明顯影響,對(duì)荷瘤裸小鼠骨髓、腸道、腎臟組織無明顯損傷。而DDP導(dǎo)致小鼠和裸小鼠明顯的體重下降、免疫器官重量減輕,腎臟組織損傷明顯。2.化合物GA與化療藥順鉑(DDP)聯(lián)用的體內(nèi)外抑瘤作用及毒性評(píng)估2.1化合物GA聯(lián)合低濃度DDP對(duì)多種肺腺癌細(xì)胞增殖有明顯抑制作用,DDP較低濃度與GA聯(lián)用,可達(dá)到較高濃度DDP單用的抑制強(qiáng)度,二者在一定濃度范圍內(nèi)呈現(xiàn)協(xié)同作用。2.2體內(nèi)實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,化合物GA聯(lián)合低劑量DDP對(duì)小鼠S180、A549及XWLC-05裸鼠移植瘤的生長(zhǎng)有抑制作用,兩藥聯(lián)合在體內(nèi)表現(xiàn)為相加或協(xié)同作用。2.3化合物GA聯(lián)合低劑量DDP對(duì)荷瘤小鼠及裸小鼠的脾臟指數(shù)、胸腺指數(shù)、體重?zé)o額外影響,對(duì)骨髓、腸道、腎臟也未增加毒性。3.化合物GA體內(nèi)外誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡及相關(guān)機(jī)制3.1化合物GA體外誘導(dǎo)多種肺腺癌細(xì)胞凋亡,同時(shí)檢測(cè)到細(xì)胞中caspase9被剪切激活、線粒體胞色素C釋放、Bax/Bc12出現(xiàn)變化;caspase4被剪切激活,GRP78、GADD153和ATF4的mRNA及蛋白水平顯著升高;caspase8未被剪切激活。3.2體內(nèi)實(shí)驗(yàn)結(jié)果提示,化合物GA促進(jìn)腫瘤組織細(xì)胞凋亡、其Caspase3、8、9均呈明顯的陽性表達(dá)。結(jié)論:1.化合物GA體內(nèi)外實(shí)驗(yàn)均證實(shí)可抑制多個(gè)肺腺癌的增殖;2.化合物GA體內(nèi)對(duì)骨髓、腸道、腎臟組織均無明顯影響,呈現(xiàn)低毒的特點(diǎn)。3.化合物GA促進(jìn)肺腺癌細(xì)胞凋亡,其機(jī)制涉及線粒體和內(nèi)質(zhì)網(wǎng)途徑,可能未涉及死亡受體途徑。GA體內(nèi)誘導(dǎo)肺癌組織細(xì)胞凋亡。4.化合物GA與低劑量DDP聯(lián)合應(yīng)用,可提高抗腫瘤效果,未增加毒性,有可能以聯(lián)合肺腺癌一線化療藥的方式在臨床發(fā)揮增效減毒作用,為DDP毒性明顯的患者提供更多選擇。
【學(xué)位授予單位】：昆明醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號(hào)】：R734.2

【相似文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 崔虎山,李星云,李成福,韓京軍,池永涌;三磷酸腺苷氯化鎂對(duì)肺腺癌細(xì)胞的抗癌作用[J];延邊大學(xué)醫(yī)學(xué)學(xué)報(bào);2002年03期

2 楊晉平,王澤,張?zhí)K;肺腺癌5-羥色胺受體的免疫組織化學(xué)定位[J];四川解剖學(xué)雜志;2003年02期

3 吳一龍,林嘉穎,楊學(xué)寧,喬貴賓,王坤,陳剛;肺腺癌患者酪氨酸激酶信號(hào)傳導(dǎo)通路的異常與臨床預(yù)后[J];中華醫(yī)學(xué)雜志;2004年12期

4 張利群,陳杭薇,王四海,辛慶紅,杜玉國(guó),尤蘭華;人呼吸道合胞病毒轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)基因轉(zhuǎn)染肺腺癌細(xì)胞系的研究[J];山東醫(yī)藥;2005年12期

5 黎聯(lián);梅同華;周向東;張新高;車德亞;;細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶信號(hào)通路與基質(zhì)金屬蛋白酶-26在肺腺癌表達(dá)中的關(guān)系[J];第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào);2009年02期

6 王亞南;顧國(guó)浩;;生物芯片在肺腺癌研究和診療中的應(yīng)用進(jìn)展[J];國(guó)際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志;2011年02期

7 ;我國(guó)人體肺腺癌細(xì)胞系建立[J];腫瘤;1981年06期

8 季晨陽,張義R，

本文編號(hào)：1274345