本文關鍵詞：膽堿對北京鴨生長發(fā)育和脂肪代謝的影響及其調(diào)控機制，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：本論文通過5個試驗、分4個章節(jié)研究了膽堿對北京鴨生長發(fā)育和脂肪代謝的影響及其調(diào)控機制。 試驗一通過研究日糧膽堿水平對生長前期和生長后期北京鴨生長性能、胴體品質(zhì)和肝臟脂質(zhì)含量的影響,確定了北京鴨膽堿需要量。生長前期試驗研究了膽堿對1-21日齡北京鴨生長性能和胴體品質(zhì)的影響,試驗采用單因子完全隨機試驗設計,將384只1日齡健康雄性Z2型北京鴨隨機分成8組,每組6個重復,每個重復8只北京鴨。基礎日糧為玉米-玉米淀粉-大豆分離蛋白型日糧,添加膽堿后形成8個日糧膽堿水平：302、496、778、990、1182、1414、1625、1832mg/kg.結(jié)果表明,21日齡北京鴨日增重和日采食量隨膽堿水平的提高顯著升高(P0.05),在990mg/kg達到最大,二者分別從32.8g/d和46.9g/d提高到47.3g/d和69.4g/d,提高了44.2%和47.9%；北京鴨的腹脂率和胸肌率隨日糧膽堿水平的提高呈現(xiàn)逐漸上升的趨勢,差異極顯著(P0.05),腿肌率變化不大(P0.05)；以21日齡北京鴨日增重、日采食量和腹脂率為評定指標,采用直線折線模型獲得1-21日齡北京鴨膽堿需要量分別為810mg/kg(P=0.0116,R.=0.832).823mg/kg(P:0.019,R2=0.792)和1048mg/kg(P=0.0020,R.=0.916).生長后期試驗研究了膽堿對21～42日齡北京鴨生長性能、胴體品質(zhì)和肝臟脂質(zhì)含量的影響。采用單因子完全隨機試驗設計,選用體重相近的21日齡雄性Z2型北京鴨90只,隨機分成6個處理組,每個處理組5個重復,每個重復3只鴨�；A日糧為玉米淀粉-大豆分離蛋白型日糧,添加膽堿后形成6個日糧膽堿水平：0、342、779、1285、1662、1962mg/kg.結(jié)果表明,日糧添加膽堿顯著提高北京鴨日增重、日采食量和肝臟磷脂含量(P0.05),顯著降低肝臟總脂肪和甘油三酯(TG)含量(P0.05)。肝臟總脂質(zhì)和甘油三酯含量在膽堿缺乏組(0mg/kg)時最大,與1285mg/kg膽堿組相比,二者分別提高10.09%和15.79%。日糧添加膽堿顯著提高42日齡北京鴨的腹脂率以及降低腿肌率和肝體率(P0.05)。以日增重、日采食量、腹脂率、肝臟磷脂和總脂質(zhì)為評定指標,采用直線折線模型估算21-42日齡北京鴨的膽堿需要量分別為980mg/kg(P=0.0086,R2=0.958).950mg/kg(P=0.0052,R.=0.970).1010mg/kg(P=0.0084,R.=0.959).888mg/kg(P=0.0428,R.=0.792)和1130mg/kg(P=0.0456,RL2=0.872).綜上所述,與生長需要膽堿量相比,北京鴨需要更多的膽堿阻止肝臟過多的脂肪沉積,肝臟磷脂含量可作為評價肉鴨膽堿營養(yǎng)狀況新的敏感指標。 試驗二在試驗一的基礎上,選取4個膽堿組：302、496、778、990ng/kg,重點研究膽堿缺乏對北京鴨骨骼發(fā)育和血液相關代謝指標的影響。結(jié)果表明,膽堿缺乏北京鴨表現(xiàn)為精神萎靡、腿骨無力、脛跖骨關節(jié)腫大、弓形腿、滑腱癥,脛骨短粗,其中以弓形腿為明顯外觀特征,這種特征隨膽堿水平的提高而逐漸減弱,在990]mg/kg時基本消失；弓形腿北京鴨被解剖后,其腿部有明顯滑腱癥；膽堿缺乏顯著降低了北京鴨脛骨重、脛骨長、脛骨寬和骨干長(P0.05)；日糧膽堿水平對血漿高半胱氨酸(Hcy)、堿性磷酸酶(ALP)和抗酒石酸酸性磷酸酶(TrACP)水平有顯著影響(P0.05),而對血漿羥脯氨酸(HOP)、胱氨酸(Cys).Ca和P水平?jīng)]有影響。綜上所述,玉米-玉米淀粉-大豆分離蛋白型日糧可成功構建膽堿缺乏模型,北京鴨膽堿缺乏癥狀主要以弓形腿為主；膽堿缺乏后血漿Hcy水平升高,抑制了北京鴨生長發(fā)育,同時抑制了成骨細胞和破骨細胞的活動,骨周轉(zhuǎn)代謝減弱,進一步降低了脛骨重量和脛骨長度,加劇了脛骨發(fā)育不良。 試驗三在試驗一基礎上,研究日糧膽堿水平對21日齡北京鴨血漿和肝臟脂質(zhì)代謝的影響。結(jié)果表明,日糧中添加膽堿顯著提高了血漿TG、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-CHO),極低密度脂蛋白(VLDL)口游離脂肪酸(FFA)含量(P0.05),降低了血漿谷丙轉(zhuǎn)氨酶(GPT)活性(P0.05)；血漿TG濃度由0.62mmol/L (302mg/kg)升高到0.80mmol/L (1414mg/kg), VLDL濃度由0.63mmol/L (302mg/kg)升高到1.13mmol/L (1414mg/kg),分別提高29.0%和79.4%,而血漿GPT的活性從38.40U/L (302mg/kg)降低到27.75U/L (1414mg/kg),降低27.8%；21日齡北京鴨肝體率、總脂質(zhì)和甘油三酯濃度隨膽堿水平升高有顯著降低的趨勢(P0.05),而肝臟磷脂含量則相反,與302mg/kg組相比,在1182mg/kg時,肝臟總脂質(zhì)和TG含量分別降低22.6%和19.0%,肝臟磷脂含量提高35.1%；日糧中添加膽堿顯著提高了肝臟脂蛋白酯酶(LPL)、肝酯酶(HL)和總酯酶(TL)活性(P0.05)；肝臟組織學觀察發(fā)現(xiàn),1414mg/kg膽堿組肝臟細胞大小一致,細胞形態(tài)規(guī)則,肝細胞呈多邊形,細胞核清晰可見,而缺乏膽堿組(302mg/kg)肝臟脂肪空泡增多,肝細胞內(nèi)出現(xiàn)大小不等的油滴,肝細胞受損；以肝臟總脂質(zhì)、TG和總磷脂為評定指標,采用折線模型獲得北京鴨膽堿需要量分別為833mg/kg (P=0.0028, R2=0.905),1311mg/kg (P=0.0039,R2=0.891)和1230mg/kg (P=0.0015, R2=0.926);與試驗一以生長性能為評定指標估算的需要量相比,北京鴨需要更多的膽堿阻止肝臟過多脂肪沉積。為了確保滿足北京鴨所有代謝功能的膽堿營養(yǎng)需要,故推薦1-21日齡北京鴨膽堿需要量以1300mg/kg為宜。 試驗四應用轉(zhuǎn)錄組學技術研究了膽堿調(diào)控北京鴨脂肪代謝的分子機制和信號轉(zhuǎn)導途徑。試驗設膽堿缺乏組(302mg/kg)和膽堿添加組(1414mg/kg),分別從兩組中選取接近平均體重的試驗鴨各3只,提取肝臟總RNA進行轉(zhuǎn)錄組測序并分析。結(jié)果表明,北京鴨6個肝臟樣品rnRNA測序序列分別在5.4到6.7千萬之間,共獲得36.5千萬的高質(zhì)量干凈序列,其中原始序列的89.72%為高質(zhì)量序列,可為后續(xù)分析；經(jīng)過覆蓋度評價和RNA-seq數(shù)據(jù)驗證后發(fā)現(xiàn),90%的Clean reads比對到參考基因組外顯子上,且RNA-seq測序數(shù)據(jù)與qRT-PCR驗證結(jié)果趨勢一致；北京鴨膽堿缺乏和對照組肝臟表達譜比對后共篩選出363條差異表達基因(上調(diào)233,下調(diào)130),這些差異基因大部分與脂肪代謝、能量平衡、膽堿代謝、磷脂代謝、免疫應激以及氧化還原有關；通過GO功能富集分析和KEGG Pathway分析發(fā)現(xiàn),差異表達基因主要富集在細胞膜完整性、細胞質(zhì)、轉(zhuǎn)錄因子和細胞核上以及參與轉(zhuǎn)錄調(diào)控、信號轉(zhuǎn)導途徑、氧化還原、電子轉(zhuǎn)移、DNA連接、蛋白質(zhì)結(jié)合和ATP連接等生物學過程,日糧膽堿水平顯著影響了PPARa信號轉(zhuǎn)導通路、脂肪消化吸收通路和甘油脂質(zhì)代謝通路等。膽堿缺乏顯著影響了PPAR信號轉(zhuǎn)導途徑中的基因表達,其中PPARa、RXR、SCD、CYP7A1、DBI基因表達量下調(diào),而FABP基因、ACBP基因和HMGCS1基因表達量上調(diào),表明膽堿缺乏后降低了肝臟脂肪的分解和β-氧化相關基因的表達,加劇脂肪肝形成。 綜上所述,膽堿具有促進北京鴨生長發(fā)育和抗脂肪肝的作用,膽堿缺乏后北京鴨肝臟脂肪顯著升高,其作用機制可能是通過降低PPARa信號傳導通路中與脂肪分解和氧化相關基因的表達,加劇脂肪肝形成。與生長所需膽堿相比,北京鴨需要更多的膽堿阻止肝臟過多的脂肪沉積,肝臟磷脂含量可作為評價肉鴨膽堿營養(yǎng)狀況新的敏感指標。
【關鍵詞】：北京鴨 膽堿 脂肪代謝 調(diào)控機制 轉(zhuǎn)錄組
【學位授予單位】：中國農(nóng)業(yè)大學
【學位級別】：博士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：S834
【目錄】：

• 摘要6-9
• ABSTRACT9-12
• 目錄12-14
• 縮略詞14-15
• 插圖與附表清單15-17
• 第一章 文獻綜述17-36
• 1 研究的目的意義17
• 2 國內(nèi)外研究現(xiàn)狀17-34
• 3 研究內(nèi)容和技術路線34-36
• 第二章 試驗研究36-98
• 試驗一 北京鴨膽堿需要量的研究36-53
• 摘要36-37
• 前言37
• (一) 膽堿對生長前期北京鴨生長性能和胴體品質(zhì)的影響37-45
• 1 材料與方法37-39
• 2 結(jié)果與分析39-42
• 3 討論42-44
• 4 小結(jié)44-45
• (二) 膽堿對生長后期北京鴨生長性能、胴體品質(zhì)和肝臟脂質(zhì)含量的影響45-53
• 1 材料與方法45-47
• 2 結(jié)果與分析47-50
• 3 討論50-52
• 4 小結(jié)52-53
• 試驗二 膽堿缺乏對北京鴨生長發(fā)育和相關代謝指標的影響53-63
• 摘要53
• 前言53
• 1 材料與方法53-56
• 2 結(jié)果與分析56-60
• 3 討論60-62
• 4 小結(jié)62-63
• 試驗三 日糧膽堿水平對北京鴨肝臟和血漿脂質(zhì)代謝的影響63-74
• 摘要63
• 前言63-64
• 1 材料與方法64-65
• 2 結(jié)果與分析65-71
• 3 討論71-73
• 4 小結(jié)73-74
• 試驗四 膽堿調(diào)控北京鴨脂肪代謝的轉(zhuǎn)錄組學研究74-98
• 摘要74
• 前言74-75
• 1 材料與方法75-78
• 2 測序數(shù)據(jù)結(jié)果分析78-93
• 3 討論93-97
• 4 小結(jié)97-98
• 第三章 結(jié)論與建議98-99
• 1 主要結(jié)論98
• 2 創(chuàng)新點98
• 3 有待于進一步研究和解決的問題98-99
• 參考文獻99-111
• 附錄111-131
• 致謝131-132
• 作者簡歷132-134

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前7條

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  本文關鍵詞：膽堿對北京鴨生長發(fā)育和脂肪代謝的影響及其調(diào)控機制，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：400838