背景Myostatin(MSTN)是肌肉生長抑制素,又稱為GDF-8,它屬于轉(zhuǎn)化生長因子β(transforming growth factor-β,TGF-β)超家族的分泌生長因子。MSTN是一個結(jié)構(gòu)高度保守,能通過控制肌肉前體細(xì)胞的增殖調(diào)控肌肉發(fā)育和生長的負(fù)調(diào)控因子。哺乳動物的MSTN基因突變后會導(dǎo)致肌肉肥大,出現(xiàn)雙肌型。目前關(guān)于MSTN調(diào)控肌肉發(fā)育的分子機(jī)制的相關(guān)研究大多數(shù)集中在傳統(tǒng)的方法上,利用轉(zhuǎn)錄組學(xué)和蛋白質(zhì)組學(xué)聯(lián)合分析MSTN基因敲除對肌肉發(fā)育調(diào)控的分子機(jī)制還未報(bào)道。羊作為農(nóng)業(yè)生產(chǎn)領(lǐng)域的重要經(jīng)濟(jì)動物,其產(chǎn)量和質(zhì)量的改良從未停止�；蚓庉嫾夹g(shù),轉(zhuǎn)錄組學(xué)和蛋白質(zhì)組學(xué)等技術(shù)迅速發(fā)展,有利于我們從MSTN基因敲除的哺乳類細(xì)胞及動物體內(nèi)篩選出大量與肌肉發(fā)育相關(guān)的蛋白及信號通路。目的本研究利用CRISPR/Cas9技術(shù)制備MSTN基因敲除C2C12單克隆細(xì)胞和實(shí)驗(yàn)室保存的MSTN基因編輯陜北白絨山羊肌肉組織樣本,通過多組學(xué)分析篩選出與肌肉發(fā)育相關(guān)的潛在調(diào)控因子和信號通路;通過在C2C12細(xì)胞中上調(diào)或者下調(diào)這些調(diào)控因子,對它們進(jìn)行功能研究,明確這些調(diào)控因子對肌肉發(fā)育的相關(guān)機(jī)制。最終,根據(jù)...

【文章頁數(shù)】：158 頁

【學(xué)位級別】：博士

【部分圖文】：

圖1-1MSTN的結(jié)構(gòu)和蛋白酶解過程

比其他成員的較短。MSTN作為前體蛋白被合成，前體蛋白經(jīng)過兩次蛋白水解作用形成有活性的成熟蛋白。第一次是前體蛋白在二元位點(diǎn)經(jīng)過蛋白水解過程產(chǎn)生一個N末端前肽和一個以二硫鍵鏈接的C末端二聚物（圖1-1）。第二次經(jīng)過金屬蛋白酶水解作用激活MSTN。蛋白骨形態(tài)發(fā)生蛋白(B....

圖1-2MSTN在骨骼肌的信號通路

圖1-2MSTN在骨骼肌的信號通路。MSTN激活Smad復(fù)合體通過MAPKs和PI3K/AKT信號通路增加蛋白的降解和減少蛋白的合成Figure1-2.MSTNsignallinginskeletalmuscle.MSTNincreasesp....

圖1-3MSTN在肌肉衰減和胰島素耐受中的功能總覽

在MSTN啟動子區(qū)域啟動轉(zhuǎn)錄。類似地，棕櫚酸鹽介導(dǎo)的SREBP1c調(diào)控MSTN錄通過固醇調(diào)節(jié)因子結(jié)合到MSTN啟動區(qū)域促進(jìn)胰島素耐受（圖1-3）。鏈唑霉素I型糖尿病小鼠骨骼肌細(xì)胞Foxa2轉(zhuǎn)錄因子的產(chǎn)生，提升MSTN的表達(dá)，抑制了素信號通路的表達(dá)(Sr....

圖1-4雙肌型比利時(shí)藍(lán)牛Figure1-4AfullbloodBelgianBluebullshowingthedoublemusclingphenotype(McPherronandLee1997)

TN的N-末端功能區(qū)，也認(rèn)為是潛在的關(guān)聯(lián)肽段（LAP），而不是具TN的C末端區(qū)域(Jiang,etal.2004)。有大量證據(jù)證明在嚙齒動物模型中MSTN與癌癥的發(fā)生程度相關(guān)，癥的發(fā)生期間，應(yīng)用大量的樣品和不同層次上完全具有MSTN功能且，一些分子和生物化....

本文編號：3892638