RNA沉默是植物自身免受病毒侵染的一種有效和通用的機制,而植物病毒為逃避該機制進化出了不同的反防御策略,其中最為有效的是編碼RNA沉默抑制子(Viral suppressor of RNA silencing,VSR)。馬鈴薯卷葉病毒屬病毒(poleroviruses)在世界范圍內發(fā)生分布,侵染很多具有經濟重要性的作物,引起嚴重病害。該屬病毒編碼的P0蛋白是VSR,不同成員的P0在序列和抑制子功能上存在差異。PO具有保守的類F-box基序(F-box-like motif),并且F-box-like motif是P0抑制子活性及P0與SKP1互作必不可少的因素,而最新研究表明馬鈴薯卷葉病毒內蒙分離物編碼的沉默抑制子P0蛋白具有保守的F-box-like motif,卻不能與SKP1互作。目前P0與SKP1的互作在沉默抑制中的作用仍存在爭議。同時,目前關于P0蛋白與寄主蛋白互作的報道極少。因此,本論文在已有基礎上,主要圍繞蕓薹黃化病毒基因型A(Brassica yellows virus genotype A,BrYV-A)P0蛋白,進一步研究了P0BrA發(fā)揮功能的關鍵氨基酸區(qū)域及位點,...

【文章頁數】：124 頁

【學位級別】：博士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
縮略詞
第一章 文獻綜述
    1.1 RNA沉默
    1.2 馬鈴薯卷葉病毒屬P0蛋白研究進展
    1.3 葉綠體在植物免疫中的作用
    1.4 葉綠體與植物病毒的互作
    1.5 二磷酸核酮糖羧化酶組裝因子2(RAF2)蛋白研究概況
    1.6 本論文研究意義與目的
第二章 材料與方法
    2.1 實驗材料
    2.2 溶液和培養(yǎng)基的配制
    2.3 具體實驗所用試劑及配制
    2.4 實驗方法
第三章 BrYV P0與NbSKP1互作機制研究
    3.1 P0^BrA蛋白部分關鍵氨棊酸定位
    3.2 P0^BrA突變體與NbSKP1互作驗證
    3.3 P0^BrA和NbSKP1互作不是P0^BrA抑制活性所必需的
    3.4 P0^BrA介導AGO1的降解不依賴于P0-NbSKP1的互作
    3.5 P0^BrA突變體LP可通過26S蛋白酶體途徑降解
    3.6 突變體LPKs活性分析
    3.7 本章小結與討論
第四章 BrYV-A P0蛋白與NbRAF2互作機制研究
    4.1 本生煙NbRAF2的克隆及功能分析
    4.2 P0^BrA蛋白與本生煙NbRAF2蛋白互作
    4.3 P0^BrA表達時NbRAF2的亞細胞定位
    4.4 P0^BrA抑制NbRAF2在細胞核中積累需要NbRAF2葉綠體和細胞核雙重定位
    4.5 P0^BrA抑制NbRAF2在細胞核中積累不依賴于P0^BrA VSR、致壞死和與SKP1互作功能
    4.6 BrYV-A侵染抑制NbRAF2在細胞核中積累
    4.7 沉默NbRAF2促進BrYV-A侵染
    4.8 超表達細胞核中的RAF2蛋白增強對BrYV-A的抗性
    4.9 小結與討論
第五章 結論與展望
    5.1 結論
    5.2 展望
參考文獻
附錄Ⅰ P0^BrA突變體功能匯總
附錄Ⅱ 引物列表
個人簡歷



本文編號：3845043