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酸性磷酸酶參與微生物共生影響大豆磷利用的生理分子機(jī)制研究

發(fā)布時(shí)間:2021-12-19 04:50
  酸性紅壤是我國(guó)華南地區(qū)典型的農(nóng)業(yè)土壤類(lèi)型,其固磷能力強(qiáng),導(dǎo)致土壤中累積態(tài)磷含量高,但作物難以吸收利用,因此,亟待提高作物磷效率,促進(jìn)土壤累積態(tài)磷的利用。與有益微生物共生,以及促進(jìn)酸性磷酸酶的分泌均能提高作物磷效率,提高土壤中累積態(tài)磷的利用潛力。根瘤菌和叢枝菌根真菌(Arbuscular mycorrhizal fungi,AMF)是重要的有益共生菌。紫色酸性磷酸酶(Purple acid phosphatase,PAP)是一類(lèi)對(duì)提高磷效率有突出貢獻(xiàn)的酸性磷酸酶。在酸性紅壤上,接種根瘤菌對(duì)土著AMF,以及磷吸收和產(chǎn)量的影響報(bào)道還較少;在分子水平上,根瘤和菌根誘導(dǎo)增強(qiáng)表達(dá)的PAP可能的功能還鮮有報(bào)道。本研究在前人研究的基礎(chǔ)上,以?xún)蓚(gè)磷效率不同的大豆品種和玉米為材料,在酸性紅壤上進(jìn)行不同磷處理和根瘤菌接種的單/間作田間試驗(yàn),研究根瘤菌接種對(duì)大豆/玉米AMF侵染,以及磷活化吸收和產(chǎn)量的影響;同時(shí),利用轉(zhuǎn)基因植株對(duì)根瘤誘導(dǎo)表達(dá)的大豆紫色酸性磷酸酶基因GmPAP21的功能進(jìn)行分析,解析其參與根瘤中磷代謝的可能機(jī)理;此外,借助菌根侵染結(jié)構(gòu)和GUS染色的雙定位分析系統(tǒng),以及蛋白異源表達(dá)系統(tǒng),研究菌根誘... 

【文章來(lái)源】:華南農(nóng)業(yè)大學(xué)廣東省

【文章頁(yè)數(shù)】:141 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:博士

【部分圖文】:

酸性磷酸酶參與微生物共生影響大豆磷利用的生理分子機(jī)制研究


施肥示意圖

示意圖,試驗(yàn)設(shè)計(jì),根瘤菌,示意圖


0.25 g、KH2PO40.25 g、瓊脂 15 g(配制固體培養(yǎng)基時(shí)加入)、蒸餾水補(bǔ),高溫高壓滅菌。劃板活化根瘤菌菌株后挑取單克隆接種于根瘤菌 YM中,28℃恒溫?fù)u床培養(yǎng) 4 天,待 OD600為 1.0 時(shí),將三種液體根瘤菌于質(zhì)混合,200g 基質(zhì)加入 BDYD1、BXBL9、BXYD3 各 100mL 和 2mL量元素母液(根系中心實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)),混合均勻后存放于 4℃保存,待田間含根瘤菌的基質(zhì)加入少量去離子水拌種、播種后的作為接種根瘤菌處理為不接種根瘤菌處理(圖 2.2)。

示意圖,大豆,玉米,示意圖


作種植密度包含大豆和玉米,玉米種植密度為 40 cm 40 cm,每畦中間種植 2 行豆種植密度為 15 cm 20 cm,每畦 2 行分別種植在玉米的兩邊。本試驗(yàn)設(shè) 4 次重復(fù),隨機(jī)區(qū)組設(shè)計(jì),畦寬 1.2m,溝寬 0.3m。博羅試驗(yàn)點(diǎn)畦長(zhǎng),寧西試驗(yàn)點(diǎn)畦長(zhǎng) 5m。所有小區(qū)均起壟栽培,畦高 0.3m 黑色箭頭指示為播種溝位置(圖 2.3)。采取開(kāi)溝點(diǎn)播方式播種,每穴播種 2 粒種子,出苗一周后間苗, 1 株。在作物生長(zhǎng)過(guò)程中,灌溉、培土、除雜草及病蟲(chóng)害防治等常規(guī)管理統(tǒng)一進(jìn)行


本文編號(hào):3543794

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