華山松大小蠹（Dendroctonus armandi）是我國(guó)秦嶺巴山林區(qū)中最具破壞性的森林害蟲(chóng)之一。華山松大小蠹主要危害30年以上的華山松（Pinus armandi）健康木,給華山松天然次生林和人工林帶來(lái)毀滅性的災(zāi)害。小蠹蟲(chóng)利用自身和共生真菌的酶代謝和生理生化作用克服寄主樹(shù)木的原生性和誘導(dǎo)性抗性,從而完成在寄主樹(shù)木樹(shù)干組織內(nèi)的生存和生活史,其中解毒酶基因不僅能降解寄主樹(shù)木次生性萜類物質(zhì)的毒素,還參與小蠹蟲(chóng)體內(nèi)信息素和激素的合成。本研究以華山松大小蠹為研究對(duì)象,通過(guò)對(duì)華山松大小蠹谷胱甘肽S-轉(zhuǎn)移酶（GSTs）和羧酸酯酶（Car Es）基因的系統(tǒng)發(fā)育,華山松大小蠹GSTs和Car Es基因在不同發(fā)育時(shí)期的表達(dá),GSTs基因在不同組織部位的表達(dá)差異,華山松大小蠹GSTs和Car Es基因?qū)θA山松揮發(fā)性物質(zhì)的表達(dá)響應(yīng),以及華山松大小蠹不同世代間體重、能量物質(zhì)儲(chǔ)存和解毒酶活性的差異等研究,旨在揭示華山松大小蠹主要解毒酶基因表達(dá)與克服寄主華山松抗性的機(jī)制。研究結(jié)果如下:1.華山松大小蠹第一代成蟲(chóng)中雄蟲(chóng)的比例為45.79%,而第二代為39.70%。不同性別和不同世代的華山松大小蠹體重、能量物質(zhì)儲(chǔ)... 

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圖2-1兩代華山松大小蠹雌雄成蟲(chóng)的體重分布

第二章華山松大小蠹三大解毒酶活性差異與生長(zhǎng)發(fā)育的關(guān)系25圖2-2不同世代華山松大小蠹的能量物質(zhì)儲(chǔ)備和解毒酶活性A糖原，B甘油三酯，C游離脂肪酸，D細(xì)胞色素b5，E還原型谷胱甘肽，F(xiàn)羧酸酯酶在不同世代、性別及世代和性別交互作用的雙因素方差分析。Earlyseason：第一代成蟲(chóng)，Lateseason：第二代成蟲(chóng)。每個(gè)生理指標(biāo)測(cè)定均進(jìn)行5個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)用蟲(chóng)5頭（N=5×5）。（ns無(wú)顯著性,*P<0.05,**P<0.01,***P<0.001）。Fig.2-2TheenergystoreanddetoxicationenzymesactivityintwogenerationofD.armandiContentofglycogen(A),triglyceride(B),freefattyacid(C),cytochromeb5(D),reducedglutathione(E)andcarboxylesterase(F)activityintwodifferentgenerationadultsofD.armandi.Earlyseason:Firstgenerationadult;Lateseason:Secondgenerationadult.Valuesarepresentedasthemean±SE.Measurementsforeachindexwereobtainedfromfivebiologicalreplicates(fivebeetlesforonereplicate)(N=5×5).Thesignificantdifferencebetweensexes,seasonsandS*SinteractionwithTwo-wayANOVA(ns:nosignificant,*P<0.05,**P<0.01,***P<0.001).

第二章華山松大小蠹三大解毒酶活性差異與生長(zhǎng)發(fā)育的關(guān)系27相對(duì)表達(dá)量圖2-3不同世代華山松大小蠹雄蟲(chóng)19個(gè)細(xì)胞色素P450和細(xì)胞色素b5基因的表達(dá)水平Earlyseason：第一代成蟲(chóng)，Lateseason：第二代成蟲(chóng)�；蛳鄬�(duì)表達(dá)量以2-ΔΔCt取log2后進(jìn)行作圖。每個(gè)基因表達(dá)量測(cè)定均進(jìn)行3個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)用蟲(chóng)3頭（N=3×3）。*表達(dá)基因相對(duì)表達(dá)量之間的差異，*P<0.05，**P<0.01，***P<0.001。Earlyseason：第一代成蟲(chóng)，Lateseason：第二代成蟲(chóng)。Fig.2-3Quantitativereal-timePCRanalysisoftranscriptlevelsof19cytochromeP450genesandDarmCyt-b5inmalesrelatedtofemalesfromtwoseasonadultsofD.armandiEarlyseason:Firstgenerationadult;Lateseason:Secondgenerationadult.2-ΔΔCtvalueswerelog2transformedforplottingasmean±SE.Eachgenetranscriptlevelwasobtainedfromthreebiologicalreplicates(threebeetlesforonereplicate)(N=3×3).*indicatethesignificantdifferencebetweensexesofthesameseasonwithOne-wayANOVA(*P<0.05,**P<0.01,***P<0.001).2.3小結(jié)通過(guò)統(tǒng)計(jì)兩代華山松大小蠹成蟲(chóng)的性別比例，并對(duì)兩代雌雄成蟲(chóng)的體重、能量物質(zhì)儲(chǔ)存和解毒酶含量的測(cè)定，結(jié)果表明第一代和第二代成蟲(chóng)都存在明顯的雌性偏好的差異，兩代華山松大小蠹成蟲(chóng)性別比例失衡均達(dá)到顯著水平，并且第二代成蟲(chóng)中的性別比例失衡更加顯著。不同性別和不同世代之間的華山松大小蠹的體重、能量物質(zhì)儲(chǔ)存和解毒酶活性均存在顯著性差異。與雄蟲(chóng)相比，雌蟲(chóng)具有更大的體重和更多的脂肪儲(chǔ)存，這是雌蟲(chóng)為克服寄主抗性，并滿足產(chǎn)卵所表現(xiàn)的適應(yīng)性。不不同解毒酶基因

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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[7]棉鈴蟲(chóng)和煙青蟲(chóng)性信息素腺體脂肪醇和乙酸酯轉(zhuǎn)化的比較研究[J]. 王鴻雷,趙成華,閆云花,王琛柱.  昆蟲(chóng)學(xué)報(bào). 2008(09)
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[10]酵母生產(chǎn)谷胱甘肽的培養(yǎng)條件研究[J]. 賈建萍,周彥鋼.  微生物學(xué)雜志. 2007(04)

博士論文
[1]華山松大小蠹和共生真菌P450基因差異性表達(dá)與解毒功能研究[D]. 代魯魯.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2016



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