豬鏈球菌（Streptococcus suis）是一種重要的人畜共患病原,能引起人腦膜炎、中毒性休克綜合征等臨床癥狀,威脅公共衛(wèi)生安全;也能引起豬腦膜炎、關節(jié)炎等疾病,對養(yǎng)豬業(yè)造成較大的經濟損失。S.suis逃避宿主免疫防御機制是其致病的關鍵環(huán)節(jié)之一。為研究豬鏈球菌的小鼠感染模型,本實驗室此前將一株9型S.suis DN13在小鼠體內連續(xù)傳代,獲得了對小鼠毒力極大增強的菌株。在本研究中以傳代獲得的強毒菌株在小鼠中研究S.suis的致病機理。從DN13傳代后細菌第10代、20代和30代中各隨機挑選一個單菌落（分別命名為SS9-P10、SS9-P20和SS9-P30）,并測定了對ICR小鼠中LD50數(shù)值。結果發(fā)現(xiàn)這3個傳代菌株毒力比較接近,LD50均在104CFU數(shù)量級,而親本株DN13 107CFU攻毒對小鼠不致死。為了闡明傳代菌株毒力增強的分子機理:（1）我們對3個不同代次的傳代菌株SS9-P10、SS9-P20、SS9-P30和親本菌株DN13進行了生物學表型比較研究,結果顯示3個傳代菌株比親本菌株DN13抗氧化和高溫應激能力、生物被膜形成能力均顯著增高（P<0.05）,但3個... 

【文章來源】：湖南農業(yè)大學湖南省

【文章頁數(shù)】：104 頁

【學位級別】：博士

【部分圖文】：

DN13及其傳代菌株SS9-10、SS9-20和SS9-30生長曲線

第二章9型豬鏈球菌DN13與傳代菌株的生物學表型比較研究17首先比較了不同濃度的H2O2處理20min后親本菌株的存活率。結果0.01MH2O2處理20min后DN13存活率幾乎不受影響，而1MH2O2處理20min后幾乎沒有存活，而在0.1MH2O2處理有將近10%的存活率，故我們選擇0.1MH2O2處理20min作為氧化應激處理。相比DN13在0.1MH2O2處理20min后10%以下的存活率，傳代菌株SS9-10、SS9-20和SS9-30同樣處理條件下存活率超過24%，顯著高于DN13（P<0.05），但三個傳代菌株之間對H2O2耐受性差異不顯著（圖2-2）。圖2-2.DN13及其傳代菌株對H2O2的耐受性Figure2-2.SurvivalpercentageofDN13anditspassagesinresponsetoH2O2S.suis感染宿主過程中會誘導宿主產生炎癥，機體體溫升高是炎癥表現(xiàn)之一。豬可以感染多種哺乳動物，包括人�？紤]到人的體溫一般不會超過42℃，故以42℃作為高溫應激條件。結果在42℃培養(yǎng)下，約63%的DN13可以存活，而三個傳代菌株在42℃條件下生長幾乎不受影響（圖2-3），顯著高于DN13（P<0.05）。圖2-3.DN13及其傳代菌株在42℃的存活率Figure2-3.SurvivalpercentagesofDN13anditspassagesat42C2.4傳代菌株對小鼠全血的敏感性與DN13無顯著差異哺乳動物血液中，正常情況下是無菌的。血液中含大量具有殺菌活性的物質，如溶菌酶、抗菌肽等。細菌在致病過程中，如果要建立全身性或系統(tǒng)性感染，往往需要通過血液循環(huán)系統(tǒng)或淋巴系統(tǒng)，使病原擴散至全身[116]。因此，耐受血液中殺菌物質是細菌建立全身性感染的必要條件。為了研究DN13的傳代菌株毒力增強與對血液中殺菌物質耐受性增強有關，我們比較了DN13和它傳代菌株對小鼠全血殺菌物質的耐受性試驗。結果顯示，

第二章9型豬鏈球菌DN13與傳代菌株的生物學表型比較研究17首先比較了不同濃度的H2O2處理20min后親本菌株的存活率。結果0.01MH2O2處理20min后DN13存活率幾乎不受影響，而1MH2O2處理20min后幾乎沒有存活，而在0.1MH2O2處理有將近10%的存活率，故我們選擇0.1MH2O2處理20min作為氧化應激處理。相比DN13在0.1MH2O2處理20min后10%以下的存活率，傳代菌株SS9-10、SS9-20和SS9-30同樣處理條件下存活率超過24%，顯著高于DN13（P<0.05），但三個傳代菌株之間對H2O2耐受性差異不顯著（圖2-2）。圖2-2.DN13及其傳代菌株對H2O2的耐受性Figure2-2.SurvivalpercentageofDN13anditspassagesinresponsetoH2O2S.suis感染宿主過程中會誘導宿主產生炎癥，機體體溫升高是炎癥表現(xiàn)之一。豬可以感染多種哺乳動物，包括人�？紤]到人的體溫一般不會超過42℃，故以42℃作為高溫應激條件。結果在42℃培養(yǎng)下，約63%的DN13可以存活，而三個傳代菌株在42℃條件下生長幾乎不受影響（圖2-3），顯著高于DN13（P<0.05）。圖2-3.DN13及其傳代菌株在42℃的存活率Figure2-3.SurvivalpercentagesofDN13anditspassagesat42C2.4傳代菌株對小鼠全血的敏感性與DN13無顯著差異哺乳動物血液中，正常情況下是無菌的。血液中含大量具有殺菌活性的物質，如溶菌酶、抗菌肽等。細菌在致病過程中，如果要建立全身性或系統(tǒng)性感染，往往需要通過血液循環(huán)系統(tǒng)或淋巴系統(tǒng)，使病原擴散至全身[116]。因此，耐受血液中殺菌物質是細菌建立全身性感染的必要條件。為了研究DN13的傳代菌株毒力增強與對血液中殺菌物質耐受性增強有關，我們比較了DN13和它傳代菌株對小鼠全血殺菌物質的耐受性試驗。結果顯示，

【參考文獻】：
期刊論文
[1]豬鏈球菌2型體外刺激3D4/21豬肺泡巨噬細胞的炎癥相關細胞因子mRNA轉錄分析[J]. 汪偉,何孔旺,倪艷秀,呂立新,周俊明,張雪寒,俞正玉,茅愛華,溫立斌,王小敏,李彬,郭容利.  江蘇農業(yè)學報. 2013(03)

博士論文
[1]MsmK調控豬鏈球菌生長和致病性的研究[D]. 譚美芳.華中農業(yè)大學 2016
[2]致仔豬腦膜炎新型豬鏈球菌的鑒定[D]. 潘子豪.南京農業(yè)大學 2014
[3]豬鏈球菌生物被膜形成及致病機理研究[D]. 汪洋.南京農業(yè)大學 2011
[4]深度測序揭示多重耐藥豬鏈球菌R61的耐藥機制及線粒體呼吸鏈蛋白的共進化研究[D]. 楊明.中國科學院北京基因組研究所 2011

碩士論文
[1]9型豬鏈球菌在小鼠體內的傳代適應及比較基因組學研究[D]. 魏榕.湖南農業(yè)大學 2016



本文編號：3428526