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兩個(gè)水稻油菜素內(nèi)酯相關(guān)基因的圖位克隆及功能分析

發(fā)布時(shí)間:2021-08-10 21:23
  水稻株型與粒型對提高產(chǎn)量至關(guān)重要,一直為育種家所關(guān)注。甾醇類激素油菜素內(nèi)酯(Brassinosteroid,BR)在調(diào)控水稻株型與粒型方面起著重要作用。研究表明,BR參與植物多個(gè)生長和發(fā)育過程的調(diào)控,如促進(jìn)細(xì)胞的分裂與伸長、參與維管組織的發(fā)育、參與對光的響應(yīng)、提高抗逆抗病反應(yīng)等。目前BR相關(guān)突變體與轉(zhuǎn)基因植株的研究表明,BR在提高水稻產(chǎn)量方面具有巨大的應(yīng)用潛力。盡管人們已經(jīng)鑒定和研究了很多BR合成與信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑調(diào)控因子,但是對BR的合成與信號通路調(diào)控機(jī)制的了解還是有限的。為此,在水稻中,對BR合成與信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑及其調(diào)控機(jī)制開展相關(guān)研究是十分必要的。本學(xué)位論文主要圍繞兩個(gè)BR相關(guān)突變體開展研究,第一部分為水稻BR不敏感基因DS1的圖位克隆和功能分析,第二部分為水稻BR合成基因LHDD10的圖位克隆和功能分析。第一部分:在本研究中,我們從南粳35輻射誘變突變庫中分離和鑒定了一個(gè)表現(xiàn)出株高矮化、籽粒變小和葉片直立表型的突變體dwarf and small grain 1(ds1)。通過基因定位及功能分析,闡明了ds1表型的遺傳機(jī)理與內(nèi)在的分子調(diào)控機(jī)制。從細(xì)胞學(xué)水平和生理生化等方面對ds1進(jìn)行... 

【文章來源】:南京農(nóng)業(yè)大學(xué)江蘇省 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】:122 頁

【學(xué)位級別】:博士

【部分圖文】:

兩個(gè)水稻油菜素內(nèi)酯相關(guān)基因的圖位克隆及功能分析


圖1-2油菜素內(nèi)酯類化合物的結(jié)構(gòu)(FujiokaandYokota,?2003;任鴻雁等,2015)??Fig.?1-2?Structures?of?the?brassinosteroids?(BRs)??1.2?BR合成途徑研究進(jìn)展??

氨基酸序列,突變體,表型,夾角


?兩個(gè)水稻油菜素內(nèi)酯相關(guān)基因的圖位克隆及功能分析???AjHHHB8B??翻??圖1-4葉夾角測試與突變體Wa2-2的表型(Parketal.,2006)??Fig.?1-4?Lamina?bending?assay?and?phenotypes?of?bla2-2?mutant??1.2.6.2?AtCYP72Cl/SOB7/CHI2/SHKl?介導(dǎo)的油菜素內(nèi)酯代謝??研宄者通過反向遺傳學(xué)的手段,篩選到三個(gè)J/CTP72C7激活標(biāo)簽顯性突變體??(chibi2)^?shkl-D?(shrwkl-D)^Wsob7?{suppressor?of?phyb-47-D)?(Nakamura?et?al.,?2005;??Takahashi?et?al.,?2005;?Turk?et?al.,2005)。三個(gè)等位突變體c/?/2、和7者P表現(xiàn)出??BR缺陷的表型。分子鑒定發(fā)現(xiàn),在c/?/2、廠Z)和仍67中,CaMV35S啟動(dòng)子的激活元??件插入到J/CTP72C7的啟動(dòng)子上,導(dǎo)gU/CTP72C:/表達(dá)上調(diào),加快三個(gè)突變體BR分解??速率,植株內(nèi)源BR含量減少,從而出現(xiàn)BR缺陷表型。通過氨基酸序列比對分析,研??宄者發(fā)現(xiàn)AtCYP72Cl與AtCYP734Al氨基酸序列具有36%的一致性。因此,研宄者推??測AtCYP72Cl可能具有類似的C-26羥基化酶活性。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn),相比野生型,BL、??栗甾酮以及C-6氧化途徑中的BR中間產(chǎn)物含量在三突變體中顯著降低(Nakamura?et?al.,??2005;?Takahashi?et?al.,2005;?Turk?et?aL,?2005)。綜合以上研宄結(jié)果表明AtCYP72C

內(nèi)酯,突變體,表型,水稻


者通過反向遺傳學(xué)的手段克隆了一個(gè)編碼LRR激酶結(jié)構(gòu)域??蛋白的粒型基因見46>,它與有33%同源性(Jiang?et?al.,?2012)。突變體xko表??現(xiàn)出矮化和葉直立的表型,細(xì)胞學(xué)觀察顯示;c/w細(xì)胞分裂速率降低,導(dǎo)致細(xì)胞數(shù)(1減??少,從而導(dǎo)致各組織器官變校xko突變體顯示了組織特異性的BR增強(qiáng)響應(yīng),整株??水平上均顯示出BR含量的降低(Jiang?et?al.,?2012)。BR生物合成基因的過表達(dá)水稻種??子充實(shí)度和大小增加(Wuetal.,2008)。??GUM??圖1-7油菜素內(nèi)酯相關(guān)突變體的水稻粒型表型??Fig.?1-7?Rice?grain?shape?phenotypes?of?BR-related?mutants??(Feng?et?al.,?2017;?Jiang?et?al.,?2012;?Tong?et?al.,?2005;?Wu?et?al.,?2016;?Hong?et?al.,?2003?)??1.4.5?BRs與植物的抗逆性??BR不僅調(diào)控植物細(xì)胞的分裂與伸長,種子發(fā)育,暗形態(tài)建成等生長發(fā)育過程,且??還參與植物的抗逆反應(yīng)(Wilen?et?al.,1995;?Nakashita?et?al.,2003;?Wang?et?a丨.,2005;??Deng?et?aL,?2009;?Xia?et?al.,2009)。眾所周知,油菜素內(nèi)酯誘導(dǎo)可以增強(qiáng)煙草對TMV??21??

【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]LAZY1通過油菜素內(nèi)酯途徑調(diào)控水稻葉夾角的發(fā)育[J]. 張曉瓊,王曉雯,田維江,張孝波,孫瑩,李楊羊,謝佳,何光華,桑賢春.  作物學(xué)報(bào). 2017(12)
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[5]水稻株高的遺傳與育種研究進(jìn)展[J]. 馬玉銀,王如平,李磊,左示敏,殷躍軍,陳宗祥.  河南農(nóng)業(yè)科學(xué). 2008(11)
[6]油菜素內(nèi)酯信號轉(zhuǎn)導(dǎo)的研究進(jìn)展[J]. 王鳳茹,王志勇.  華北農(nóng)學(xué)報(bào). 2008(S2)
[7]TraitMill:禾谷類作物高產(chǎn)基因發(fā)掘的引擎(英文)[J]. Christophe Reuzeau,Jan Pen,Valérie Frankard,Joris de Wolf,Rindert Peerbolte,Willem Broekaert,Wim van Camp.  分子植物育種. 2005(05)



本文編號:3334803

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