異源表達(dá)merA/merB基因?qū)Ψ压康挠绊懠霸谄渌参镏械尿?yàn)證
發(fā)布時(shí)間:2021-06-28 19:50
番茄是世界范圍內(nèi)廣泛種植的主要蔬菜作物之一,也是研究茄科果實(shí)發(fā)育的模式植物。汞是一種有毒的重金屬元素,農(nóng)田和農(nóng)產(chǎn)品的汞污染會(huì)對(duì)人體健康造成潛在威脅。為了探討降低番茄中汞含量的技術(shù),本實(shí)驗(yàn)將汞離子還原酶(merA)和有機(jī)汞裂解酶(merB)基因在番茄中表達(dá),利用其將有機(jī)汞和無機(jī)汞轉(zhuǎn)化為毒性較小且具有揮發(fā)性的元素態(tài)汞的能力,研究了轉(zhuǎn)基因番茄在汞污染土壤中仍能生產(chǎn)符合食品安全規(guī)定中汞含量標(biāo)準(zhǔn)的果實(shí),并且具有修復(fù)土壤汞污染的能力。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,轉(zhuǎn)merA和merB基因作物可以耐受較高濃度的無機(jī)汞和有機(jī)汞,并且轉(zhuǎn)基因作物的果實(shí),種子和葉片中的汞含量相比野生型顯著降低。在外源加入高濃度HgCl2(1600 μg/kg)的土壤中種植時(shí),野生型番茄果實(shí)汞含量為62.66 μg/kg,大幅超過食品安全規(guī)定中的蔬菜汞含量標(biāo)準(zhǔn)(10 μg/kg),而此時(shí)轉(zhuǎn)基因番茄果實(shí)汞含量為9.66 μg/kg,低于最大允許值。在260 μg/kg HgCl2土壤中,野生型番茄果實(shí)汞含量為33.54 μg/kg,而轉(zhuǎn)基因番茄果實(shí)中僅為4.01 μg/kg。這表明在汞污染程度的土壤中轉(zhuǎn)merA/merB基因的番茄可以生產(chǎn)符合...
【文章來源】:南京農(nóng)業(yè)大學(xué)江蘇省 211工程院校 教育部直屬院校
【文章頁數(shù)】:111 頁
【學(xué)位級(jí)別】:博士
【部分圖文】:
圖1-1地球汞循環(huán)(單位:噸)(引自AMAP/UNEP,2013)??Fig?1-1?Mercury?circulation?in?the?earth?(unit:?ton)??
?2005)。與物理、化學(xué)修復(fù)等技術(shù)相比,??植物修復(fù)技術(shù)可以同時(shí)修復(fù)多種污染,操作方法簡單,總投資較低后續(xù)維護(hù)容易并??且不造成二次污染,此外該過程中種植的大量植物具有潛在的經(jīng)濟(jì)和社會(huì)效益,符??合當(dāng)今綠色環(huán)保的思想,適應(yīng)現(xiàn)代環(huán)境保護(hù)的要求。由于這些優(yōu)點(diǎn),植物修復(fù)技術(shù)??受到了廣泛的重視,相關(guān)研究也不斷深入,是解決土壤汞污染問題的一條很有希望??的道路。??利用植物來修復(fù)污染土壤有多種途徑,其中由于修復(fù)原理的不同通常分為植物??揮發(fā)修復(fù)、植物降解修復(fù)、植物提取修復(fù)和植物穩(wěn)定修復(fù)(圖1-2)。??〇〇?〇?〇?\???植物揮發(fā)修復(fù)|?r?Pi?'??????I?t?植物降解修s??植物穩(wěn)定修fi?Jo?o??,;?或植物促進(jìn)修M??HbhiiiiMHBiiiiihH??圖1-2?土壤重金屬的植物修復(fù)(引自Pil〇n-Smits&Pilon,2000)??Fig?1-2?Phytoremediation?of?soil?metals??5.1.2.1?植物揮發(fā)修復(fù)(phytovolatization)??植物揮發(fā)修復(fù)是利用植物將重金屬吸收到植物體內(nèi)之后,經(jīng)一系列物理、化學(xué)??和生理反應(yīng)將其轉(zhuǎn)化為氣態(tài)物質(zhì)釋放到大氣中。由原理可以看出,該技術(shù)大多應(yīng)用??于揮發(fā)性重金屬的修復(fù),而汞由于其元素態(tài)的單質(zhì)汞具有揮發(fā)性,因此植物揮發(fā)修??復(fù)技術(shù)在修復(fù)土壤汞污染中得到了廣泛關(guān)注。雖然普通植物在生長過程中可以通過??葉片向外界揮發(fā)一定量的汞(AMAP/UNEP,?2013),但通常效率很低,因此研究人??員利用轉(zhuǎn)基因技術(shù)來增強(qiáng)植物揮發(fā)修復(fù)汞的能力(Rughetal.,?1996)。??Med基因??Mer兒來源于
?第一章文獻(xiàn)綜述???7技術(shù)路線??merA/merS基因合成及測(cè)序驗(yàn)證???▼???構(gòu)迮枯物衣達(dá)錢體??轉(zhuǎn)化農(nóng)桿菌LBA4404、EHA105和GV3101??1?"??授染子葉轉(zhuǎn)化#茄??轉(zhuǎn)基因掊株的篩選與鑒定???I???轉(zhuǎn)?merA/merRM?因在??植物中的有效性驗(yàn)證??■?Z?\??轉(zhuǎn)叢因番茄抗汞能力檢驗(yàn)||?^meM/mer8jj??I?因降低梢物和土?????1?壤汞含e的作用??轉(zhuǎn)基w#茄果實(shí)和?在水稻、:^草和??則-狀含s淑?|擬南芥岑&驗(yàn)證??y??轉(zhuǎn)基因降??低土壤汞含遺測(cè)定??■?I?1?|??燃煤電廠蔬菜土壤汞污染程度調(diào)赍???▼???轉(zhuǎn)nw/A/^)K8貓因作物在燃煤??電廠區(qū)域應(yīng)用的可行性驗(yàn)證??圖1-3本研究技術(shù)路線??Fig?1-3?Technology?roadmap?in?this?study??25??
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]不可輕視的隱形殺手——汞污染[J]. 榮鳳賢. 農(nóng)村青少年科學(xué)探究. 2016(06)
[2]中國燃煤電廠汞的物質(zhì)流向與汞排放研究[J]. 惠霂霖,張磊,王祖光,王書肖. 中國環(huán)境科學(xué). 2015(08)
[3]珠三角某垃圾焚燒廠周邊植物葉片汞含量空間格局影響因素影響因素[J]. 趙曦,李娟,黃藝,陸克定,肖朝明,肖遙. 生態(tài)毒理學(xué)報(bào). 2015(04)
[4]硫代硫酸銨添加對(duì)黃平大黃油菜富集土壤汞的影響-田間試驗(yàn)[J]. 王建旭,張軍方,馮新斌,謝園艷,余志. 生態(tài)毒理學(xué)報(bào). 2014(05)
[5]根表鐵膜的形成和添加硒對(duì)水稻吸收轉(zhuǎn)運(yùn)無機(jī)汞和甲基汞的影響[J]. 李云云,趙甲亭,高愈希,李玉鋒,李柏,趙宇亮,柴之芳. 生態(tài)毒理學(xué)報(bào). 2014(05)
[6]南京某燃煤電廠汞的排放特點(diǎn)及分布特征[J]. 張迪生,謝馨. 環(huán)境監(jiān)測(cè)管理與技術(shù). 2014(03)
[7]低分子有機(jī)酸對(duì)汞氧化還原反應(yīng)的影響[J]. 趙士波,孫榮國,王定勇,王小文,張成. 環(huán)境科學(xué). 2014(06)
[8]貴州萬山汞礦遺址調(diào)查報(bào)告[J]. 李映福,周必素,韋莉果. 江漢考古. 2014(02)
[9]大型煉鋅廠周邊土壤及蔬菜的汞污染評(píng)價(jià)及來源分析[J]. 劉芳,王書肖,吳清茹,林海. 環(huán)境科學(xué). 2013(02)
[10]松花江上游夾皮溝金礦土壤與大氣汞污染特征[J]. 張剛,王寧,王媛,劉特,艾建超. 環(huán)境科學(xué). 2012(09)
碩士論文
[1]富汞植物的篩選及性能評(píng)價(jià)[D]. 李有丹.北京化工大學(xué) 2015
[2]根系結(jié)構(gòu)對(duì)水稻吸收汞的影響[D]. 馬敏.華東師范大學(xué) 2012
本文編號(hào):3254944
【文章來源】:南京農(nóng)業(yè)大學(xué)江蘇省 211工程院校 教育部直屬院校
【文章頁數(shù)】:111 頁
【學(xué)位級(jí)別】:博士
【部分圖文】:
圖1-1地球汞循環(huán)(單位:噸)(引自AMAP/UNEP,2013)??Fig?1-1?Mercury?circulation?in?the?earth?(unit:?ton)??
?2005)。與物理、化學(xué)修復(fù)等技術(shù)相比,??植物修復(fù)技術(shù)可以同時(shí)修復(fù)多種污染,操作方法簡單,總投資較低后續(xù)維護(hù)容易并??且不造成二次污染,此外該過程中種植的大量植物具有潛在的經(jīng)濟(jì)和社會(huì)效益,符??合當(dāng)今綠色環(huán)保的思想,適應(yīng)現(xiàn)代環(huán)境保護(hù)的要求。由于這些優(yōu)點(diǎn),植物修復(fù)技術(shù)??受到了廣泛的重視,相關(guān)研究也不斷深入,是解決土壤汞污染問題的一條很有希望??的道路。??利用植物來修復(fù)污染土壤有多種途徑,其中由于修復(fù)原理的不同通常分為植物??揮發(fā)修復(fù)、植物降解修復(fù)、植物提取修復(fù)和植物穩(wěn)定修復(fù)(圖1-2)。??〇〇?〇?〇?\???植物揮發(fā)修復(fù)|?r?Pi?'??????I?t?植物降解修s??植物穩(wěn)定修fi?Jo?o??,;?或植物促進(jìn)修M??HbhiiiiMHBiiiiihH??圖1-2?土壤重金屬的植物修復(fù)(引自Pil〇n-Smits&Pilon,2000)??Fig?1-2?Phytoremediation?of?soil?metals??5.1.2.1?植物揮發(fā)修復(fù)(phytovolatization)??植物揮發(fā)修復(fù)是利用植物將重金屬吸收到植物體內(nèi)之后,經(jīng)一系列物理、化學(xué)??和生理反應(yīng)將其轉(zhuǎn)化為氣態(tài)物質(zhì)釋放到大氣中。由原理可以看出,該技術(shù)大多應(yīng)用??于揮發(fā)性重金屬的修復(fù),而汞由于其元素態(tài)的單質(zhì)汞具有揮發(fā)性,因此植物揮發(fā)修??復(fù)技術(shù)在修復(fù)土壤汞污染中得到了廣泛關(guān)注。雖然普通植物在生長過程中可以通過??葉片向外界揮發(fā)一定量的汞(AMAP/UNEP,?2013),但通常效率很低,因此研究人??員利用轉(zhuǎn)基因技術(shù)來增強(qiáng)植物揮發(fā)修復(fù)汞的能力(Rughetal.,?1996)。??Med基因??Mer兒來源于
?第一章文獻(xiàn)綜述???7技術(shù)路線??merA/merS基因合成及測(cè)序驗(yàn)證???▼???構(gòu)迮枯物衣達(dá)錢體??轉(zhuǎn)化農(nóng)桿菌LBA4404、EHA105和GV3101??1?"??授染子葉轉(zhuǎn)化#茄??轉(zhuǎn)基因掊株的篩選與鑒定???I???轉(zhuǎn)?merA/merRM?因在??植物中的有效性驗(yàn)證??■?Z?\??轉(zhuǎn)叢因番茄抗汞能力檢驗(yàn)||?^meM/mer8jj??I?因降低梢物和土?????1?壤汞含e的作用??轉(zhuǎn)基w#茄果實(shí)和?在水稻、:^草和??則-狀含s淑?|擬南芥岑&驗(yàn)證??y??轉(zhuǎn)基因降??低土壤汞含遺測(cè)定??■?I?1?|??燃煤電廠蔬菜土壤汞污染程度調(diào)赍???▼???轉(zhuǎn)nw/A/^)K8貓因作物在燃煤??電廠區(qū)域應(yīng)用的可行性驗(yàn)證??圖1-3本研究技術(shù)路線??Fig?1-3?Technology?roadmap?in?this?study??25??
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]不可輕視的隱形殺手——汞污染[J]. 榮鳳賢. 農(nóng)村青少年科學(xué)探究. 2016(06)
[2]中國燃煤電廠汞的物質(zhì)流向與汞排放研究[J]. 惠霂霖,張磊,王祖光,王書肖. 中國環(huán)境科學(xué). 2015(08)
[3]珠三角某垃圾焚燒廠周邊植物葉片汞含量空間格局影響因素影響因素[J]. 趙曦,李娟,黃藝,陸克定,肖朝明,肖遙. 生態(tài)毒理學(xué)報(bào). 2015(04)
[4]硫代硫酸銨添加對(duì)黃平大黃油菜富集土壤汞的影響-田間試驗(yàn)[J]. 王建旭,張軍方,馮新斌,謝園艷,余志. 生態(tài)毒理學(xué)報(bào). 2014(05)
[5]根表鐵膜的形成和添加硒對(duì)水稻吸收轉(zhuǎn)運(yùn)無機(jī)汞和甲基汞的影響[J]. 李云云,趙甲亭,高愈希,李玉鋒,李柏,趙宇亮,柴之芳. 生態(tài)毒理學(xué)報(bào). 2014(05)
[6]南京某燃煤電廠汞的排放特點(diǎn)及分布特征[J]. 張迪生,謝馨. 環(huán)境監(jiān)測(cè)管理與技術(shù). 2014(03)
[7]低分子有機(jī)酸對(duì)汞氧化還原反應(yīng)的影響[J]. 趙士波,孫榮國,王定勇,王小文,張成. 環(huán)境科學(xué). 2014(06)
[8]貴州萬山汞礦遺址調(diào)查報(bào)告[J]. 李映福,周必素,韋莉果. 江漢考古. 2014(02)
[9]大型煉鋅廠周邊土壤及蔬菜的汞污染評(píng)價(jià)及來源分析[J]. 劉芳,王書肖,吳清茹,林海. 環(huán)境科學(xué). 2013(02)
[10]松花江上游夾皮溝金礦土壤與大氣汞污染特征[J]. 張剛,王寧,王媛,劉特,艾建超. 環(huán)境科學(xué). 2012(09)
碩士論文
[1]富汞植物的篩選及性能評(píng)價(jià)[D]. 李有丹.北京化工大學(xué) 2015
[2]根系結(jié)構(gòu)對(duì)水稻吸收汞的影響[D]. 馬敏.華東師范大學(xué) 2012
本文編號(hào):3254944
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