細胞凋亡（apoptosis）是細胞死亡的一種常見方式,參與生物生命周期的大多數(shù)生理生化過程;同時也是生物生殖系統(tǒng)發(fā)育所必需的生理過程。細胞凋亡具有相對保守的形態(tài)變化特征包括:細胞質(zhì)濃縮、染色體DNA斷裂、細胞核裂解以及細胞骨架降解等。昆蟲中細胞凋亡的研究主要集中于其生殖系統(tǒng)。昆蟲卵發(fā)育后期,卵巢管滋養(yǎng)細胞中的營養(yǎng)物質(zhì)以及染色體通過細胞凋亡的方式提供給卵細胞,從而保證卵細胞的快速正常發(fā)育。因此,大量滋養(yǎng)細胞群的凋亡又被認(rèn)為是昆蟲卵發(fā)育成熟的標(biāo)志。微生物Wolbachia是一種母系遺傳的細胞內(nèi)共生菌,廣泛存在于節(jié)肢動物中。由于共生茵Wolbachia的存活和繁殖都依靠寄主,其與寄主有著極為密切的關(guān)系。這類共生菌能對寄主生物學(xué)特性包括生殖等產(chǎn)生多方面的影響,但其是寄主的初級共生菌還是次級共生菌,因寄主以及Wolbachia株系不同而不同。目前關(guān)于共生菌Wolbachia調(diào)控寄主適合度的研究不少,但是相關(guān)機制并不了解。而對于共生茵Wolbachia調(diào)控寄主卵形成相關(guān)分子機制以及寄主自身生殖系統(tǒng)細胞生理生化變化的研究則更少。自然界灰飛虱都100%感染共生菌WolbachiawStri株系,并且... 

【文章來源】：南京農(nóng)業(yè)大學(xué)江蘇省 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：163 頁

【學(xué)位級別】：博士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
第一章 文獻綜述
    1. 共生菌Wolbachia的研究進展
        1.1 Wolbachia對寄主的調(diào)控作用
        1.2 Wolbachia對寄主生殖調(diào)控作用
    2. 細胞程序性死亡
        2.1 細胞程序性死亡的研究進展
        2.2 昆蟲細胞凋亡的研究進展
        2.3 昆蟲卵形成中細胞凋亡
        2.4 昆蟲細胞凋亡基因
    3. 昆蟲體內(nèi)微生物垂直傳播
        3.1 類酵母的垂直傳播
        3.2 病毒的垂直傳播
        3.3 Wolbachia的垂直傳播
    4. 灰飛虱防治研究進展
        4.1 灰飛虱生物學(xué)特性
        4.2 灰飛虱防治研究
第二章 共生菌Wolbachia對灰飛虱適合度的影響
    1. 材料與方法
        1.1 供試材料
        1.2 供試材料的鑒定
        1.3 產(chǎn)卵量及成蟲壽命評估
        1.4 發(fā)育歷期評估
        1.5 卵孵化率,雌性比例以及成熟后代比例評估
        1.6 數(shù)據(jù)處理與分析
    2. 結(jié)果與分析
        2.1 灰飛虱體內(nèi)Wolbachia鑒定
        2.2 Wolbachia對灰飛虱適合度的影響
    3. 討論
第三章 共生菌Wolbachia對灰飛虱卵巢細胞凋亡的影響
    1. 材料與方法
        1.1 供試材料
        1.2 供試材料的收集
        1.3 熒光原位雜交
        1.4 TUNEL檢測
        1.5 Western-blot檢測
        1.6 酶活力檢測
        1.7 數(shù)據(jù)處理與分析
    2. 結(jié)果與分析
        2.1 灰飛虱卵巢細胞凋亡
        2.2 Caspase-3-like蛋白Western-blot檢測
        2.3 Caspase-3-like蛋白酶活
    3. 討論
第四章 抑制劑對灰飛虱卵巢細胞凋亡的影響
    1. 材料與方法
        1.1 供試材料的采集與鑒定
        1.2 供試材料的飼養(yǎng)
        1.3 樣品收集
        1.4 灰飛虱RNA提取
        1.5 cDNA的合成
        1.6 SYBR Green熒光定量RT-qPCR檢測
    2. 結(jié)果與分析
        2.1 抑制劑對灰飛虱產(chǎn)卵量的影響
        2.2 抑制劑對caspase-3-like以及Vg表達量的影響
        2.3 抑制劑對caspase-3-like酶活力的影響
    3. 討論
第五章 灰飛虱細胞凋亡caspase基因
    1. 材料與方法
        1.1 供試材料的采集與鑒定
        1.2 供試材料的收集
        1.3 細胞凋亡基因克隆
        1.4 細胞凋亡基因初級結(jié)構(gòu)分析
        1.5 Caspase基因表達水平
        1.6 dscas-RNA合成及顯微注射
        1.7 數(shù)據(jù)處理與分析
    2. 結(jié)果與分析
        2.1 Caspase基因克隆結(jié)果
        2.2 Caspase基因初級結(jié)構(gòu)分析
        2.3 不同發(fā)育階段灰飛虱caspase基因表達水平
        2.4 RNAi干擾caspase基因?qū)绎w虱產(chǎn)卵量的影響
    3. 討論
第六章 共生菌Wolbachia在灰飛虱卵巢中的定位
    1. 材料與方法
        1.1 供試材料的采集與鑒定
        1.2 供試材料的收集
        1.3 熒光定量RT-qPCR檢測
        1.4 熒光定量qPCR檢測
        1.5 免疫組化
        1.6 Vg基因干擾
        1.7 數(shù)據(jù)處理與分析
    2. 結(jié)果與分析
        2.1 灰飛虱卵巢內(nèi)Wolbachia滴度及Vg表達水平
        2.2 灰飛虱卵巢內(nèi)Wolbachia的分布
        2.3 dsVg對卵巢中Wolbachia定位的影響
        2.4 Wolbachia在卵巢中的轉(zhuǎn)移路徑
    3. 討論
第七章 總結(jié)與討論
    1. 全文總結(jié)與討論
    2. 下一步研究方向
    3. 本研究創(chuàng)新點
參考文獻
附錄
在讀期間論文發(fā)表及獎勵情況
致謝


【參考文獻】：
期刊論文
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碩士論文
[1]不同地理種群灰飛虱生態(tài)學(xué)特性的比較研究[D]. 侯文杰.南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 2013
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本文編號：3203718