鉤吻（Gelsemium）是一種常被用于治療神經(jīng)疼痛、抗腫瘤的傳統(tǒng)中藥,對(duì)人有毒,對(duì)豬和羊等食源性動(dòng)物具有促生長(zhǎng)作用。由于鉤吻對(duì)人和對(duì)動(dòng)物具有種屬差異性,鉤吻在動(dòng)物體內(nèi)是否存在組織殘留,是否影響動(dòng)物源性食品安全,目前未見報(bào)道�，F(xiàn)代醫(yī)學(xué)證明鉤吻主要活性物質(zhì)是鉤吻生物堿,然而,目前尚未進(jìn)行鉤吻作用的物質(zhì)基礎(chǔ)和殘留消除規(guī)律的研究。因此,本文在實(shí)驗(yàn)室前期建立的鉤吻化學(xué)成分譜基礎(chǔ)上,主要以LC-MS/MS分析技術(shù)為手段,從整體上對(duì)鉤吻生物堿在豬體內(nèi)的藥物動(dòng)力學(xué)和殘留消除規(guī)律進(jìn)行研究,明確其入血成分在體內(nèi)的藥物動(dòng)力學(xué)特征及其動(dòng)態(tài)變化、消除規(guī)律。相關(guān)研究結(jié)果將為鉤吻中獸藥開發(fā)、臨床合理使用、制定質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)和藥理作用研究奠定基礎(chǔ),也為動(dòng)物性食品安全評(píng)價(jià)提供科學(xué)依據(jù)。1.豬血漿和組織中三種鉤吻生物堿定量/確證方法研究建立了可以同時(shí)在豬血漿和組織中檢測(cè)鉤吻素甲、鉤吻素子和鉤吻素己的LC-MS/MS檢測(cè)方法,并對(duì)其進(jìn)行了特異性、專一性、基質(zhì)效應(yīng)、線性及線性關(guān)系、LOD和LOQ、準(zhǔn)確度、精密度以及穩(wěn)定性等方法學(xué)考察,結(jié)果顯示,鉤吻素甲、鉤吻素子和鉤吻素己在豬血漿和在豬肌肉、肝臟和腎臟中特異性良好,線性關(guān)系大于0... 

【文章來(lái)源】：湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)湖南省

【文章頁(yè)數(shù)】：166 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
第1章 前言
    1.1 立題依據(jù)
    1.2 歷史溯源
    1.3 鉤吻化學(xué)組成成分研究進(jìn)展
        1.3.1 鉤吻生物堿研究進(jìn)展
            1.3.1.1 鉤吻素甲類
            1.3.1.2 鉤吻素子類
            1.3.1.3 甲基鉤吻素乙類（gelsedine-type）
            1.3.1.4 胡蔓藤乙素類（humantenine-type）
            1.3.1.5 蛇根堿類（sarpagine-type）
            1.3.1.6 育亨烷（Yohimbane）型/常綠鉤吻堿類型
            1.3.1.7 其他未歸屬類型的鉤吻生物堿
        1.3.2 鉤吻非生物堿成分研究進(jìn)展
            1.3.2.1 環(huán)烯醚萜類
            1.3.2.2 油脂類
            1.3.2.3 三萜類
            1.3.2.4 甾體及其苷類
            1.3.2.5 香豆素類和黃酮類
            1.3.2.6 木脂素類
            1.3.2.7 酚酸類
            1.3.2.8 果糖及其衍生物
            1.3.2.9 Megastigmane 型苷類化合物
    1.4 鉤吻藥理和毒性作用研究進(jìn)展
        1.4.1 鉤吻的抗腫瘤作用
        1.4.2 鉤吻的鎮(zhèn)痛抗焦慮作用
        1.4.3 鉤吻的抗炎作用
        1.4.4 鉤吻的促生長(zhǎng)作用
        1.4.5 鉤吻毒性作用
    1.5 鉤吻藥物代謝動(dòng)力學(xué)研究進(jìn)展
        1.5.1 鉤吻素子藥物代謝動(dòng)力學(xué)研究
        1.5.2 鉤吻素甲的體內(nèi)外藥物代謝動(dòng)力學(xué)研究
    1.6 研究?jī)?nèi)容與意義
        1.6.1 研究?jī)?nèi)容、目標(biāo)
        1.6.2 研究意義
第2章 豬血漿和組織中三種鉤吻生物堿定量/確證方法研究
    2.1 引言
    2.2 材料與方法
        2.2.1 標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照品
        2.2.2 主要試劑
        2.2.3 樣品的采集與保存
        2.2.4 主要儀器
        2.2.5 制樣方法
        2.2.6 分析測(cè)定條件
    2.3 定量確證方法的建立
        2.3.1 血漿中標(biāo)準(zhǔn)曲線和工作曲線的制備
        2.3.2 肌肉、肝臟和腎臟中標(biāo)準(zhǔn)曲線和工作曲線的制備
        2.3.3 計(jì)算公式
        2.3.4 基質(zhì)效應(yīng)的測(cè)定
        2.3.5 LOD和LOQ 測(cè)定
        2.3.6 準(zhǔn)確度和精密度實(shí)驗(yàn)
        2.3.7 穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)
        2.3.8 三種鉤吻生物堿在豬血漿和組織中的方法外推
    2.4 結(jié)果
        2.4.1 血漿樣品前處理優(yōu)化結(jié)果
        2.4.2 三種鉤吻標(biāo)準(zhǔn)品在血漿中定量/確證方法結(jié)果
            2.4.2.1 質(zhì)譜條件的優(yōu)化
            2.4.2.2 液相條件的優(yōu)化
            2.4.2.3 特異性和離子豐度比
            2.4.2.4 基質(zhì)效應(yīng)
            2.4.2.5 LOD和LOQ
            2.4.2.6 工作曲線和線性范圍
            2.4.2.7 準(zhǔn)確度和精密度
            2.4.2.8 穩(wěn)定性
        2.4.3 豬肌肉、肝臟和腎臟樣品前處理優(yōu)化結(jié)果
        2.4.4 三種鉤吻標(biāo)準(zhǔn)品在豬肌肉、肝臟和腎臟中確證方法結(jié)果
            2.4.4.1 質(zhì)譜條件的優(yōu)化
            2.4.4.2 特異性與專一性
            2.4.4.3 基質(zhì)效應(yīng)
            2.4.4.4 LOD和LOQ
            2.4.4.5 工作曲線和線性范圍
            2.4.4.6 準(zhǔn)確度和精密度
        2.4.5 三種鉤吻標(biāo)準(zhǔn)品血漿方法外推在豬尿液和膽汁中的結(jié)果
        2.4.6 三種鉤吻標(biāo)準(zhǔn)品在方法外推在豬其他組織中的結(jié)果
    2.5 討論與分析
        2.5.1 質(zhì)譜條件的選擇
        2.5.2 液相條件的選擇
        2.5.3 豬血漿方法中提取試劑的選擇
        2.5.4 豬肌肉、肝臟和腎臟中提取、凈化步驟的選擇
        2.5.5 方法學(xué)考察
        2.5.6 豬血漿和豬組織中方法應(yīng)用于豬尿液、膽汁和其他組織中的可行性分析
        2.5.7 內(nèi)標(biāo)物質(zhì)遴選
    2.6 小結(jié)
第3章 豬血漿和組織中鉤吻總生物堿定量/確證方法研究
    3.1 引言
    3.2 材料與方法
        3.2.1 標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照品
        3.2.2 主要試劑
        3.2.3 樣品的采集與保存
        3.2.4 主要儀器
        3.2.5 制樣方法
        3.2.6 分析測(cè)定條件
    3.3 定量確證方法的建立
        3.3.1 多組分鉤吻生物堿整體定量分析策略
        3.3.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線和工作曲線的制備
        3.3.3 計(jì)算公式
        3.3.4 基質(zhì)效應(yīng)的測(cè)定
        3.3.5 LOD和LOQ測(cè)定
        3.3.6 準(zhǔn)確度和精密度實(shí)驗(yàn)
        3.3.7 鉤吻總生物堿在豬血漿和組織中的方法外推
    3.4 結(jié)果
        3.4.1 鉤吻標(biāo)準(zhǔn)品在血漿中定量/確證方法結(jié)果
            3.4.1.1 多組分鉤吻生物堿液相-質(zhì)譜參數(shù)優(yōu)化
            3.4.1.2 多組分鉤吻生物堿名稱的鑒別
            3.4.1.3 特異性
            3.4.1.4 基質(zhì)效應(yīng)
            3.4.1.5 LOD和LOQ
            3.4.1.6 工作曲線和線性范圍
            3.4.1.7 準(zhǔn)確度和精密度
            3.4.1.8 穩(wěn)定性
        3.4.2 鉤吻總生物堿在豬肌肉、肝臟和腎臟中定量/確證方法結(jié)果
            3.4.2.1 多組分鉤吻生物堿液相-質(zhì)譜條件的優(yōu)化
            3.4.2.2 特異性
            3.4.2.3 基質(zhì)效應(yīng)
            3.4.2.4 LOD和LOQ
            3.4.2.5 工作曲線和線性范圍
            3.4.2.6 準(zhǔn)確度和精密度
        3.4.3 多組分鉤吻生物堿方法外推結(jié)果
    3.5 討論
        3.5.1 多組分鉤吻總生物堿質(zhì)譜參數(shù)優(yōu)化
        3.5.2 分析條件的選擇
        3.5.3 鉤吻總生物堿方法學(xué)考察
    3.6 小結(jié)
第4 章鉤吻生物堿在豬體內(nèi)藥物動(dòng)力學(xué)研究
    4.1 引言
    4.2 材料與方法
        4.2.1 材料
        4.2.2 方法
            4.2.2.1 實(shí)驗(yàn)分組
            4.2.2.2 灌胃方法
            4.2.2.3 樣品采集與保存
            4.2.2.4 樣品制備與檢測(cè)
            4.2.2.5 數(shù)據(jù)處理方法與計(jì)算
    4.3 結(jié)果
        4.3.1 精制鉤吻生物堿單次藥物動(dòng)力學(xué)實(shí)驗(yàn)結(jié)果
            4.3.1.1 三種鉤吻生物標(biāo)準(zhǔn)品動(dòng)力學(xué)實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        4.3.2 鉤吻總生物堿動(dòng)力學(xué)實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        4.3.3 鉤吻全草粉末多次藥物動(dòng)力學(xué)實(shí)驗(yàn)結(jié)果
            4.3.3.1 三種鉤吻生物標(biāo)準(zhǔn)品動(dòng)力學(xué)實(shí)驗(yàn)結(jié)果
            4.3.3.2 鉤吻總生物堿動(dòng)力學(xué)實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    4.4 討論
        4.4.1 三種鉤吻標(biāo)準(zhǔn)品在豬體內(nèi)單次血漿藥動(dòng)學(xué)
        4.4.2 鉤吻總生物堿豬體內(nèi)單次血漿藥動(dòng)學(xué)
        4.4.3 三種鉤吻標(biāo)準(zhǔn)品在豬體內(nèi)多次血漿藥動(dòng)學(xué)
        4.4.4 鉤吻總生物堿在豬體內(nèi)多次血漿藥動(dòng)學(xué)
    4.5 小結(jié)
第5 章鉤吻生物堿分布及其消除規(guī)律研究
    5.1 引言
    5.2 材料與方法
        5.2.1 材料
        5.2.2 方法
            5.2.2.1 豬飼養(yǎng)鉤吻后行為學(xué)觀察
            5.2.2.2 血常規(guī)檢測(cè)
            5.2.2.3 組織病理學(xué)觀察
            5.2.2.4 組織樣品采集
            5.2.2.5 樣品制備與檢測(cè)
            5.2.2.6 殘留消除常數(shù)的計(jì)算
    5.3 結(jié)果
        5.3.1 行為學(xué)觀察結(jié)果
        5.3.2 料肉比、血常規(guī)以及尿常規(guī)結(jié)果
        5.3.3 組織切片結(jié)果
        5.3.4 鉤吻全草中三種鉤吻生物堿分布及消除實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        5.3.5 鉤吻總生物堿分布及消除實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    5.4 討論
        5.4.1 料肉比、血常規(guī)、尿常規(guī)及組織切片分析
        5.4.2 鉤吻生物堿分布與消除規(guī)律分析
    5.5 小結(jié)
第6章 鉤吻生物堿代謝物組學(xué)初步研究
    6.1 引言
    6.2 材料與方法
        6.2.1 主要試劑
        6.2.2 主要儀器
        6.2.3 樣品的采集與保存
        6.2.4 分析條件
        6.2.5 血漿樣品的制備
        6.2.6 數(shù)據(jù)分析
    6.3 結(jié)果
        6.3.1 儀器穩(wěn)定性和方法穩(wěn)定性檢驗(yàn)結(jié)果
        6.3.2 差異代謝物鑒定分析
        6.3.3 差異代謝物的篩選
        6.3.4 潛在生物標(biāo)志物的遴選以及代謝通路的推導(dǎo)
    6.4 討論
    6.5 小結(jié)
第7章 全文總結(jié)與創(chuàng)新點(diǎn)
參考文獻(xiàn)
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致謝
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【參考文獻(xiàn)】：
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[3]鉤吻提取物對(duì)生長(zhǎng)豬生長(zhǎng)性能、腸道形態(tài)和盲腸菌群的影響[J]. 陳小軍,王宇,王帥帥,伍勇,李元義,孫志良.  動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)學(xué)報(bào). 2018(09)
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碩士論文
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本文編號(hào)：3187290