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元寶楓葉片酚類物質(zhì)評價及其黃酮合成通路表征

發(fā)布時間:2021-05-10 17:09
  元寶楓(Acertruncatum Bunge),為槭樹科(Aceraceae)槭樹屬落葉喬木,是我國重要的鄉(xiāng)土樹種。在作為經(jīng)濟、綠化樹種的同時,元寶楓葉片、種仁及內(nèi)種皮富含的特殊化學成分更賦予了其多種生物功能。元寶楓葉生物量大,并每年自然更新,具有巨大的開發(fā)前景。并且元寶楓葉含有豐富的酚酸類、黃酮類、單寧類等成分,從而具有多種生物活性。但目前針對元寶楓葉內(nèi)含有的具體酚類成分及具有的抗氧化活性尚不清楚,并且關(guān)于其相關(guān)采收時期、提取方法、與熱處理等基本加工處理研究尚不夠系統(tǒng)深入,亟待完善。此外,元寶楓葉內(nèi)黃酮類化合物是其酚類物質(zhì)的重要組成,也是抗氧化性的主要貢獻者。但關(guān)于元寶楓葉黃酮生物合成通路的相關(guān)研究尚未出現(xiàn),而關(guān)于其中轉(zhuǎn)錄因子的調(diào)控機制亦仍屬空缺。本研究將系統(tǒng)填補元寶楓葉研究中的上述空白,為元寶楓葉資源的深度研發(fā)提供基礎(chǔ)理論數(shù)據(jù)。主要成果如下:(1)對整個生長時期元寶楓葉內(nèi)酚類物質(zhì)及抗氧化能力的季節(jié)性變化規(guī)律進行探究。結(jié)果發(fā)現(xiàn)不同采收時間的元寶楓葉均含有大量總酚、總單寧、總黃酮,并具有較強的DPPH、ABTS、ORAC抗氧化能力。其中,4月及11月葉片相較于其他中間月份(5-10月... 

【文章來源】:北京林業(yè)大學北京市 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】:129 頁

【學位級別】:博士

【文章目錄】:
摘要
ABSTRACT
1 引言
    1.1 槭屬植物資源研究概況
        1.1.1 槭屬植物資源的生物學特性及開發(fā)利用價值
        1.1.2 槭屬植物資源的活性成分
        1.1.3 槭屬植物資源的生物活性
    1.2 元寶楓資源研究概況
        1.2.1 元寶楓的分布
        1.2.2 元寶楓的生長特性與適應(yīng)性
        1.2.3 元寶楓的生物學特性
        1.2.4 元寶楓的化學成分及生物活性
    1.3 黃酮合成通路的表征及轉(zhuǎn)錄因子的篩選
        1.3.1 黃酮類物質(zhì)的基本結(jié)構(gòu)以及生物活性
        1.3.2 黃酮合成通路結(jié)構(gòu)基因的研究進展
        1.3.3 MYB轉(zhuǎn)錄因子對于黃酮合成通路的調(diào)控
        1.3.4 組學研究手段在植物合成通路中的應(yīng)用
    1.4 本研究的目的及內(nèi)容
        1.4.1 研究目的及意義
        1.4.2 研究內(nèi)容及技術(shù)路線
2 元寶楓葉中酚類物質(zhì)的季節(jié)性變化對其抗氧化能力影響的研究
    2.1 材料、試劑及實驗設(shè)備
        2.1.1 材料及試劑
        2.1.2 實驗設(shè)備
    2.2 實驗方法
        2.2.1 元寶楓葉總酚、總單寧及總黃酮的測定
        2.2.2 元寶楓葉抗氧化能力測定
        2.2.3 高效液相色譜法(HPLC)分析
        2.2.4 統(tǒng)計學分析
    2.3 結(jié)果與分析
        2.3.1 元寶楓葉中總酚、總黃酮和總單寧的季節(jié)性變化
        2.3.2 元寶楓葉抗氧化能力
        2.3.3 HPLC分析季節(jié)性變化對元寶楓中活性的影響
        2.3.4 相關(guān)性分析
    2.4 本章小結(jié)
3 響應(yīng)面法優(yōu)化超聲輔助提取元寶楓葉酚類物質(zhì)及抗氧化活性研究
    3.1 材料、試劑及實驗設(shè)備
        3.1.1 材料及試劑
        3.1.2 實驗設(shè)備
    3.2 實驗方法
        3.2.1 超聲輔助提取法的優(yōu)化
        3.2.2 總酚測定
        3.2.3 DPPH·清除能力測定
        3.2.4 酚類物質(zhì)的UPLC-QTOF-MS/MS分析
        3.2.5 數(shù)據(jù)分析
    3.3 結(jié)果與分析
        3.3.1 溶劑和自變量對UAE的影響
        3.3.2 統(tǒng)計分析和模型擬合
        3.3.3 各變量間的相互作用對ATL中酚類提取率和抗氧化活性的影響
        3.3.4 元寶楓葉中的酚類物質(zhì)
    3.4 本章小結(jié)
4 熱處理對元寶楓葉和花中10種主要酚類物質(zhì)及其抗氧化貢獻的影響
    4.1 材料及實驗設(shè)備
        4.1.1 植物材料及藥品試劑
        4.1.2 實驗設(shè)備
    4.2 實驗方法
        4.2.1 元寶楓葉花的熱處理方法
        4.2.2 UPLC-DAD-QTOF-MS/MS測定酚類組成
        4.2.3 HPLC對于單體酚類化合物的定量
        4.2.4 總酚含量測定
        4.2.5 抗氧化能力測定
        4.2.6 數(shù)據(jù)分析
    4.3 結(jié)果與分析
        4.3.1 以UPLC-DAD-OTOF-MS/MS和HPLC指紋圖譜對元寶楓葉和花中酚類物質(zhì)鑒定并分類
        4.3.2 熱處理對于酚類成分的改變
        4.3.3 10種主要酚類物質(zhì)所造成的抗氧化能力改變
        4.3.4 10種主要酚類物質(zhì)對ATL及ATF總抗氧化能力的貢獻
    4.4 本章小結(jié)
5 轉(zhuǎn)錄組學及代謝組學揭示元寶楓葉中黃酮合成通路的調(diào)控機制及MYB轉(zhuǎn)錄因子的篩選
    5.1 材料、試劑及實驗設(shè)備
        5.1.1 植物材料及藥品試劑
        5.1.2 實驗設(shè)備
    5.2 實驗方法
        5.2.1 ATL中酚類物質(zhì)的提取
        5.2.2 總酚、總黃酮、及總抗氧化能力的測定
        5.2.3 HPLC對ATL中酚類物質(zhì)的定量檢測
        5.2.4 代謝組學檢測
        5.2.5 轉(zhuǎn)錄組學檢測
        5.2.6 上機測序
        5.2.7 測序數(shù)據(jù)質(zhì)量控制
        5.2.8 DE NOVO拼接
        5.2.9 UNIGENE注釋
        5.2.10 UNIGENE表達豐度計算和差異分析
        5.2.11 實時熒光定量PCR(qRT-PCR)驗證
    5.3 結(jié)果與分析
        5.3.1 元寶楓葉特征時期的篩選
        5.3.2 代謝組學分析
        5.3.3 轉(zhuǎn)錄組學分析
    5.4 本章小結(jié)
6 結(jié)論與展望
    6.1 主要結(jié)論
    6.2 創(chuàng)新點
    6.3 有待進一步開展的工作
參考文獻
個人簡介
導師簡介
獲得成果目錄清單
致謝


【參考文獻】:
期刊論文
[1]元寶楓翅果3種活性成分及抗氧化能力研究[J]. 王瑤,牛立新,白章振,張曉驍,張延龍,王寧.  中國油脂. 2019(02)
[2]我國小品種油料發(fā)展現(xiàn)狀的研究[J]. 魯海龍,張飛,袁榕.  糧食與食品工業(yè). 2018(05)
[3]元寶楓MYB轉(zhuǎn)錄因子基因的克隆(英文)[J]. 王延玲,郝雪英,豐震.  Agricultural Science & Technology. 2016(04)
[4]‘魯紅一號’元寶楓葉片總RNA提取方法的比較研究[J]. 郝雪英,豐震,呂傳青.  山東農(nóng)業(yè)科學. 2015(03)
[5]8種槭樹屬植物的生態(tài)適應(yīng)性評價[J]. 陳建芳,梁冰,趙蓓蓓,李湛東.  廣東農(nóng)業(yè)科學. 2013(06)
[6]從元寶楓油中提取神經(jīng)酸并制備生物柴油的技術(shù)研究[J]. 史宣明,陳燕,張驪,夏輝,魯海龍,孟佳,韓少威.  中國油脂. 2013(02)
[7]新型植物皮革鞣劑的研究進展[J]. 王全杰,任方萍,高龍,宋建國.  皮革科學與工程. 2011(04)
[8]微波萃取元寶楓多酚的工藝研究[J]. 蔡霞,李珺,鄒洪.  中藥材. 2008(11)
[9]元寶楓葉片總DNA提取方法的優(yōu)化[J]. 崔翠,藺銀鼎.  生物技術(shù)通報. 2008(04)
[10]元寶楓化學成分的研究概況[J]. 吳衛(wèi)中,李珺,許疌.  中國藥事. 2008(07)

博士論文
[1]馬鈴薯塊莖不同花色素苷轉(zhuǎn)化機制研究[D]. 劉芳.山東師范大學 2018

碩士論文
[1]元寶楓葉片花色苷相關(guān)基因克隆與序列分析[D]. 馬立敏.山東農(nóng)業(yè)大學 2016



本文編號:3179737

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