發(fā)布時間：2021-05-07 15:22

　　番茄（Solanum lycopersicum L.）在我國北方地區(qū)露地和溫室中均有廣泛栽培,以香甜多汁和營養(yǎng)價值深受大眾喜愛。在番茄果實成熟的過程中,易受到低溫脅迫的影響,品質(zhì)會受到嚴重的影響,在這個過程中涉及許多復(fù)雜的生理生化變化和基因表達。通過分析挖掘出的響應(yīng)脅迫基因的表達特性,為培育出耐低溫型番茄品系提供理論依據(jù)。SlCIF1（cell-wall inhibitor ofβ-fructosidase）是細胞壁轉(zhuǎn)化酶抑制子基因,可以在翻譯后水平調(diào)控細胞壁轉(zhuǎn)化酶活性,從而使番茄果實中積累蔗糖。本研究以轉(zhuǎn)SlCIF1基因和非轉(zhuǎn)基因Micro-Tom番茄綠熟期和紅熟期果實為前期試驗材料,通過基因芯片的表達譜分析,在轉(zhuǎn)基因綠熟期果實中篩選出一個表達量成千倍上調(diào)的小熱激蛋白17.7（SlHSP17.7）基因。小熱激蛋白（sHSPs）作為一種分子伴侶,積極參與植物生長發(fā)育和非生物脅迫響應(yīng)且發(fā)揮著重要的作用。本試驗通過對sHSPs基因家族成員進行生物信息學(xué)分析、對SlHSP17.7基因的定位和SlHSP17.7在兩種不同低溫耐性番茄中響應(yīng)低溫脅迫進行了初步研究,為明確SlHSP17.7基因的功... 

【文章來源】：沈陽農(nóng)業(yè)大學(xué)遼寧省

【文章頁數(shù)】：103 頁

【學(xué)位級別】：博士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
第一章 文獻綜述
    1.1 番茄響應(yīng)低溫脅迫的研究進展
        1.1.1 低溫對番茄生長發(fā)育的影響
        1.1.2 影響番茄響應(yīng)低溫脅迫的因素
    1.2 植物小熱激蛋白研究進展
        1.2.1 成熟sHSPs結(jié)構(gòu)特征
        1.2.2 植物sHSPs基因家族在非生物脅迫下的功能
        1.2.3 sHSPs在植物生長發(fā)育中的作用
    1.3 本研究的目的及意義
第二章 轉(zhuǎn)SlCIF1 基因番茄果實表達譜分析
    2.1 材料與方法
        2.1.1 試驗材料
        2.1.2 主要試劑
        2.1.3 試驗方法
    2.2 結(jié)果與分析
        2.2.1 轉(zhuǎn)SlCIF1 基因番茄陽性植株的鑒定
        2.2.2 轉(zhuǎn)SlCIF1 基因番茄果實中細胞壁轉(zhuǎn)化酶基因的表達及酶活性分析
        2.2.3 轉(zhuǎn)SlCIF1 基因番茄果實中糖含量的變化分析
        2.2.4 差異基因的篩選
        2.2.5 差異基因表達的驗證
        2.2.6 差異基因GO和 KEGG分析
    2.3 討論
    2.4 小結(jié)
第三章 番茄sHSPs基因家族的鑒定及分析
    3.1 材料與方法
        3.1.1 試驗材料
        3.1.2 試驗方法
    3.2 結(jié)果與分析
        3.2.1 番茄sHSPs基因家族的鑒定
        3.2.2 sHSPs基因家族成員結(jié)構(gòu)分析
        3.2.3 幾種主要茄科作物sHSPs基因家族成員系統(tǒng)進化關(guān)系
        3.2.4 番茄sHSPs基因家族成員的順式作用元件分析
        3.2.5 基于RNA-Seq數(shù)據(jù)sHSPs基因家族成員的表達分析
    3.3 討論
    3.4 小結(jié)
第四章 SlHSP17.7 基因組織化學(xué)定位和亞細胞定位
    4.1 材料與方法
        4.1.1 試驗材料
        4.1.2 試驗方法
    4.2 結(jié)果與分析
        4.2.1 SlHSP17.7 載體構(gòu)建及蛋白的誘導(dǎo)表達
        4.2.2 SlHSP17.7 分子伴侶活性分析
        4.2.3 SlHSP17.7+GUS+EGFP表達載體的構(gòu)建
        4.2.4 擬南芥陽性植株的鑒定
        4.2.5 SlHSP17.7 基因的組織化學(xué)定位
        4.2.6 SlHSP17.7 基因的亞細胞定位
    4.3 討論
    4.4 小結(jié)
第五章 SlHSP17.7 對番茄低溫耐性的調(diào)控
    5.1 材料與方法
        5.1.1 試驗材料及材料處理
        5.1.2 試驗方法
    5.2 結(jié)果與分析
        5.2.1 低溫脅迫下,兩種不同低溫耐性番茄中Pro、MDA和 ABA含量變化分析
        5.2.2 SlHSP17.7 基因在兩種不同低溫耐性番茄果實發(fā)育時期表達量的分析
        5.2.3 低溫脅迫下,SlHSP17.7 基因在兩種不同低溫耐性番茄果實中的表達分析
        5.2.4 SlHSP17.7 蛋白在低溫脅迫下的表達
        5.2.5 低溫脅迫下兩種不同低溫耐性番茄果實中糖含量的變化
        5.2.6 過表達SlHSP17.7 基因?qū)oneymaker番茄葉片耐低溫的影響
    5.3 討論
    5.4 小結(jié)
第六章 結(jié)論與展望
    6.1 結(jié)論
    6.2 展望
    6.3 創(chuàng)新點
參考文獻
附錄
致謝
攻讀研究生期間發(fā)表論文


【參考文獻】：
期刊論文
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[2]植物中小分子熱激蛋白基因家族（sHSPs）研究進展[J]. 張寧,姜晶.  植物生理學(xué)報. 2017(06)
[3]番茄HSP20基因家族的全基因組鑒定、系統(tǒng)進化及表達分析[J]. 張寧,姜晶,史潔瑋.  沈陽農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報. 2017(02)
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本文編號：3173627