干擾素（Interferon,IFN）是機(jī)體細(xì)胞受到病毒等生物誘導(dǎo)劑刺激而產(chǎn)生的一類分泌型糖蛋白類細(xì)胞因子,而白細(xì)胞介素18（Interleukin-18,IL-18）是一種具有促炎作用的細(xì)胞因子,由機(jī)體活化的單核細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、樹突狀細(xì)胞等產(chǎn)生,能誘導(dǎo)IFN-γ等細(xì)胞因子的分泌,具有促進(jìn)T細(xì)胞增殖、增強(qiáng)Th1型細(xì)胞、NK細(xì)胞及CTL細(xì)胞的細(xì)胞毒效應(yīng),與臨床自身免疫性疾病及心血管系統(tǒng)疾病等多種疾病的發(fā)生發(fā)展呈現(xiàn)相關(guān)性,IFN和IL-18都具有抗病毒、抗寄生蟲和細(xì)菌感染、抗腫瘤、免疫調(diào)節(jié)等多種生物學(xué)功能。因此,本實(shí)驗(yàn)開展藏獒犬IFN-γ、IFN-α和IL-18的相關(guān)研究,采用分子克隆和基因工程等技術(shù)獲得了3個(gè)基因,體外制備了藏獒犬3個(gè)基因的重組蛋白,驗(yàn)證了其生物學(xué)活性,并開展了臨床相關(guān)實(shí)驗(yàn),豐富了犬細(xì)胞因子的知識(shí),對犬疾病的檢測和防控以及保障人類健康有著重要的意義,在犬疾病的防控上有著廣闊的應(yīng)用前景。第一,從藏獒犬血液中分離淋巴細(xì)胞,利用脂多糖（LPS）與植物血凝素（PHA）聯(lián)合刺激淋巴細(xì)胞后提取RNA,經(jīng)RT-PCR擴(kuò)增IFN-γ、IFN-α和IL-18基因全長片段,將擴(kuò)增到的基因分別... 

【文章來源】：甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)甘肅省

【文章頁數(shù)】：96 頁

【學(xué)位級別】：博士

【文章目錄】：
摘要
SUMMARY
縮略語表
第一章 犬干擾素研究進(jìn)展
    1 IFN概述
        1.1 IFN分類
        1.2 犬IFN理化特性及基因組成
        1.3 IFN的空間結(jié)構(gòu)及受體研究
        1.4 IFN生物學(xué)活性及作用機(jī)制
    2 犬IFN基因工程研究
        2.1 犬Ⅰ型IFN基因工程研究
        2.2 犬Ⅱ型IFN基因工程研究
        2.3 犬Ⅲ型IFN基因工程研究
        2.4 犬長效IFN研究
    3 犬IFN臨床應(yīng)用
        3.1 治療犬病毒性傳染病
        3.2 治療犬皮膚性疾病
        3.3 治療眼科及其他疾病
    4 犬IFN應(yīng)用展望
第二章 白細(xì)胞介素18研究進(jìn)展
    1 IL-18概述
        1.1 IL-18的發(fā)現(xiàn)、結(jié)構(gòu)、特性
        1.2 IL-18受體及信號(hào)傳導(dǎo)途徑
        1.3 IL-18結(jié)合蛋白
    2 IL-18生物學(xué)作用
        2.1 IL-18抗腫瘤作用
        2.2 IL-18抗感染作用
        2.3 IL-18免疫調(diào)節(jié)作用
    3 IL-18與臨床疾病的關(guān)系
        3.1 IL-18與自身免疫性疾病
        3.2 IL-18與心血管系統(tǒng)疾病的關(guān)系
        3.3 IL-18與神經(jīng)系統(tǒng)疾病的關(guān)系
        3.4 IL-18與腫瘤疾病的關(guān)系
        3.5 IL-18與糖尿病等其他疾病的關(guān)系
    4 IL-18應(yīng)用展望
    5 本研究的目的及意義
第三章 藏獒犬IFN-γ和 IFN-α基因克隆與序列分析
    1 材料與方法
        1.1 材料
        1.2 方法
    2 試驗(yàn)結(jié)果
        2.1 淋巴細(xì)胞的體外刺激活化
        2.2 RT-PCR擴(kuò)增藏獒犬IFN-γcDNA
        2.3 重組質(zhì)粒的酶切及PCR鑒定
        2.4 藏獒犬IFN-γ序列測定及分析
        2.5 藏獒犬IFN-α序列測定及分析
    3 討論
第四章 藏獒犬IFN-γ和 IFN-α基因的表達(dá)、純化及活性鑒定
    1 材料與方法
        1.1 材料
        1.2 方法
    2 試驗(yàn)結(jié)果
        2.1 藏獒犬pET-30a-IFN-γ和 pET-30a-IFN-α重組表達(dá)質(zhì)粒的鑒定
        2.2 藏獒犬pET-30a-IFN-γ和 pET-30a-IFN-α重組蛋白Western bloting分析
        2.3 藏獒犬pET-30a-IFN-γ和 pET-30a-IFN-α重組蛋白純化分析
        2.4 藏獒犬IFN-γ抗病毒活性檢測
        2.5 藏獒犬IFN-α抗病毒活性檢測
        2.6 藏獒犬IFN-α抗病毒臨床應(yīng)用
    3 討論
第五章 藏獒犬IL-18基因克隆、表達(dá)及生物學(xué)活性鑒定
    1 材料與方法
        1.1 材料
        1.2 方法
    2 試驗(yàn)結(jié)果
        2.1 藏獒犬IL-18基因的克隆
        2.2 藏獒犬IL-18基因序列測定及分析
        2.3 藏獒犬IL-18基因比較分析及進(jìn)化分析
        2.4 pET-30a-IL-18 重組質(zhì)粒的鑒定
        2.5 pET-30a-IL-18 重組蛋白表達(dá)及Western bloting分析
        2.6 pET-30a-IL-18 重組蛋白純化結(jié)果
        2.7 藏獒犬IL-18基因生物學(xué)活性鑒定
    3 討論
全文結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝
作者簡介
攻讀博士學(xué)位期間發(fā)表論文
導(dǎo)師簡介1
導(dǎo)師簡介2


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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[5]白細(xì)胞介素-18及相關(guān)標(biāo)志物在深靜脈血栓形成中的表達(dá)變化與作用機(jī)理研究[D]. 李光第.昆明醫(yī)科大學(xué) 2015
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[6]白細(xì)胞介素-18影響咪喹莫特誘導(dǎo)的銀屑病小鼠模型皮膚炎癥的研究[D]. 牛雪麗.中國醫(yī)科大學(xué) 2019
[7]IL-2、IL-18、TNF-α與神經(jīng)型布氏桿菌病的相關(guān)性研究[D]. 王虹富.內(nèi)蒙古醫(yī)科大學(xué) 2019
[8]IL-18在主動(dòng)脈夾層患者組織和血漿中的表達(dá)及臨床意義[D]. 胡�，�.河北工程大學(xué) 2019
[9]血漿IL-18在血管性認(rèn)知障礙患者中的表達(dá)及意義[D]. 王景峰.南京醫(yī)科大學(xué) 2018
[10]白介素-18參與小鼠腦卒中后抑郁樣行為的機(jī)制研究[D]. 趙辰宇.蘇州大學(xué) 2018



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