隨著集約化養(yǎng)殖與全球變暖趨勢(shì)的日益加劇,熱應(yīng)激已成為影響畜禽養(yǎng)殖業(yè)發(fā)展的重大因素之一。熱應(yīng)激會(huì)引起機(jī)體各組織、器官的損傷,嚴(yán)重時(shí)會(huì)引發(fā)猝死。研究發(fā)現(xiàn)熱應(yīng)激猝死與心肌損傷密切相關(guān),心肌對(duì)熱敏感,當(dāng)機(jī)體遭受熱應(yīng)激刺激時(shí),心臟成為遭受損傷的重要器官之一。因此,探究熱應(yīng)激導(dǎo)致心肌損傷的機(jī)制,以及尋找有效的方法保護(hù)心肌細(xì)胞免受熱應(yīng)激的損傷已成為科研工作者探索的熱點(diǎn)。熱休克蛋白（heat shock protein,Hsp）是機(jī)體在受到各種應(yīng)激因素刺激時(shí)在細(xì)胞內(nèi)誘導(dǎo)合成或合成增加的一組高度保守的保護(hù)性蛋白質(zhì),可以幫助肽鏈的正確折疊、組裝、移位、復(fù)性和降解。除此以外,Hsp還參與細(xì)胞凋亡、細(xì)胞周期和免疫信號(hào)通路,是機(jī)體重要的內(nèi)源性保護(hù)機(jī)制。本文以H9C2心肌細(xì)胞熱應(yīng)激作為研究模型,探討了熱應(yīng)激及恢復(fù)條件下H9C2心肌細(xì)胞的應(yīng)激性病理損傷及其Hsps的動(dòng)態(tài)變化規(guī)律,以小分子αB-crystallin蛋白為重點(diǎn),探究其過表達(dá)提高H9C2心肌細(xì)胞耐熱性的分子機(jī)制。在此基礎(chǔ)上,我們還探究了熱休克因子1（Heatshockfactor 1,HSF1）在熱應(yīng)激及恢復(fù)條件下調(diào)控Hsps表達(dá)的分子機(jī)制。另外,我們還... 

【文章來源】：南京農(nóng)業(yè)大學(xué)江蘇省 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：171 頁

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【部分圖文】：

圖１－５維生素Ｃ的結(jié)構(gòu)式口８〇１??

?Ｑ?Ｒｃｃｏ？ｃｒ＞??＇ｉｉＪｉｉ?＇ｏｉｌ??０?０．Ｓ?２?Ｓ?０?ＯＳ?３?Ｂ??ｌｌｒＭ?ｔｉａｗ?ＨｖＭ?ｔｌｒｒ＊＊?ｌｉａｔｒ?（ｈ）??１．５－ｔ??＊?￣?ＳＯＩ?Ｈｅ？?ｍ?ｊｒ?ＣＳ３?Ｍｐｍ??，。—ｒｔｉｉ誠Ｉ圖…—、，「自義Ｉ’??．ｉｌｌ?ｌｌ?ＩＩＩＩ?＇．Ｉｎ?ｉｌ?Ｊ?ｉｆ??０?０．５?２?Ｓ?０?？？?２?３??ｌｌｒ？ｌ?％ｔｍ％?Ｉｔｍｒ?（ｋ）?ｌｌ？Ｍ?？ｉｒｒ＊％?ｉｌｍｒ?（ｂ）??圖２－３熱應(yīng)激及恢ｆｔ條件下Ｈ９Ｃ２細(xì)胞中ｌｉｓｐｓ表達(dá)水平的動(dòng)態(tài)變化??ａ：?Ｗｅｓｔｅｒｎ?ｂｌｏｔ檢測(cè)結(jié)果；ｂ：統(tǒng)計(jì)學(xué)分析結(jié)果。＊和＊＊分別表示與對(duì)照組（ｈｅａｔ?０?ｈ）相比在０．０５??和０．０１水平差異顯著＂和＃＃分別表示與單純熱應(yīng)激組相比，恢復(fù)組在０．０５和０．０１水平差異顯著。??Ｆｉｇ?２－３?Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ?ｏｆ?Ｈｓｐｓ?ｉｎ?ＨＣ９２?ｆｏｌｌｏｗｉｎｇ?ｈｅａｔ?ｓｔｒｅｓｓ?ａｎｄ?ｒｅｃｏｖｅｒｙ??ａ：Ｗｅｓｔｅｒｎ?ｂｌｏｔ?ｒｅｓｕｌｔｓ；?ｂ：?Ａｎａｌｙｓｉｓ?ｒｅｓｕｌｔ．?＊Ｐ＜?０．０５?ａｎｄ?＊＊Ｐ＜?０．０１，?ｃｏｍｐａｒｅｄ?ｗｉｔｈ?ｔｈｅ?ｃｏｎｔｒｏｌ?ｇｒｏｕｐ?（ｈｅａｔ??０?ｈ）；?ｎＰ?＜?０．０５，?ｍｉＰ?＜?０．０１，?ｒｅｃｏｖｅｒｙ?ｇｒｏｕｐ?ｃｏｍｐａｒｅｄ?ｗｉｔｈ?ｈｅａｔ?ｇｒｏｕｐ?ｕｎｄｅｒ?ｔｈｅ?ｓａｍｅ?ｈｅａｔ?ｓｔｒｅｓｓ?ｔｉｍｅ．??５１??

Ｖｉｔａｍｉｎ?Ｃ－Ｎａ誘導(dǎo)Ｈｓｐｓ表達(dá)保護(hù)心肌抵抗熱應(yīng)激損傷的作用及機(jī)制??２（ＸＩ０?ｌ＞ｐ?－??！?０００?ｂ（）?—??７５０?ｂｐ?—ｋ?蠢？??＾００?ｂｐ?．．．？■■?５２８?ｈ＞??２５０?ｂｐ??ｍ??圖３－１?ＣＲＹＡＢ基因ＰＣＲ結(jié)果??Ｍ：?ＤＬ２０００?ＤＮＡ?Ｍａｒｋｅｒ；?１：?ＣＲＹＡＢ?基因?ＰＣＲ?產(chǎn)物??Ｆｉｇ．３－１?ＰＣＲ?ａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎ?ｏｆ?ＣＲＹＡＢ??Ｍ：?ＤＬ?２０００?ＤＮＡ?Ｍａｒｋｅｒ；?１：?ＰＣＲ?ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ?ｏｆ?ＣＲＹＡＢ??Ｍ?１??Ｈ??１００００?ｂｐ??＝；丨：：｜纖識(shí)一。??１０００?ｂｐ－…??？＊＝０＜？?ｔ‘丨，．?．．?５２８?ｂｐ??ｉｖ－??圖３－２重組Ｐｃｄｎａ３．１－ＣＲＹＡＢ雙酶切鑒定結(jié)果??Ｍ：?ＤＬ１００００?ＤＮＡ?Ｍａｒｋｅｒ；?１：?Ｎｈｅ?Ｉ?和?Ｐｍｅ?Ｉ?雙酶切產(chǎn)物??Ｆｉｇ．３－２?Ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ?ｏｆ?ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔ?Ｐｃｄｎａ３．１－ＣＲＹＡＢ?ｐｌａｓｍｉｄ?ｂｙ?ｄｏｕｂｌｅ?ｅｎｚｙｍｅｓ?ｄｉｇｅｓｔｉｏｎ??Ｍ：?ＤＬ?１００００?ＤＮＡ?Ｍａｒｋｅｒ；?１：?Ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ?ｏｆ?ｄｏｕｂｌｅ?ｅｎｚｙｍｅｓ?ｄｉｇｅｓｔｉｏｎ?ｂｙ?Ｎｈｅ?Ｉ?ａｎｄ?Ｐｍｅ?Ｉ??２．２穩(wěn)定過表達(dá)ＣＲＹＡＢ蛋白的Ｈ９Ｃ２細(xì)胞系的篩選??２．２．１?Ｚｅｏｃｉｎｅ最佳濃度的篩選結(jié)果?Ｈ９Ｃ２心肌細(xì)胞接種于６孔板，待細(xì)胞融合度??達(dá)５０％左右時(shí)，加入濃度梯度為０，１００，２００，３００，?４００ｐｇ／ｍＬ的ｚｅｏｃｉｎｅ，根據(jù)細(xì)胞??的存活情況制


本文編號(hào)：3145794