胎衣不下（RFM）是一種奶牛常見的繁殖障礙性疾病,本團隊已經(jīng)證實,miRNA與RFM的發(fā)生密切相關(guān),其中,miRNA-185表達顯著下調(diào),并在所有顯著差異表達的miRNAs中表達量最豐富,變化倍數(shù)最多。血管內(nèi)皮生長因子A（VEGFA）可以通過VEGFA信號通路調(diào)控花生四烯酸（ARA）的合成代謝,有研究顯示ARA可以有效影響產(chǎn)后奶牛胎衣外排過程,并且VEGFA已在人乳腺癌研究中被證實是miRNA-185的靶基因。這些信息提示我們,miRNA-185可能通過調(diào)控VEGFA信號通路影響RFM的發(fā)病過程。因此,本研究擬通過體內(nèi)、體外實驗明確miRNA-185對VEGFA信號通路的調(diào)控作用,闡明miRNA-185在奶牛RFM疾病發(fā)生過程中的作用機制。實驗分為以下三個部分:通過Q-PCR和WB手段檢測RFM和健康奶牛母體胎盤組織中VEGFA的表達水平,并用FISH技術(shù)檢測了VEGFA mRNA的表達位置和表達水平;建立奶牛子宮內(nèi)膜上皮（UCE）原代細胞模型,通過雙熒光素酶實驗驗證VEGFA與miRNA的靶向調(diào)節(jié)關(guān)系,并在UCE細胞中分別轉(zhuǎn)入VEGFA抑制劑、MEK抑制劑、miRNA-185mimi... 

【文章來源】：黑龍江八一農(nóng)墾大學(xué)黑龍江省

【文章頁數(shù)】：92 頁

【學(xué)位級別】：博士

【部分圖文】：

A：妊娠100d時胎兒的羊膜和尿囊；B：孕角和非孕角暴露的肉阜組織；C：妊娠100d絨毛膜打開暴露中央?yún)^(qū)域的羊膜和尿囊（圖片引自Dr.Wooding）

圖 1.2 奶牛胎盤。奶牛胎盤是由母體胎盤（肉阜組織）和胎兒胎盤（子葉）交錯形成的，胎兒滋養(yǎng)層細胞和母體上皮細胞形成一個上皮層穿過胎盤組織，滋養(yǎng)層細胞能夠遷移至母體一側(cè)形成三核細胞（圖中的陰影部分）（圖片引自 Dr. Lindert Benedictus）Fig 1.2 Bovine placentomes. Placentomes are formed through interdigitation of maternal(caruncle) and fetal (cotyledon) tissue. The apposition of fetal trophoblasts to the maternal

1.2 奶牛胎盤。奶牛胎盤是由母體胎盤（肉阜組織）和胎兒胎盤（子葉）交錯形成滋養(yǎng)層細胞和母體上皮細胞形成一個上皮層穿過胎盤組織，滋養(yǎng)層細胞能夠遷移體一側(cè)形成三核細胞（圖中的陰影部分）（圖片引自 Dr. Lindert Benedictus）Fig 1.2 Bovine placentomes. Placentomes are formed through interdigitation of matern(caruncle) and fetal (cotyledon) tissue. The apposition of fetal trophoblasts to the maternendometrium forms a continuous epithelial lining across the placenta. Binucleate cells,ecialized trophoblasts, can migrate to the maternal side and may fuse with endometrial ceforming trinucleate hybrid cells (shaded) (Courtesy of Dr. Lindert Benedictus).1.2 組織解剖學(xué)基底膜滋養(yǎng)層細胞將奶牛胎盤間隔成胎兒與母體區(qū)域，此區(qū)域主要由單核（主細核細胞構(gòu)成（見圖 1.2 和 1.3）[29-31]。

【參考文獻】：
期刊論文
[1]VEGF在COPD發(fā)病機制中的研究進展[J]. 牛歡,丁毅鵬.  海南醫(yī)學(xué). 2015(08)
[2]miRNA分析研究進展[J]. 李都悅,黃伊子,劉偉,周瑋.  湖南農(nóng)業(yè)科學(xué). 2014(16)
[3]高通量測序技術(shù)在動物MicroRNA研究中的應(yīng)用[J]. 柏亞鐸,尹羿,汪琳,李勐偉,蒲靜.  檢驗檢疫學(xué)刊. 2014(02)
[4]MicroRNAs研究方法與技術(shù)[J]. 丁偉超,王瑩.  生物學(xué)雜志. 2012(03)
[5]奶牛胎衣不下的危害及防治措施[J]. 管素英.  養(yǎng)殖技術(shù)顧問. 2012(02)
[6]奶牛胎衣不下與胎兒胎盤中iNOS、eNOS及MMP-2表達的相關(guān)性[J]. 付世新,張麗,齊長學(xué),羅春海,李鵬,夏成.  中國生物制品學(xué)雜志. 2010(08)
[7]利用雙螢光素酶報告基因系統(tǒng)篩選有效的siRNA[J]. 單志新,林秋雄,譚虹虹,鄧春玉,劉曉穎,肖定璋,余細勇.  南方醫(yī)科大學(xué)學(xué)報. 2009(08)
[8]奶牛胎衣不下發(fā)病機理研究進展[J]. 周幫會,王鳳霞.  動物醫(yī)學(xué)進展. 2008(06)
[9]肝癌的VEGF及其受體的研究進展[J]. 秦將均,柯麗琴,涂蓉.  中國熱帶醫(yī)學(xué). 2008(06)
[10]奶牛胎衣不下的研究進展[J]. 王曉麗,夏興霞,諸玉梅,戴鼎震.  中獸醫(yī)學(xué)雜志. 2007(04)

碩士論文
[1]胎衣不下奶牛母體胎盤組織差異表達microRNA的篩選及驗證[D]. 鄭程遠.黑龍江八一農(nóng)墾大學(xué) 2015
[2]胎衣不下奶牛胎盤組織差異表達蛋白的篩選與鑒定[D]. 聶甜甜.黑龍江八一農(nóng)墾大學(xué) 2014



本文編號：3089620