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催乳湯對(duì)產(chǎn)后缺乳模型大鼠的治療作用及其機(jī)制研究

發(fā)布時(shí)間:2017-04-11 15:08

  本文關(guān)鍵詞:催乳湯對(duì)產(chǎn)后缺乳模型大鼠的治療作用及其機(jī)制研究,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。


【摘要】:為了研制對(duì)臨床母豬產(chǎn)后缺乳綜合征具有良好預(yù)防和治療效果的中藥催乳方劑,本試驗(yàn)研究首先在溴隱亭致產(chǎn)后缺乳大鼠模型的基礎(chǔ)上,以母鼠每小時(shí)泌乳量、仔鼠每窩總增重等作為指標(biāo)篩選出了催乳效果顯著的中藥新方劑催乳湯,并對(duì)催乳湯的劑-效關(guān)系進(jìn)行研究確定了最佳治療劑量;然后利用ELISA方法、HE染色法、免疫組織化學(xué)染色法、Western Blot方法和熒光定量PCR法等研究方法,通過治療母鼠體內(nèi)的血清催乳素濃度變化、乳腺結(jié)構(gòu)變化、催乳素和催乳素受體在治療母鼠乳腺中的分布及蛋白量變化、乳汁主要成分合成的關(guān)鍵蛋白和jak2-stat5信號(hào)通路、PI3K/Akt/mTOR信號(hào)通路的主要細(xì)胞因子在治療母鼠乳腺中的表達(dá)變化等方面,對(duì)催乳湯對(duì)溴隱亭致產(chǎn)后缺乳大鼠模型的治療作用及其作用機(jī)理進(jìn)行了研究,相關(guān)試驗(yàn)結(jié)果如下: (1)溴隱亭致大鼠產(chǎn)后缺乳模型的最適造模劑量為1.6mg/kg,對(duì)溴隱亭致產(chǎn)后缺乳模型大鼠治療效果最好的催乳湯組成為:黃芪25g,黨參15g,當(dāng)歸10g,熟地20g,白術(shù)10g,漏蘆10g,通草5g,甘草5g,其最適治療劑量為1000mg/kgo (2)治療組母鼠的血清和乳腺組織催乳素濃度、乳腺指數(shù)均比模型組顯著的升高,和空白對(duì)照組沒有顯著差異;乳腺外觀和組織結(jié)構(gòu)從相比模型組的退化狀態(tài)恢復(fù)到近似正常狀態(tài)。 (3)治療組母鼠乳腺中催乳素受體蛋白含量和基因表達(dá)均顯著高于模型組,和空白對(duì)照組沒有顯著差異;治療組母鼠乳腺小葉間結(jié)締組織中催乳素和催乳素受體的分布與模型組和空白對(duì)照組相比均無明顯變化,乳腺分泌小葉中治療組催乳素的分布低于模型組但高于空白對(duì)照組,治療組催乳素受體的分布高于模型組,與空白對(duì)照組無明顯變化。 (4)治療組母鼠乳腺中的β-酪蛋白、α-乳清蛋白、FAS、ACC、SCD的表達(dá)比模型組顯著升高,β-半乳糖基轉(zhuǎn)移酶基因表達(dá)比模型組顯著降低,除β-酪蛋白基因表達(dá)顯著低于空白對(duì)照組外,SCD基因表達(dá)顯著高于空白對(duì)照組,α-乳清蛋白、FAS、ACC、β-半乳糖基轉(zhuǎn)移酶的基因表達(dá)與空白對(duì)照組無顯著差異。 (5)jak2-stat5信號(hào)通路中,治療組母鼠乳腺jak2基因表達(dá)比模型組顯著降低,Stat5、CyclinDI、CIS的基因表達(dá)均比模型組顯著升高,其中CIS基因表達(dá)還顯著高于空白對(duì)照組,jak2、Stat5、 CyclinDl基因表達(dá)與空白對(duì)照組無顯著差異:PI3K/Akt/mTOR信號(hào)通路中除AKT1基因表達(dá)比模型組顯著升高并與空白對(duì)照組無差異外,PI3K、mTOR基因表達(dá)均與模型組和空白對(duì)照組無顯著差異,PTEN基因表達(dá)和模型組無差異且顯著低于空白對(duì)照組。 上述結(jié)果說明催乳湯可以顯著提高產(chǎn)后缺乳模型大鼠的血清催乳素濃度,使退化乳腺恢復(fù)到接近正常狀態(tài),顯著提高乳腺中的催乳素及受體的分布和蛋白含量,并顯著提高乳蛋白、乳糖和乳脂合成相關(guān)基因的表達(dá);催乳湯在乳腺內(nèi)主要通過jak2-stat5信號(hào)通路發(fā)揮治療作用,與PI3K/Akt/mTOR信號(hào)通路無明顯關(guān)系,僅與Akt有明顯相關(guān)。
【關(guān)鍵詞】:產(chǎn)后缺乳 溴隱亭 催乳湯 乳腺
【學(xué)位授予單位】:中國農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:博士
【學(xué)位授予年份】:2015
【分類號(hào)】:S853.7
【目錄】:
  • 摘要4-5
  • Abstract5-7
  • ~.略詞表7-13
  • 第一章 引言13-24
  • 1 母豬產(chǎn)后缺乳的發(fā)病原因13-15
  • 1.1 母豬因素13-14
  • 1.2 飼養(yǎng)管理不當(dāng)14
  • 1.3 飼料質(zhì)量不佳14
  • 1.4 疾病原因14-15
  • 1.5 應(yīng)激性因素15
  • 1.6 氣候環(huán)境因素15
  • 2 母豬產(chǎn)后缺乳的發(fā)病機(jī)理15-16
  • 2.1 催乳素分泌不足15-16
  • 2.2 催乳素作用抑制16
  • 2.3 催產(chǎn)素障礙16
  • 3 母豬產(chǎn)后缺乳的解決方法16-19
  • 3.1 代乳母豬法17
  • 3.2 藥物治療17-19
  • 4 催乳素、催乳素受體及其介導(dǎo)的乳腺泌乳相關(guān)信號(hào)通路研究進(jìn)展19-23
  • 4.1 催乳素的生物學(xué)作用19-20
  • 4.2 催乳素受體20-21
  • 4.3 催乳素受體激活后啟動(dòng)的下游信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)21-23
  • 5 本研究的目的和意義23-24
  • 第二章 產(chǎn)后缺乳大鼠模型的制備24-31
  • 1 引言24
  • 2 材料與方法24-27
  • 2.1 試驗(yàn)材料24-25
  • 2.2 試驗(yàn)方法25-27
  • 3 試驗(yàn)結(jié)果27-28
  • 3.1 母鼠每小時(shí)泌乳量比較27
  • 3.2 仔鼠每窩總增重比較27-28
  • 4 討論28-30
  • 5 小結(jié)30-31
  • 第三章 治療產(chǎn)后缺乳的中藥方劑篩選31-38
  • 1 引言31
  • 2 材料與方法31-33
  • 2.1 試驗(yàn)材料31-32
  • 2.2 試驗(yàn)方法32-33
  • 3 試驗(yàn)結(jié)果33-35
  • 3.1 母鼠每小時(shí)泌乳量比較33-34
  • 3.2 仔鼠每窩總增重比較34-35
  • 4 討論35-37
  • 4.1 各方劑組方比較35-36
  • 4.2 各方劑治療效果比較36-37
  • 5 小結(jié)37-38
  • 第四章 不同劑量催乳湯對(duì)產(chǎn)后缺乳大鼠的治療效果38-45
  • 1 引言38
  • 2 材料與方法38-40
  • 2.1 試驗(yàn)材料38
  • 2.2 試驗(yàn)方法38-40
  • 3 試驗(yàn)結(jié)果40-42
  • 3.1 母鼠每小時(shí)泌乳量40-41
  • 3.2 仔鼠的總凈增重41-42
  • 4 討論42-43
  • 4.1 催乳湯與催奶靈散的比較分析42
  • 4.2 不同劑量催乳湯的效果比較42-43
  • 5 小結(jié)43-45
  • 第五章 催乳湯對(duì)產(chǎn)后缺乳大鼠PRL濃度及乳腺的影響45-58
  • 1 引言45
  • 2 材料與方法45-52
  • 2.1 試驗(yàn)材料45-47
  • 2.2 試驗(yàn)方法47-52
  • 3 試驗(yàn)結(jié)果52-55
  • 3.1 催乳素濃度標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制52
  • 3.2 母鼠血清和乳腺中催乳素含量比較52-53
  • 3.3 乳腺外觀比較53-54
  • 3.4 乳腺指數(shù)比較54-55
  • 3.5 母鼠乳腺結(jié)構(gòu)比較55
  • 4 討論55-57
  • 4.1 催乳湯提高催乳素濃度的作用55-56
  • 4.2 催乳湯對(duì)乳腺的作用56-57
  • 5 小結(jié)57-58
  • 第六章 催乳湯對(duì)產(chǎn)后缺乳大鼠乳腺中催乳素及其受體分布的影響58-67
  • 1 引言58
  • 2 材料與方法58-61
  • 2.1 試驗(yàn)材料58-59
  • 2.2 試驗(yàn)方法59-61
  • 3 試驗(yàn)結(jié)果61-64
  • 3.1 產(chǎn)后缺乳大鼠乳腺中催乳素分布比較61-63
  • 3.2 產(chǎn)后缺乳大鼠乳腺中催乳素受體分布比較63-64
  • 4 討論64-66
  • 4.1 乳腺中催乳素的分布64-65
  • 4.2 乳腺中的催乳素受體的分布65-66
  • 5 小結(jié)66-67
  • 第七章 催乳湯對(duì)產(chǎn)后缺乳大鼠乳腺中PRLR表達(dá)的影響67-78
  • 1 引言67
  • 2 材料與方法67-73
  • 2.1 試驗(yàn)材料67-70
  • 2.2 試驗(yàn)方法70-73
  • 3 試驗(yàn)結(jié)果及分析73-75
  • 3.1 RNA鑒定結(jié)果73
  • 3.2 熒光PCR產(chǎn)物溶解曲線分析73
  • 3.3 PRLR基因表達(dá)圖73-74
  • 3.4 PRLR蛋白表達(dá)結(jié)果74-75
  • 4 討論75-77
  • 5 小結(jié)77-78
  • 第八章 催乳湯對(duì)產(chǎn)后缺乳大鼠乳腺中乳成分相關(guān)基因表達(dá)的影響78-84
  • 1 引言78
  • 2 材料與方法78-80
  • 2.1 試驗(yàn)材料78-79
  • 2.2 試驗(yàn)方法79-80
  • 3 試驗(yàn)結(jié)果及分析80-82
  • 3.1 催乳湯對(duì)產(chǎn)后缺乳大鼠乳腺中乳蛋白基因表達(dá)的影響80
  • 3.2 催乳湯對(duì)產(chǎn)后缺乳大鼠乳腺中乳糖相關(guān)基因表達(dá)的影響80-81
  • 3.3 催乳湯對(duì)產(chǎn)后缺乳大鼠乳腺中乳脂相關(guān)基因表達(dá)的影響81-82
  • 4 討論82-83
  • 5 小結(jié)83-84
  • 第九章 催乳湯對(duì)產(chǎn)后缺乳大鼠乳腺中JAK2-STAT5途徑和PI3K/AKT/mTOR途徑信號(hào)通路的影響84-91
  • 1 引言84
  • 2 材料與方法84-86
  • 2.1 試驗(yàn)材料84-85
  • 2.2 試驗(yàn)方法85-86
  • 3 試驗(yàn)結(jié)果及分析86-88
  • 3.1 jak2-stat5途徑相關(guān)基因表達(dá)結(jié)果86-87
  • 3.2 PI3K/Akt/mTOR途徑相關(guān)基因表達(dá)結(jié)果87-88
  • 4 討論88-90
  • 5 小結(jié)90-91
  • 第十章 結(jié)論與創(chuàng)新點(diǎn)91-92
  • 1. 本試驗(yàn)研究主要結(jié)論91
  • 2. 本試驗(yàn)研究創(chuàng)新點(diǎn)91
  • 3. 有待于解決的問題91-92
  • 參考文獻(xiàn)92-101
  • 致謝101-103
  • 作者簡介103

【參考文獻(xiàn)】

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  本文關(guān)鍵詞:催乳湯對(duì)產(chǎn)后缺乳模型大鼠的治療作用及其機(jī)制研究,,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。



本文編號(hào):299341

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