【摘要】：橘小實(shí)蠅(Bactrocera dorsalis)是一種危害數(shù)百種果蔬的重要農(nóng)業(yè)害蟲,每年在中國乃至亞洲造成重大經(jīng)濟(jì)損失。RNAi是一種在真核生物中由ds RNA誘發(fā)的m RNA特異性降解的機(jī)制,由于其高效簡便等特點(diǎn),廣泛應(yīng)用于基因組學(xué),醫(yī)學(xué)以及農(nóng)業(yè)等方面的研究。雖然RNAi在真核生物中高度保守并且在農(nóng)業(yè)害蟲的研究中取得了長足發(fā)展,但將其應(yīng)用于實(shí)踐生產(chǎn)還存在許多問題待解決,例如在雙翅目果蠅中喂食法不能誘導(dǎo)RNAi效應(yīng)以及在橘小實(shí)蠅中存在對RNAi免疫耐受的現(xiàn)象。本研究探索了橘小實(shí)蠅對RNAi免疫耐受的分子調(diào)控機(jī)制,揭示了橘小實(shí)蠅中脂肪酸的生物合成與代謝通路在其對RNAi的免疫耐受反應(yīng)中起重要作用。并且證明了脂肪酸延伸酶對橘小實(shí)蠅的體液免疫通路也具有重要的調(diào)控作用。1.已免疫橘小實(shí)蠅血淋巴能誘導(dǎo)未經(jīng)處理的橘小實(shí)蠅對RNAi的免疫耐受反應(yīng)。喂食橘小實(shí)蠅ds-rpl19,并確定成功誘導(dǎo)了RNAi免疫耐受反應(yīng)后,提取血淋巴注射并注射進(jìn)未處理的橘小實(shí)蠅中。在注射已免疫組血淋巴后喂食ds-rpl19的橘小實(shí)蠅中,目的基因未出現(xiàn)下調(diào)。而注射對照組血淋巴后再喂食ds RNA的橘小實(shí)蠅中則出現(xiàn)了顯著的RNAi效應(yīng),靶標(biāo)基因的表達(dá)量減少了51%。同時(shí),將血淋巴在25°C下分別處理1 d、2 d、3 d或?qū)⒀馨鸵航?jīng)-20°C低溫處理后注射,均不會影響其對RNAi免疫耐受的誘導(dǎo)能力。而經(jīng)100°C高溫處理10 min后,血淋巴液喪失誘導(dǎo)RNAi免疫耐受反應(yīng)。注射經(jīng)高溫處理后的血淋巴液再喂食ds RNA,目的基因的表達(dá)量出現(xiàn)了48%的下調(diào)。這些結(jié)果表明已對RNAi免疫耐受的橘小實(shí)蠅血淋巴中存在可能的 誘導(dǎo)因子‖調(diào)控橘小實(shí)蠅的RNAi免疫耐受反應(yīng),并且該 誘導(dǎo)因子‖具有熱不穩(wěn)定性而在室溫下能較長時(shí)間保持誘導(dǎo)能力。2.通過比較免疫組和對照組橘小實(shí)蠅血淋巴中各種化學(xué)組分的含量,發(fā)現(xiàn)免疫組橘小實(shí)蠅血淋巴中亞油酸:花生四烯酸的比例上升。通過免疫組和[兆殫儺∈滌馨痛蛔檠Х治，

本文編號：2155913