本文選題：淀粉 + 育肥豬��； 參考：《南京農(nóng)業(yè)大學(xué)》2016年博士論文

【摘要】：通過營(yíng)養(yǎng)途徑可有效調(diào)控豬肉品質(zhì)。有研究表明不同日糧淀粉水平和淀粉類型可以調(diào)節(jié)動(dòng)物屠宰時(shí)肌肉能量存儲(chǔ)狀態(tài)或肌纖維類型,通過影響宰后肌肉能量代謝進(jìn)而影響肉品質(zhì)。本研究通過調(diào)整日糧淀粉水平與類型,探討不同日糧淀粉水平或不同直鏈淀粉、支鏈淀粉含量對(duì)育肥豬生長(zhǎng)性能、胴體品質(zhì)、肉品質(zhì)、宰后肌肉能量代謝及肌纖維類型的影響。在此基礎(chǔ)上進(jìn)一步探討磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B-缺氧誘導(dǎo)因子-1α (PI3K/AKT-HIF-1α)信號(hào)通路在糖酵解過程中的作用,以及microRNAs(miRNAs)在骨骼肌肌纖維類型轉(zhuǎn)化過程中的作用,揭示不同日糧淀粉水平與類型影響育肥豬肉品質(zhì)的作用機(jī)理。1.日糧淀粉水平對(duì)育肥豬生長(zhǎng)和肉品質(zhì)的影響及其作用機(jī)制研究將72頭初始體重為65.0±2.0kg的杜×長(zhǎng)×大三元雜交去勢(shì)公豬,隨機(jī)分配A、B、C三種等能等氮日糧中,每種日糧處理3個(gè)重復(fù),每個(gè)重復(fù)8頭豬。三種日糧配方的營(yíng)養(yǎng)成分均滿足NRC (2012)育肥豬營(yíng)養(yǎng)需求。其中,將淀粉水平為44.1%的傳統(tǒng)育肥豬日糧(日糧A)作為對(duì)照組日糧,日糧B或C的淀粉水平是在日糧A淀粉水平的基礎(chǔ)上減少約15%或30%,分別為37.6%和30.9%。為了調(diào)配等能等氮日糧,日糧B或C中的粗脂肪和中性洗滌纖維(NDF)水平隨著日糧淀粉水平的變化做相應(yīng)調(diào)整。日糧A含有44.1%的淀粉,5.9%的粗脂肪和12.6%的NDF;日糧B含有37.6%的淀粉,9.5%的粗脂肪和15.4%的NDF;日糧C含有30.9%的淀粉,14.3%的粗脂肪17.8%的NDF。飼養(yǎng)28天后,禁飼12 h,每個(gè)重復(fù)抽取體重接近于平均體重的2-3頭豬(8頭/處理),稱量每頭豬的宰前活重后運(yùn)至附近屠宰場(chǎng)按照常規(guī)屠宰流程進(jìn)行屠宰采樣。結(jié)果顯示:(1)日糧淀粉水平對(duì)育肥豬生長(zhǎng)性能、胴體性狀、肉品質(zhì)及肌纖維類型的影響與日糧A相比,育肥豬采食日糧C具有較低的平均日采食量(ADFI)、平均日增重(ADG)和背膘厚(P0.05),然而不同日糧處理對(duì)育肥豬的料重比、宰前活重、 、胴體重和屠宰率無顯著影響(P 0.05)。與日糧A相比,日糧B和日糧C顯著提高了背最長(zhǎng)肌pH45min值(P0.05),此外,日糧C與日糧A相比,顯著降低了背最長(zhǎng)肌滴水損失(P0.05),而不同日糧處理對(duì)背最長(zhǎng)肌pH24h值、肉色(L*, a*, b*)、蒸煮損失、剪切力值及質(zhì)構(gòu)特性均無顯著影響(P0.05)。與日糧A相比,日糧C顯著提高了背最長(zhǎng)肌肌球蛋白重鏈(MyHC) -Ⅰ和MyHC-Ⅱa的mRNA表達(dá)量(P 0.05),并顯著降低了背最長(zhǎng)肌MyHC-Ⅱx和MyHC-Ⅱb的mRNA表達(dá)量(P0.05)。與日糧A相比,采食日糧C的育肥豬背最長(zhǎng)肌中,miR23a的表達(dá)水平降低(P0.05),同時(shí),其靶基因過氧化物酶體增殖物激活受體Y輔助因子1α (PGC-1α)的mRNA表達(dá)水平提高(P0.05),但各日糧處理組間肌細(xì)胞增強(qiáng)因子2C (MEF2C)的mRNA表達(dá)量在差異不顯著(P0.05)。與日糧處理對(duì)miR23a表達(dá)水平的影響相反,相較于日糧A,日糧C提高了背最長(zhǎng)肌中miR499和miR208b的表達(dá)水平(P0.05),降低了 miR499靶基因Y性別決定區(qū)框6 (Sox6)和miR208b靶基因特異性蛋白3 (Sp3)的mRNA表達(dá)水平(P 0.05),但對(duì)miR208b靶基因甲狀腺激素受體輔助物1 (ThraP1)的mRNA表達(dá)水平無顯著影響(P 0.05)。(2)日糧淀粉水平對(duì)育肥豬宰后肌肉能量代謝的影響與日糧A相比,日糧B和日糧C顯著提高了背最長(zhǎng)肌中ATP的含量(P 0.05),日糧C顯著降低了磷酸肌酸(PCr)的含量(P0.05),但日糧處理對(duì)背最長(zhǎng)肌中ADP、AMP及肌酸(Cr)的含量無顯著影響(P0.05)。相比于日糧A,日糧C顯著提高了背最長(zhǎng)肌中肌酸激酶(CK)的活性(P0.05),降低了宰后45 min背最長(zhǎng)肌的乳酸含量以及糖酵解潛力(GP)(P0.05),而各日糧處理組間糖原含量差異不顯著(P0.05)。與日糧A相比,日糧B顯著降低了背最長(zhǎng)肌中己糖激酶(HK)結(jié)合態(tài)酶活的比例(P0.05),日糧C顯著降低了背最長(zhǎng)肌中HK、丙酮酸激酶(PK)結(jié)合態(tài)酶活的比例(P0.05),但日糧處理對(duì)背最長(zhǎng)肌中乳酸脫氫酶(LDH)結(jié)合態(tài)酶活的比例影響不顯著(P0.05)。此外,與日糧A相比,日糧B和C均顯著降低了 AKT蛋白的磷酸化水平(P0.05)并顯著提高了 HIF-1α蛋白的羥基化水平(P0.05)。與日糧A相比,日糧B和C均顯著降低了 HK Ⅱ結(jié)合態(tài)蛋白和PKM2結(jié)合態(tài)蛋白的表達(dá)水平(P0.05),此外,日糧C與日糧A相比,顯著降低了 LDHA結(jié)合態(tài)蛋白的表達(dá)水平(P0.05),不同日糧處理對(duì)HKⅡ、PKM2和LDHA游離態(tài)蛋白的表達(dá)水平影響不顯著(P0.05)。2.日糧淀粉類型對(duì)育肥豬生長(zhǎng)和肉品質(zhì)的影響及其作用機(jī)制研究將90頭初始體重為68±2.0 kg的大×長(zhǎng)×梅山三元雜交去勢(shì)公豬,隨機(jī)分配到三種等能等氮日糧處理中,每種日糧處理5個(gè)重復(fù),每個(gè)重復(fù)6頭豬,試驗(yàn)日糧參考75-100 kg育肥豬NRC (2012)的標(biāo)準(zhǔn)配制。采用純的蠟質(zhì)玉米淀粉(WMS),非蠟質(zhì)玉米淀粉(NMS)和豌豆淀粉(PS)作為淀粉來源配合三種試驗(yàn)日糧。測(cè)得三種日糧的直鏈淀粉/支鏈淀粉比例分別為0.07、0.19和0.28。飼養(yǎng)28天后,禁飼12h,每個(gè)重復(fù)抽取體重接近于平均體重的2頭豬(10頭/處理),并稱量每頭豬的宰前活重后運(yùn)至附近屠宰場(chǎng)按照常規(guī)屠宰流程進(jìn)行屠宰采樣。結(jié)果顯示:(1)日糧淀粉類型對(duì)育肥豬生長(zhǎng)性能、肉品質(zhì)、宰后肌肉蛋白質(zhì)變化及肌纖維類型的影響與WMS日糧相比,育肥豬采食PS日糧具有較高的ADG和眼肌面積(P0.05),以及較低的料重比和背膘厚(P0.05),然而不同日糧處理對(duì)育肥豬的ADFI、宰前活重、胴體重和屠宰率無顯著影響(P0.05)。育肥豬背最長(zhǎng)肌的常規(guī)營(yíng)養(yǎng)成分包括水分、粗蛋白、粗脂肪和粗灰分在各日糧處理組間均無顯著差異(P 0.05)。相比于WMS日糧和NMS日糧,PS日糧顯著提高了背最長(zhǎng)肌pH45min值(P0.05),且顯著降低了滴水損失(P0.05)。與WMS日糧相比,PS日糧顯著降低了背最長(zhǎng)肌的蒸煮損失(P0.05)。然而,不同日糧處理對(duì)背最長(zhǎng)肌pH24h值、肉色(L*,a*,b*)、剪切力值均無顯著影響(P0.05)。相比于WMS日糧,PS日糧顯著提高了背最長(zhǎng)肌低場(chǎng)核磁共振(LF-NMR) T22峰面積比例(P0.05)且顯著降低了 T23峰面積比例(P 0.05),但日糧處理對(duì)背最長(zhǎng)肌T21峰面積比例無顯著影響(P 0.05)。與WMS日糧和NMS日糧相比,PS日糧顯著提高了宰后24 h背最長(zhǎng)肌肌漿蛋白溶解度(P0.05),但日糧處理對(duì)宰后24 h背最長(zhǎng)肌總蛋白溶解度和肌原纖維蛋白溶解度均無顯著影響(P 0.05)。日糧處理對(duì)宰后24 h背最長(zhǎng)肌肌原纖維蛋白和肌漿蛋白SDS-PAGE電泳圖的蛋白條帶均無顯著影響(P0.05)。此外,與WMS日糧相比,PS日糧顯著提高了 MyHC-Ⅰ和MyHC-Ⅱa的mRNA表達(dá)量(P 0.05),并顯著降低了 MyHC-Ⅱb的mRNA表達(dá)量(P 0.05),但MyHC-Ⅱx的mRNA表達(dá)量在各日糧處理組間差異不顯著(P0.05)。相比于WMS日糧,采食PS日糧的育肥豬背最長(zhǎng)肌中,miR23a的表達(dá)水平降低(P0.05),同時(shí)miR23a靶基因PGC-1α的mRNA表達(dá)水平提高(P0.05),但其靶基因MEF2C的mRNA表達(dá)水平在各日糧處理組間差異不顯著(P0.05)。與日糧處理對(duì)miR23a表達(dá)水平的影響相反,相比于WMS日糧,PS日糧提高了背最長(zhǎng)肌中miR499的表達(dá)水平(P0.05),降低了其靶基因Sox6的mRNA表達(dá)水平(P0.05)。然而,日糧處理對(duì)miR208b的表達(dá)水平及其靶基因Sp3和Thrap1的mRNA表達(dá)水平無顯著影響。(2)日糧淀粉類型對(duì)育肥豬宰后肌肉能量代謝的影響與WMS日糧相比,PS日糧顯著提高了背最長(zhǎng)肌CK活性及ATP的含量(P0.05),顯著降低了 PCr和AMP的含量(P 0.05),但日糧處理對(duì)Cr和ADP的含量無顯著影響(P0.05)。相比于WMS日糧,PS日糧顯著降低了背最長(zhǎng)肌糖原含量及GP (P0.05),但對(duì)乳酸含量無顯著影響(P 0.05)。相比于WMS日糧,PS日糧顯著降低了 HK結(jié)合態(tài)酶活比例(P0.05),但對(duì)LDH和PK結(jié)合態(tài)酶活比例無顯著影響(P0.05)。與WMS日糧相比,PS日糧顯著降低了 AKT蛋白的磷酸化水平(P0.05)并顯著提高了 HIF-1α蛋白的羥基化水平(P0.05)。并且,與WMS日糧相比,PS日糧顯著降低了 HKⅡ結(jié)合態(tài)蛋白的表達(dá)水平(P0.05),但對(duì)PKM2和LDHA結(jié)合態(tài)蛋白以及HKⅡ、PKM2和LDHA游離態(tài)蛋白的表達(dá)水平影響不顯著(P0.05)。綜上所述,得出如下結(jié)論:(1)在等能等氮日糧中,低淀粉、高纖維和高脂肪日糧(日糧C)降低育肥豬生產(chǎn)性能主要是由于較差的飼料適口性及快速的飽腹感導(dǎo)致飼料采食量下降引起的。低淀粉、高纖維和高脂肪日糧(日糧C)改善背最長(zhǎng)肌肉品質(zhì),則主要是通過促進(jìn)快肌纖維向慢肌纖維的轉(zhuǎn)化以及降低宰后早期糖酵解速率來實(shí)現(xiàn)的。骨骼肌快肌纖維向慢肌纖維的轉(zhuǎn)化可能與促進(jìn)慢肌向快肌纖維轉(zhuǎn)化的miR23a表達(dá)水平的下調(diào)及促進(jìn)快肌纖維向慢肌纖維轉(zhuǎn)化的miR499和miR208b表達(dá)水平的上調(diào)有關(guān)。此外,宰后早期糖酵解速率的下降可能有兩方面的原因:一是宰后早期PCr的充分降解提供了更多的ATP進(jìn)而延緩宰后早期糖酵解的發(fā)生;二是PI3K/AKT-HIF-1α通路受到抑制,使具有高催化活性的糖酵解酶結(jié)合態(tài)比例下降。(2)在等能等氮日糧中,高直鏈淀粉日糧(豌豆組)提高了育肥豬的生產(chǎn)性能和胴體品質(zhì),主要是由于高直鏈淀粉日糧食后緩慢而延長(zhǎng)的葡萄糖和胰島素釋放速率有助于肌肉蛋白沉積。高直鏈淀粉日糧(豌豆組)改善背最長(zhǎng)肌肉品質(zhì),主要是通過促進(jìn)快肌纖維向慢肌纖維的轉(zhuǎn)化,影響宰后肌肉能量代謝進(jìn)而改善宰后肌肉蛋白變性并提高肌肉中不易流動(dòng)水的比例來實(shí)現(xiàn)的。骨骼肌快肌纖維向慢肌纖維的轉(zhuǎn)化可能與促進(jìn)慢肌向快肌纖維轉(zhuǎn)化的miR23a表達(dá)水平的下調(diào)及促進(jìn)快肌纖維向慢肌纖維轉(zhuǎn)化的miR499表達(dá)水平的上調(diào)有關(guān)。在宰后早期,更多的PCr降解產(chǎn)生ATP延緩了糖酵解的發(fā)生。并且在糖酵解過程中,由于PI3K/AKT-HIF-1α通路受到抑制,糖酵解酶結(jié)合態(tài)比例下降,糖酵解速率降低。
[Abstract]:The effects of dietary starch levels on growth performance , carcass quality , meat quality , muscle energy metabolism and muscle fiber types were studied . Compared with diet A , the level of mRNA expression of MyHC - 鈪 and MyHC - 鈪 decreased significantly ( P0.05 ) . Compared with diet A , the level of mRNA expression of MyHC - 鈪 and MyHC - 鈪 increased significantly ( P0.05 ) . Compared with diet A , dietary B and C significantly decreased the expression level of creatine kinase ( CK ) in the dorsal longest muscle ( P0.05 ) . Compared with diet A , the daily ration of dietary fiber decreased significantly the expression level of creatine kinase ( CK ) in the longlongest muscle ( P0.05 ) . The daily ration of PS decreased significantly ( P0.05 ) . However , the PS diets significantly decreased the peak area ratio ( P0.05 ) . However , the ratio of peak area to peak area of T21 was significantly decreased ( P 0.05 ) . However , there was no significant effect on the ratio of peak area of T21 peak to T21 peak ( P 0.05 ) . The daily ration of PS diets increased the solubility ( P0.05 ) of the longest muscle plasma protein in 24 hours after slaughter , but there was no significant effect on the solubility of the total protein and the solubility of myofibril protein ( P 0.05 ) in 24 h after slaughter . There was no significant difference between the mRNA expression level of MyHC - 鈪，

本文編號(hào)：2008007