向日葵響應黃萎病菌侵染的轉(zhuǎn)錄組分析及抗病相關(guān)基因挖掘
本文關(guān)鍵詞:向日葵響應黃萎病菌侵染的轉(zhuǎn)錄組分析及抗病相關(guān)基因挖掘 出處:《內(nèi)蒙古大學》2017年博士論文 論文類型:學位論文
更多相關(guān)文章: 向日葵 黃萎病 RNA-Seq 轉(zhuǎn)錄組 差異表達基因 抗病相關(guān)基因 qPCR驗證
【摘要】:向日葵(Helianthus annuus L.)是一種重要的油料作物和觀賞植物,也是一種潛在的能源植物。它是關(guān)系一些國家或地區(qū)經(jīng)濟發(fā)展的重要生物資源。然而近年來,向日葵產(chǎn)業(yè)的發(fā)展卻受到黃萎病的嚴重威脅。因此,了解向日葵和黃萎病菌的互作機制,發(fā)掘與向日葵黃萎病抗性相關(guān)的重要基因及生物學通路,對向日葵抗病育種工程具有重要意義。然而,由于抗病材料和遺傳信息的匱乏,使得針對向日葵抗黃萎病分子機制的研究進展緩慢。本文分析了向日葵抗病材料S18和易感病材料P77在黃萎病菌誘導下的主要生理生化指標響應規(guī)律,并利用RNA-Seq技術(shù),對經(jīng)黃萎病菌侵染不同時間的16個向日葵樣品進行了轉(zhuǎn)錄組深度測序,并獲得了向日葵響應黃萎病侵染的大量表達基因信息,并采用生物信息學分析方法,對向日葵與黃萎病病菌的互作機制進行了深入研究。通過對轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)的比較分析,獲得大量差異表達基因(Differentially expressed genes,DEGs),通過對這些 DEGs 的 GO 信息注釋獲得和抗性相關(guān)的基因;通過KEGG富集分析和基因共表達網(wǎng)絡研究揭示向日葵響應黃萎病菌侵染的分子機制。主要結(jié)果總結(jié)如下:1、為了研究向日葵抗黃萎病的生理生化響應機制,對S18和P77在黃萎病菌侵染在8個時間點(Oh、6h、12h、24h、2d、3d、5d、10d)的生理生化指標進行了測定,結(jié)果顯示:S18在多個處理時間點上的可溶性蛋白(Soluble protein)含量、POD和SOD活性高于P77,并且S18在4個處理點上的MDA含量低于P77,說明在黃萎病侵染下,S18可通過多途徑來防御病原菌侵入并保護自身細胞免受傷害。2、對16個向日葵RNA樣本轉(zhuǎn)錄組測序并利用生物信息學方法對測序原始Reads處理后得到110571個Unigenes;利用BLAST等軟件對所有Unigenes進行功能注釋,52406個Unigenes被注釋到了 GO功能庫的55個GO條目下,46676個Unigenes被注釋到128個KEGG代謝通路中,32215個Unigenes被注釋25個COG直系同源基因數(shù)據(jù)庫中。3、在RD,SD和D數(shù)據(jù)集中,通過對品種間共表達DEGS的GO信息分析,共獲得1231個與抗病相關(guān)的DEGs;通過品種間特異DEGs的GO信息分析,在S18和P77中分別獲得759和511個與抗病相關(guān)的DEGs。許多基因與多種抗性因子相關(guān),如:過氧化物酶(POD)、谷胱甘肽過氧化物酶、水通道蛋白、幾丁質(zhì)等;進一步研究發(fā)現(xiàn)這些基因在植物和病原菌互作中起關(guān)鍵作用。4、通過KEGG分析,98個基因富集于植物信號轉(zhuǎn)導通路中;112個基因富集于植物-病原菌互作通路中;52個基因富集于類黃酮生物代謝通路中。在這些植物抗病相關(guān)KEGG通路中的許多節(jié)點因子活性與植物抗病性呈正相關(guān)關(guān)系,例如:CNGC、RBOH、MYC2、NPR1和TGA,其編碼基因在S18和P77中大多數(shù)均上調(diào)表達,它們的平均相對表達量在S18中較在P77中更高;還有一些節(jié)點因子活性與植物抗病性呈負相關(guān)關(guān)系,如:FLS2和JAZ;本研究中編碼FLS2的基因在S18和P77中均下調(diào)表達,這些基因表達水平在S18中比在P77中更低;編碼JAZ的基因在P77中均上調(diào)表達,S18中卻2個編碼JAZ的基因下調(diào)表達;研究還發(fā)現(xiàn)一些DEGs還參與了脫落酸(ABA)、乙烯(ET)、水楊酸(SA)、茉莉酸(JA)等信號轉(zhuǎn)導通路。
[Abstract]:......
【學位授予單位】:內(nèi)蒙古大學
【學位級別】:博士
【學位授予年份】:2017
【分類號】:S435.655
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,本文編號:1348821
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