目的:1.分別構(gòu)建含有小鼠生精細(xì)胞特異啟動(dòng)子Dazl、Stra8、Hspa2、Pgk2和Prm1的AAV特異表達(dá)載體,驗(yàn)證并篩選有效特異啟動(dòng)子。2.構(gòu)建小鼠生精細(xì)胞特異表達(dá)載體AAV-Dazl-RFP-Flag,并且從體內(nèi)、外驗(yàn)證其表達(dá)特異性。方法:1.篩選小鼠生精細(xì)胞特異啟動(dòng)子通過(guò)同源重組的方法分別構(gòu)建含有小鼠生精細(xì)胞特異啟動(dòng)子Dazl、Stra8、Hspa2、Pgk2和Prm1的AAV特異表達(dá)載體,分別轉(zhuǎn)染生精細(xì)胞GC1細(xì)胞,通過(guò)比較5種載體在GC1細(xì)胞中的表達(dá)情況篩選有效的小鼠生精細(xì)胞特異啟動(dòng)子。2.構(gòu)建小鼠生精細(xì)胞特異表達(dá)載體AAV-Dazl-RFP-Flag通過(guò)同源重組的方法將小鼠生精細(xì)胞特異啟動(dòng)子Dazl片段與酶切后去除CMV啟動(dòng)子的腺相關(guān)病毒載體AAV-CMV-RFP-Flag連接,并通過(guò)雙酶切和基因測(cè)序驗(yàn)證小鼠生精細(xì)胞特異表達(dá)載體AAV-Dazl-RFP-Flag的構(gòu)建。3.小鼠生精細(xì)胞特異表達(dá)載體AAV-Dazl-RFP-Flag體外驗(yàn)證將腺相關(guān)病毒載體AAV-CMV-RFP-Flag及小鼠生精細(xì)胞特異表達(dá)載體AAV-DazlRFP-Flag分別轉(zhuǎn)染GC1細(xì)胞和293T...

【文章頁(yè)數(shù)】：60 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖3AAV-Hspa2-RFP的結(jié)構(gòu)及測(cè)序結(jié)果

山西醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文12圖3AAV-Hspa2-RFP的結(jié)構(gòu)及測(cè)序結(jié)果Fig3structureofAAV-Hspa2-RFPandsequenceresult圖1AAV-Dazl-RFP的結(jié)構(gòu)及測(cè)序結(jié)果Fig1structureofAAV-Dazl-RFPandsequen....

圖4AAV-pgk2-RFP的結(jié)構(gòu)及測(cè)序結(jié)果

山西醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文12圖3AAV-Hspa2-RFP的結(jié)構(gòu)及測(cè)序結(jié)果Fig3structureofAAV-Hspa2-RFPandsequenceresult圖1AAV-Dazl-RFP的結(jié)構(gòu)及測(cè)序結(jié)果Fig1structureofAAV-Dazl-RFPandsequen....

圖1AAV-Dazl-RFP的結(jié)構(gòu)及測(cè)序結(jié)果

山西醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文12圖3AAV-Hspa2-RFP的結(jié)構(gòu)及測(cè)序結(jié)果Fig3structureofAAV-Hspa2-RFPandsequenceresult圖1AAV-Dazl-RFP的結(jié)構(gòu)及測(cè)序結(jié)果Fig1structureofAAV-Dazl-RFPandsequen....

圖2AAV-Stra8-RFP的結(jié)構(gòu)及測(cè)序結(jié)果

山西醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文12圖3AAV-Hspa2-RFP的結(jié)構(gòu)及測(cè)序結(jié)果Fig3structureofAAV-Hspa2-RFPandsequenceresult圖1AAV-Dazl-RFP的結(jié)構(gòu)及測(cè)序結(jié)果Fig1structureofAAV-Dazl-RFPandsequen....

本文編號(hào)：4032428