間歇運(yùn)動改善心梗大鼠腎臟炎癥損傷的作用機(jī)制研究
發(fā)布時間:2023-06-06 19:19
目的:探討間歇運(yùn)動改善心肌梗死(myocardial infarction,MI)大鼠腎臟炎癥損傷的作用機(jī)制。方法:3月齡雄性SD大鼠,隨機(jī)分為假手術(shù)組(Sham組),心梗組(MI組),心梗+間歇運(yùn)動組(ME組),每組12只。MI和ME組大鼠采用左冠狀動脈前降支(left anterior descending coronary artery,LAD)結(jié)扎術(shù)建立心肌梗死模型,Sham組大鼠只穿線,不結(jié)扎。ME組大鼠心梗術(shù)后1周進(jìn)行4周間歇運(yùn)動。第一周為適應(yīng)性訓(xùn)練(15 m/min,30 min/d,共d)。正式訓(xùn)練時,起始運(yùn)動速度為10 m/min,運(yùn)動時間為10 min,速度逐漸增至25 m/min,運(yùn)動7 min后,間歇3 min,其速度為15 m/min,之后依次交替進(jìn)行,運(yùn)動總時間為60 min。以上訓(xùn)練方案每周5 d,訓(xùn)練至4 wk結(jié)束。訓(xùn)練結(jié)束后次日取材,大鼠腹腔麻醉,血流動力學(xué)結(jié)合心電圖評定大鼠心功能。處死并迅速分離腎臟、血液和尿液,采用紫外分光光度法測定腎臟MDA含量、T-AOC和GSH-PX活性,微量酶標(biāo)法測定腎臟LDH活性。原代培養(yǎng)大鼠腎臟集合管細(xì)胞(inner m...
【文章頁數(shù)】:85 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
縮略詞表
第1章 文獻(xiàn)綜述與選題依據(jù)
1.1 心腎綜合征(CRS)
1.1.1 CRS的分類
1.1.2 CRS發(fā)生的病理生理機(jī)制
1.2 有氧運(yùn)動對CRS的保護(hù)效應(yīng)及機(jī)制研究
1.3 micro RNAs研究進(jìn)展
1.3.1 micro RNAs的生物學(xué)特性
1.3.2 mi RNAs與腎臟疾病
1.3.3 miR-155與細(xì)胞凋亡
1.3.4 miR-34a與氧化應(yīng)激
1.3.5 miR-145與炎癥
1.4組蛋白去乙;1
1.4.1 SIRT1的結(jié)構(gòu)及功能
1.4.2 SIRT1的作用機(jī)制
1.4.3 SIRT1與腎臟疾病
1.5 選題依據(jù)
第2章 間歇運(yùn)動調(diào)控miR-155/SIRT1/Fox O3a通路抑制心梗大鼠腎臟細(xì)胞凋亡
2.1 材料與方法
2.1.1 動物分組、心梗模型制備和運(yùn)動方案
2.1.2 主要儀器設(shè)備與試劑
2.1.3 大鼠心功能測定
2.1.4 取材與樣品處理
2.1.5 Western Blot實(shí)驗(yàn)
2.1.6 RT-q PCR實(shí)驗(yàn)
2.1.7 圖像處理與數(shù)據(jù)分析
2.2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
2.2.1 心梗大鼠心功能測定
2.2.2 腎臟及血液miR-155表達(dá)結(jié)果
2.2.3 腎臟SIRT1表達(dá)結(jié)果
2.2.4 腎臟FoxO3a表達(dá)結(jié)果
2.2.5 腎臟Bax、Bcl-2 蛋白表達(dá)結(jié)果
2.2.6 腎臟caspase-3 蛋白表達(dá)結(jié)果
2.2.7 腎臟mi R-155 表達(dá)與SIRT1、Fox O3a、細(xì)胞凋亡變化的相關(guān)性
2.3 分析與討論
2.4 本章小結(jié)
第3章 間歇運(yùn)動激活mi R-34a/SIRT1/Trx-1 通路抑制心梗大鼠腎臟氧化應(yīng)激
3.1 材料與方法
3.1.1 動物分組、心梗模型制備和運(yùn)動方案(同第二章)
3.1.2 主要儀器設(shè)備與試劑
3.1.3 取材與樣品處理(同第二章)
3.1.4 生化指標(biāo)測定
3.1.5 ELISA法
3.1.6 Western Blot實(shí)驗(yàn)
3.1.7 RT-q PCR實(shí)驗(yàn)
3.1.8 圖像采集與數(shù)據(jù)統(tǒng)計處理(同第二章)
3.2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
3.2.1 腎臟miR-34a表達(dá)結(jié)果
3.2.2 腎臟SIRT1表達(dá)結(jié)果
3.2.3 血清及腎臟Trx-1表達(dá)結(jié)果
3.2.4 腎臟NOX2和NOX4 表達(dá)結(jié)果
3.2.5 腎臟SOD1和SOD2 表達(dá)結(jié)果
3.2.6 氧化應(yīng)激測定結(jié)果
3.2.7 腎功能測定結(jié)果
3.3 分析與討論
3.3.1 間歇運(yùn)動減緩腎臟氧化應(yīng)激反應(yīng),改善腎功能
3.3.2 間歇有氧運(yùn)動激活mi R-34a/SIRT1/Trx-1 通路,減緩氧化應(yīng)激,改善腎功能
3.4 本章小結(jié)
第4章 miR-145在間歇運(yùn)動抑制心梗大鼠腎臟炎癥反應(yīng)中的作用及機(jī)制
4.1 材料與方法
4.1.1 動物分組、心梗模型制備和運(yùn)動方案(同第二章)
4.1.2 主要儀器設(shè)備與試劑
4.1.3 取材與樣品處理(同第二章)
4.1.4 細(xì)胞培養(yǎng)及干預(yù)方案
4.1.5 免疫組織和細(xì)胞化學(xué)染色
4.1.6 Western Blot實(shí)驗(yàn)
4.1.7 RT-q PCR實(shí)驗(yàn)
4.1.8 圖像處理與數(shù)據(jù)分析
4.2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
4.2.1 間歇運(yùn)動上調(diào)心梗大鼠血清和腎臟miR-145表達(dá)
4.2.2 間歇運(yùn)動降低心梗大鼠腎臟CD40表達(dá)
4.2.3 間歇運(yùn)動降低心梗大鼠腎臟炎癥因子TNF-α和 IL-6 表達(dá)
4.2.4 CD40L下調(diào)IMCDCs中 mi R-145 的表達(dá)
4.2.5 CD40L誘導(dǎo)IMCDCs中 CD40 的表達(dá)
4.2.6 mi R-145 抑制CD40L誘導(dǎo)IMCDCs中 CD40 的表達(dá)
4.2.7 mi R-145 抑制CD40L誘導(dǎo)的IMCDCs中炎癥因子TNF-α和 IL-6 的表達(dá)
4.3 分析與討論
4.4 本章小結(jié)
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
攻讀碩士學(xué)位期間承擔(dān)的科研任務(wù)與主要成果
致謝
本文編號:3832056
【文章頁數(shù)】:85 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
縮略詞表
第1章 文獻(xiàn)綜述與選題依據(jù)
1.1 心腎綜合征(CRS)
1.1.1 CRS的分類
1.1.2 CRS發(fā)生的病理生理機(jī)制
1.2 有氧運(yùn)動對CRS的保護(hù)效應(yīng)及機(jī)制研究
1.3 micro RNAs研究進(jìn)展
1.3.1 micro RNAs的生物學(xué)特性
1.3.2 mi RNAs與腎臟疾病
1.3.3 miR-155與細(xì)胞凋亡
1.3.4 miR-34a與氧化應(yīng)激
1.3.5 miR-145與炎癥
1.4組蛋白去乙;1
1.4.1 SIRT1的結(jié)構(gòu)及功能
1.4.2 SIRT1的作用機(jī)制
1.4.3 SIRT1與腎臟疾病
1.5 選題依據(jù)
第2章 間歇運(yùn)動調(diào)控miR-155/SIRT1/Fox O3a通路抑制心梗大鼠腎臟細(xì)胞凋亡
2.1 材料與方法
2.1.1 動物分組、心梗模型制備和運(yùn)動方案
2.1.2 主要儀器設(shè)備與試劑
2.1.3 大鼠心功能測定
2.1.4 取材與樣品處理
2.1.5 Western Blot實(shí)驗(yàn)
2.1.6 RT-q PCR實(shí)驗(yàn)
2.1.7 圖像處理與數(shù)據(jù)分析
2.2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
2.2.1 心梗大鼠心功能測定
2.2.2 腎臟及血液miR-155表達(dá)結(jié)果
2.2.3 腎臟SIRT1表達(dá)結(jié)果
2.2.4 腎臟FoxO3a表達(dá)結(jié)果
2.2.5 腎臟Bax、Bcl-2 蛋白表達(dá)結(jié)果
2.2.6 腎臟caspase-3 蛋白表達(dá)結(jié)果
2.2.7 腎臟mi R-155 表達(dá)與SIRT1、Fox O3a、細(xì)胞凋亡變化的相關(guān)性
2.3 分析與討論
2.4 本章小結(jié)
第3章 間歇運(yùn)動激活mi R-34a/SIRT1/Trx-1 通路抑制心梗大鼠腎臟氧化應(yīng)激
3.1 材料與方法
3.1.1 動物分組、心梗模型制備和運(yùn)動方案(同第二章)
3.1.2 主要儀器設(shè)備與試劑
3.1.3 取材與樣品處理(同第二章)
3.1.4 生化指標(biāo)測定
3.1.5 ELISA法
3.1.6 Western Blot實(shí)驗(yàn)
3.1.7 RT-q PCR實(shí)驗(yàn)
3.1.8 圖像采集與數(shù)據(jù)統(tǒng)計處理(同第二章)
3.2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
3.2.1 腎臟miR-34a表達(dá)結(jié)果
3.2.2 腎臟SIRT1表達(dá)結(jié)果
3.2.3 血清及腎臟Trx-1表達(dá)結(jié)果
3.2.4 腎臟NOX2和NOX4 表達(dá)結(jié)果
3.2.5 腎臟SOD1和SOD2 表達(dá)結(jié)果
3.2.6 氧化應(yīng)激測定結(jié)果
3.2.7 腎功能測定結(jié)果
3.3 分析與討論
3.3.1 間歇運(yùn)動減緩腎臟氧化應(yīng)激反應(yīng),改善腎功能
3.3.2 間歇有氧運(yùn)動激活mi R-34a/SIRT1/Trx-1 通路,減緩氧化應(yīng)激,改善腎功能
3.4 本章小結(jié)
第4章 miR-145在間歇運(yùn)動抑制心梗大鼠腎臟炎癥反應(yīng)中的作用及機(jī)制
4.1 材料與方法
4.1.1 動物分組、心梗模型制備和運(yùn)動方案(同第二章)
4.1.2 主要儀器設(shè)備與試劑
4.1.3 取材與樣品處理(同第二章)
4.1.4 細(xì)胞培養(yǎng)及干預(yù)方案
4.1.5 免疫組織和細(xì)胞化學(xué)染色
4.1.6 Western Blot實(shí)驗(yàn)
4.1.7 RT-q PCR實(shí)驗(yàn)
4.1.8 圖像處理與數(shù)據(jù)分析
4.2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
4.2.1 間歇運(yùn)動上調(diào)心梗大鼠血清和腎臟miR-145表達(dá)
4.2.2 間歇運(yùn)動降低心梗大鼠腎臟CD40表達(dá)
4.2.3 間歇運(yùn)動降低心梗大鼠腎臟炎癥因子TNF-α和 IL-6 表達(dá)
4.2.4 CD40L下調(diào)IMCDCs中 mi R-145 的表達(dá)
4.2.5 CD40L誘導(dǎo)IMCDCs中 CD40 的表達(dá)
4.2.6 mi R-145 抑制CD40L誘導(dǎo)IMCDCs中 CD40 的表達(dá)
4.2.7 mi R-145 抑制CD40L誘導(dǎo)的IMCDCs中炎癥因子TNF-α和 IL-6 的表達(dá)
4.3 分析與討論
4.4 本章小結(jié)
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
攻讀碩士學(xué)位期間承擔(dān)的科研任務(wù)與主要成果
致謝
本文編號:3832056
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