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北五味子多糖的提取工藝優(yōu)化及抗炎性衰老作用的研究

發(fā)布時間:2022-08-04 12:26
  目的:炎性衰老是指在衰老過程中促炎細(xì)胞因子水平增加的慢性炎性狀態(tài),隨衰老的加劇進行性升高,被視為決定機體衰老進程的重要因素,與多種疾病密切相關(guān),是當(dāng)今醫(yī)學(xué)研究熱點。氧化應(yīng)激-炎癥-衰老學(xué)說被認(rèn)為是目前炎性衰老的主要發(fā)生機制之一,而北五味子是中國傳統(tǒng)中藥,其多糖成分(Fructus Schisandrae Chinensis Polysacchard,FSCP)具有保肝、抗氧化、抗炎、抗衰老等多種藥理作用,但目前FSCP抗炎性衰老作用機制的研究較少,為此本研究旨在優(yōu)化FSCP的提取工藝,構(gòu)建細(xì)胞炎性衰老模型及小鼠衰老模型,通過體內(nèi)、體外實驗檢測炎性細(xì)胞因子、活性氧、線粒體膜電位、抗氧化酶、衰老基因及衰老相關(guān)表型等,從細(xì)胞及整體水平探討FSCP對炎性衰老的影響;通過檢測p65、I-κBα蛋白探索FSCP可否參與調(diào)控NF-κB信號通路,明確FSCP抗炎性衰老的分子機制,以期為FSCP抗炎性衰老的研究提供理論依據(jù)。方法:(1)熱水浸提法提取FSCP;通過反復(fù)凍融、sevag及透析法對FSCP進行純化;在單因素實驗的基礎(chǔ)上,利用四因素三水平正交分析法優(yōu)化FSCP的提取工藝,研究提取溫度、提取時間... 

【文章頁數(shù)】:73 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
Abstract
縮略詞表
第1章 引言
    1.1 文獻綜述
        1.1.1 五味子多糖的藥理作用
        1.1.2 炎性衰老與疾病
    1.2 研究背景與目的
第2章 實驗研究
    2.1 實驗材料
        2.1.1 實驗主要試劑
        2.1.2 實驗主要儀器設(shè)備
    2.2 實驗方法
        2.2.1 北五味子多糖(FSCP)的提取
        2.2.2單因素實驗
        2.2.3 四因素三水平L9(3~4)正交分析優(yōu)化FSCP提取工藝
        2.2.4 FSCP的定量分析
        2.2.5 FSCP體外抗氧化能力檢測
        2.2.6 FSCP體外抗炎性衰老活性檢測
        2.2.7 FSCP體內(nèi)抗炎性衰老活性檢測
        2.2.8 統(tǒng)計分析
第3章 實驗結(jié)果
    3.1 FSCP的提取與純化
        3.1.1 單因素分析法檢測多糖得率
        3.1.2 四因素三水平正交分析法得到FSCP的最佳提取方案
    3.2 FSCP的理化性質(zhì)
        3.2.1 FSCP的總糖及葡萄糖含量
        3.2.2 FSCP的蛋白含量
    3.3 FSCP的體外抗氧化能力檢測
    3.4 FSCP的體外抗炎性衰老活性
        3.4.1 巨噬細(xì)胞炎性增殖的檢測
        3.4.2 FSCP對 LPS刺激的巨噬細(xì)胞產(chǎn)生促炎細(xì)胞因子的抑制作用
        3.4.3 FSCP對 LPS刺激的巨噬細(xì)胞產(chǎn)生SA-β-gal的抑制作用
        3.4.4 FSCP對 LPS刺激的巨噬細(xì)胞SAHF的抑制作用
        3.4.5 FSCP對 LPS刺激的巨噬細(xì)胞產(chǎn)生ROS的抑制作用及對線粒體膜電位的保護作用
    3.5 FSCP的體內(nèi)抗炎性衰老活性
        3.5.1 FSCP對小鼠體重、肝重及肝指數(shù)的影響
        3.5.2 FSCP對 D-gal誘導(dǎo)小鼠SOD、GSH-Px活性及MDA水平的影響
        3.5.3 FSCP對 D-gal誘導(dǎo)小鼠肝組織產(chǎn)生促炎細(xì)胞因子的抑制作用
        3.5.4 FSCP對 D-gal誘導(dǎo)小鼠肝組織損傷的保護作用
        3.5.5 FSCP對 D-gal誘導(dǎo)小鼠肝組織SAHF的抑制作用
        3.5.6 FSCP對細(xì)胞及小鼠肝組織中p53、p16 蛋白及磷酸化p53、p16蛋白表達的抑制作用
        3.5.7 FSCP抑制炎性衰老的分子機制
第4章 討論
第5章 結(jié)論
參考文獻
作者簡介及科研成果
致謝


【參考文獻】:
期刊論文
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碩士論文
[1]金耳多糖的提取、分離和純化及抗氧化活性的研究[D]. 王宣東.聊城大學(xué) 2018
[2]五味子多糖對疲勞的改善作用以及其代謝機制的探究[D]. 郭歡歡.陜西師范大學(xué) 2016
[3]四種中藥多糖及兩種中藥油脂的免疫調(diào)節(jié)作用[D]. 佟彤.北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院 2016
[4]過氧化氫誘導(dǎo)的絲氨酸磷酸化修飾對p16蛋白功能的影響[D]. 馬文龍.東北師范大學(xué) 2015



本文編號:3669537

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