發(fā)布時(shí)間：2021-11-25 08:01

　　目的:通過(guò)對(duì)阿爾茨海默癥（Alzheimer’s disease,AD）模型大鼠“百會(huì)”和雙側(cè)“腎俞”穴進(jìn)行電針干預(yù),以探尋其對(duì)AD模型大鼠認(rèn)知障礙的改善情況,及其對(duì)大鼠海馬區(qū)“P35/P25-細(xì)胞周期素依賴性蛋白激酶5（Cyclin-dependent Kinase 5,CDK5）-Tau蛋白磷酸化”信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)路徑的影響,從而更加深入的探討電針?lè)乐蜛D的相關(guān)機(jī)制。方法:首先,按照隨機(jī)數(shù)字表法將50只雄性成年Sprague-Dawley（SD）大鼠隨機(jī)均分為4組,分別命名為:對(duì)照組、假手術(shù)組、模型組以及電針治療組,每組各12只,另2只備用。然后,制作AD模型:對(duì)模型組及治療組大鼠進(jìn)行兩側(cè)海馬區(qū)每側(cè)各10μL的Aβ_25-35（1 g/L）注射。假手術(shù)組于同一位置注射相同體積的生理鹽水,治療組大鼠在成功造模后針刺其“百會(huì)”和雙側(cè)“腎俞”穴并正確連接電針儀進(jìn)行電針干預(yù),1次/天,共處理10天。電針治療結(jié)束后第二天采用Morris水迷宮對(duì)各組大鼠的學(xué)習(xí)記憶能力進(jìn)行檢測(cè)并統(tǒng)計(jì)分析;HE染色對(duì)比各組大鼠海馬部位基本細(xì)胞形態(tài)的差異;免疫組織化學(xué)檢測(cè)海馬區(qū)P35/P25、CDK5、... 

【文章來(lái)源】：重慶醫(yī)科大學(xué)重慶市

【文章頁(yè)數(shù)】：62 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

AD模型制作示意圖

重慶醫(yī)科大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文17摸，不電針（盡可能保證僅有唯一變量，即：電針刺激）。與此同時(shí)，以上實(shí)驗(yàn)操作，每次固定時(shí)間和操作人員，并在每日電針干預(yù)后對(duì)各組大鼠進(jìn)行稱重，并觀察記錄每只大鼠的飲食、活動(dòng)范圍、毛發(fā)、針刺局部皮膚及精神狀況等，作為造模與治療效果評(píng)價(jià)的輔助觀察指標(biāo)。1.4.5Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備工作：首先，將所有大鼠放置到水迷宮環(huán)境中（每次進(jìn)行水迷宮實(shí)驗(yàn)前清潔房間環(huán)境），提前適應(yīng)實(shí)驗(yàn)環(huán)境1-2天（適應(yīng)過(guò)程中保證溫度濕度與飼養(yǎng)室中一致），再進(jìn)行水迷宮測(cè)試。在直徑為2m、深度為0.6m、溫度范圍為25±0.5℃、背景色為黑色的圓形水池內(nèi)蓄水。在水池上方放置攝影裝備，采用SMART行為分析軟件觀察并記錄各組大鼠的平均逃避潛伏期（EscapeLatency，s）與搜索路徑（EscapeLength，cm）（注意：在水迷宮實(shí)驗(yàn)進(jìn)行的7日內(nèi)，每日對(duì)水池進(jìn)行清掃、消毒并換水，以避免氣味導(dǎo)致的實(shí)驗(yàn)誤差。與此同時(shí)，每次實(shí)驗(yàn)均必須在同一時(shí)間，由同樣人員進(jìn)行操作，實(shí)驗(yàn)過(guò)程中保持安靜，避免誤差。實(shí)驗(yàn)完成后，應(yīng)盡快采用保暖措施，避免大鼠由于生病等影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果）。圖1.2Morris水迷宮平面圖（第三象限內(nèi)的小圓圈表示平臺(tái)所在位置）Fig1.2Morriswatermazeplanedistributiondiagram（smallcirclesinquadrantindicatethepositionofplatform）.（1）可視平臺(tái)實(shí)驗(yàn)：第1-2天，RWD水迷宮設(shè)備已規(guī)定水池平均分為四個(gè)固

重慶醫(yī)科大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文262結(jié)果2.1一般情況造模前各組大鼠反應(yīng)靈敏，正常飲食。假手術(shù)組注入生理鹽水后于對(duì)照組基本情況差異不大。模型組組大鼠雖未出現(xiàn)偏癱等不良癥狀，但不同程度的出現(xiàn)反應(yīng)遲鈍（對(duì)外界刺激，如：聲音，光線等，缺乏興趣）、行動(dòng)較緩慢、活動(dòng)量和活動(dòng)范圍均有所減少（大多數(shù)時(shí)候喜歡蜷縮在鼠籠角落）、食欲較之前明顯下降、毛發(fā)粗糙，喜睡等情況。經(jīng)電針治療后，大鼠行動(dòng)更加靈活，活動(dòng)范圍明顯擴(kuò)大，飲食情況也較造模后有明顯好轉(zhuǎn)（基本與對(duì)照組無(wú)異）、毛發(fā)亦較前更為光滑。2.2Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)2.2.1可視平臺(tái)實(shí)驗(yàn)四組間進(jìn)行比較，各組大鼠游泳姿勢(shì)未見(jiàn)明顯差異，且尋找到平臺(tái)的平均逃避潛伏期（EscapeLatency，s)與搜索路徑（EscapeLength，cm）均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＞0.05），如圖2.1所示。圖2.1可視平臺(tái)實(shí)驗(yàn)結(jié)果A：平均逃避潛伏期(s)；B：搜索路徑(cm),P＞0.05。Fig.2.1Theresultsofvisualplatformexperiment.A:theescapelatencytime(s);B:theescapelength(cm),P＞0.05.

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]針加灸對(duì)阿爾茨海默病大鼠海馬區(qū)蛋白酪氨酸激酶-2/信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子-3信號(hào)通路的影響[J]. 劉靜,杜艷軍,周清蓮,孫國(guó)杰.  針刺研究. 2019(02)
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