研究目的視網膜母細胞瘤（RB）是最常見的嬰幼兒原發(fā)性眼內惡性腫瘤之一,化療是治療視網膜母細胞瘤的一種常規(guī)療法,本研究旨在比較洛鉑和卡鉑對視網膜母細胞增殖、凋亡和腫瘤生長的療效影響。研究方法通過視網膜母細胞Y79建立體外細胞模型,并通過MTT法檢測洛鉑、卡鉑對視網膜母細胞（RB）增殖的影響,使用流式細胞術分析洛鉑、卡鉑對RB細胞周期的影響,Annexin v-FITC/碘化丙啶（PI）測定細胞凋亡比例,RNA-seq檢測使用洛鉑、卡鉑后RB細胞中關鍵轉錄分子的表達分析,并對其基因表達數據進行差異性表達分析。進一步通過逆轉錄聚合酶鏈反應（RT-PCR）技術檢測洛鉑、卡鉑對RB細胞中E2F1/Cdc25a/Cdk2基因表達的影響。利用視網膜細胞系Y79細胞構建裸鼠視網膜母細胞瘤模型,將動物荷瘤模型隨機分為4組,分別給予不同的給藥方案:第1組是對照組,第2組小鼠注射PBS,第3組小鼠注射卡鉑,第4組小鼠注射洛鉑,于第1/2/3/4周觀察腫瘤生長曲線,并在第4周后行病理檢查。研究結果體外試驗中,卡鉑（80ug/ml）和洛鉑（40ug/ml）在體外能夠明顯抑制RB細胞的增殖;與卡鉑相比,洛鉑在早期... 

【文章來源】：廣州醫(yī)科大學廣東省

【文章頁數】：51 頁

【學位級別】：碩士

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卡鉑和洛鉑引起Y79細胞不同程度的凋亡和細胞周期變化

廣州醫(yī)科大學碩士學位論文18圖1.卡鉑和洛鉑引起Y79細胞不同程度的凋亡和細胞周期變化�？ㄣK組（0、20、40、60和80μg/ml）（A）和洛鉑組（0、5、10、20和40μg/ml）在處理后第1、2、3天細胞活性評估（B）圖1C-E和G-I分別為NC組、卡鉑組和洛鉑組的流式代表性圖像。圖1F和J顯示，卡鉑組和洛鉑組細胞凋亡、S期細胞比例低于NC組。*，P<0.05;**,P<0.01;和***,P<0.0014.2卡鉑組和洛鉑組視網膜母細胞基因表達變化為了研究和探討洛鉑和卡鉑對RBY79細胞的影響，我們對不同組的mRNA進行了RNA-seq測定(圖2A-C)。聚類分析顯示了三組之間的差異，因此我們能夠確認，我們的RNA-seq數據證明了差異表達分析的條件是正確的（圖2D）。我們以差異轉錄本為研究對象進行進一步研究兩組樣本的差異，使用Ballgown對兩組樣本進行比較，得到顯著的P值；在本分析中，兩組相比較進行差異轉錄本篩選，篩選條件為p值<0.05和Foldchange大于1.2倍及小于0.83333倍，如對卡鉑組（圖3Aa）進行對照組分析時，共鑒定出2525個表達上調的基因和1172個表達下調的基因，對洛鉑組（圖3Ab）進行對照組分析時，共鑒定出2582個表達上調的基因和2971個表達下調的基因，對洛鉑組（圖3Ac）進

4.結果19行對照組分析時，共鑒定出3724個表達上調的基因和2190個表達下調的基因。在基因本體論（GO）富集分析的幫助下，對這三組重要的生物學功能進行了評估（圖3Ba-Bc），結果顯示E2F1/IGF1/CACNA1F/TNNC1/TGFB3CACNG6/MYBPC3CACNA2D3/ADCY1/PLN,E2F1/IGF1/NUPR1/HIST1H3J/HIST2H3CHIST2H3A/HIST1H3B/HIST1H3E/HIST1H3H/HIST1H3D和E2F1/MYC/CDKN2BHIPK4/CALML6組。在這份結果中值得我們關注的是E2F1蛋白在三組中表達均有顯著差異。圖2.卡鉑和洛鉑處理組的基因表達變化。NC組、卡鉑組和洛鉑組(A至C)相關基因的正常表達的熱圖。對每個樣本的基因表達水平(FPKM)進行聚類分析的結果（D）。

【參考文獻】：
期刊論文
[1]Lobaplatin inhibits growth of gastric cancer cells by inducing apoptosis[J]. Chu-Yang Yin,Xiao-Lin Lin,Lei Tian,Ming Ye,Xin-Ying Yang,Xiu-Ying Xiao.  World Journal of Gastroenterology. 2014(46)



本文編號：3489461