阿爾茨海默病（Alzheimer’s disease,AD）是一種常見的神經退行性疾病,近年來患病人數(shù)逐年增加,已經成為重大的公共衛(wèi)生問題。AD早期出現(xiàn)的晝夜節(jié)律紊亂可在一定程度上加重AD的其他癥狀如學習記憶與認知功能缺陷等,其在AD的發(fā)展過程中至關重要。大量研究證實,AD核心病理特征—腦組織中異常沉積的β淀粉樣蛋白（Amyloid-βprotein,Aβ）與AD晝夜節(jié)律紊亂的發(fā)生密切相關。Bmal1作為晝夜節(jié)律的核心組分,在晝夜節(jié)律的調控和維持中發(fā)揮重要作用。我們課題組前期研究發(fā)現(xiàn)Aβ的核心片段Aβ31-35可誘導HT22海馬神經細胞Bmal1異常表達。然而,針對Aβ31-35所致Bmal1異常表達目前尚無有效的防治措施。2型糖尿�。═2DM）和AD在發(fā)病上具有相關性,胰島素抵抗是T2DM和AD的共同病理生理特征。脂聯(lián)素（Adiponectin,APN）是由脂肪細胞分泌的細胞因子,具有胰島素敏化作用。臨床研究表明,AD患者血清中脂聯(lián)素水平降低。另有研究揭示,脂聯(lián)素信號傳導缺陷可誘導小鼠出現(xiàn)AD樣病理改變,如Aβ沉積,Tau蛋白高度磷酸化,神經炎癥等,而激活脂聯(lián)素信號可改善APP/PS... 

【文章來源】：山西醫(yī)科大學山西省

【文章頁數(shù)】：76 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

APN-KO小鼠基因型鑒定結果

山西醫(yī)科大學碩士學位論文14圖1-2APN-KO小鼠海馬組織中Aβ異常沉積(n=6,Scalebar：20μm)2.3APN-KO小鼠存在晝夜節(jié)律紊亂選取4月齡C57BL/6小鼠和APN-KO小鼠分為Control組、APN-KO組進行跑輪行為學實驗以明確脂聯(lián)素缺乏對于晝夜節(jié)律的影響。結果顯示，Control組小鼠跑輪活動節(jié)律規(guī)則，運動相與休息相分界清晰，運動多集中于主觀夜晚且起始時間較為固定（圖1-3A），主觀白天活動量/總活動量比值為（27.34±9.36）%，小鼠自由運轉周期為（25.04±0.39）h。而APN-KO小鼠出現(xiàn)晝夜節(jié)律紊亂現(xiàn)象，表現(xiàn)為每日跑輪活動起始時間的變異性增大，主觀白天活動量增多，主觀夜晚活動量減少（圖1-3A），主觀白天活動量/總活動量比值顯著升高（66.40±7.42）%（圖1-3B），小鼠自由運轉周期顯著延長（26±0.09）h（P<0.05）（圖1-3C）。以上結果表明脂聯(lián)素缺乏可誘導小鼠晝夜節(jié)律紊亂。

山西醫(yī)科大學碩士學位論文15圖1-3APN-KO小鼠存在晝夜節(jié)律紊亂（A）Control組和APN-KO組小鼠自主跑輪運動原始圖，顯示DD環(huán)境中連續(xù)14天小鼠實時跑輪情況，黑色部分代表運動期，白色部分代表休息期。（B）Control組和APN-KO組小鼠主觀白天和主觀夜晚活動量與總活動量比值的統(tǒng)計圖。（C）Control組和APN-KO組小鼠自由運轉周期統(tǒng)計圖�！�*”表示與Control組相比有統(tǒng)計學差異（P<0.05）（n=6）2.4APN-KO小鼠海馬組織Bmal1基因/蛋白表達異常采用實時熒光定量PCR法及WesternBlotting印跡法檢測4月齡C57BL/6小鼠（Control組）和APN-KO小鼠（APN-KO組）海馬組織于CT4、CT8、CT12、CT16、CT20、CT24六個時間點的Bmal1mRNA及BMAL1蛋白表達情況以明確脂聯(lián)素缺乏對Bmal1mRNA及其蛋白表達的影響。結果發(fā)現(xiàn)，Control組小鼠海馬組織Bmal1mRNA在CT4、CT12、CT20、CT24時間點表達相對較高，于CT20時間點表達水平最高，在CT8、CT16時間點表達相對較低，于CT8時間點表達水平最低；而APN-KO小鼠Bmal1mRNA在CT4、CT8、CT20、CT24時間點表達相對較高，于CT24時間點表達水平最高，在CT12、CT16時間點表達相對較低，于CT12時間點表達水平最低，且CT12時間點Bmal1mRNA表達水平與Control組相比顯著降低（0.95±0.11vs0.72±0.04,P<0.05）（圖1-4A,B）。同時檢測了各組小鼠海馬組織在CT4、CT8、CT12、CT16、CT20、CT24時間點BMAL1蛋白的表達，結果顯示：Control組小鼠海馬組織BMAL1蛋白于CT24時間點表達水平最高，而APN-KO小鼠BMAL1蛋白于CT4時間點表達水平最高，且APN-KO小鼠BMAL1蛋白的表達與Control組相比顯著升高，于CT4、CT12、CT16、CT20時間點的升高具有統(tǒng)計學意義（1.00±0.08vs1.65±0.14;0.92±0.11vs1.27±


本文編號：3442022