草麻黃（Ephedra sinica Stapf）作為一味常用中藥,是中藥麻黃和麻黃根在《中國藥典》中收錄的基源植物之一,其莖和根藥效相反,是本植物最大的特點。麻黃莖多用于發(fā)汗散寒,而麻黃根多用于固表止汗,此“同源異效”現(xiàn)象與其莖和根化學成分的差異密切相關(guān)。內(nèi)生真菌與宿主植物長期的協(xié)同進化過程中,形成穩(wěn)定的互利共生關(guān)系,高度多樣化且功能專一的真菌群落可以對宿主植物的代謝物組成產(chǎn)生極大影響。由于宿主的“選擇”作用,它們在宿主不同組織的分布不同,且對不同組織的影響也不同。因此,本文綜合采用宏基因組和代謝組學技術(shù),系統(tǒng)探究草麻黃莖和根的內(nèi)生真菌群落組成和分布以及莖和根的整體代謝物組成差異,進而分析探索內(nèi)生真菌與差異代謝標志物形成的相關(guān)關(guān)系。研究結(jié)果如下:1.首先采用ITS2條形碼技術(shù)對采自山西大同地區(qū)的野生草麻黃進行物種鑒定,采用BLAST法將其序列與GenBank數(shù)據(jù)庫中的物種序列進行比對。相似性高達100%,確定了采集樣本為草麻黃（E.sinica）。2.基于Illumina Miseq高通量測序結(jié)果,對五月、九月采集野生草麻黃莖和根內(nèi)生真菌群落組成及多樣性進行分析,結(jié)果表明,草麻黃莖和... 

【文章來源】：山西大學山西省

【文章頁數(shù)】：74 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

草麻黃ITS2序列GenBank比對結(jié)果

內(nèi)生真菌與草麻黃根-莖代謝差異物形成的相關(guān)關(guān)系研究12取的基因組DNA電泳條帶整齊、純度較高，適宜用作PCR反應。PCR產(chǎn)物的電泳圖譜如圖3.2所示，選取條帶均一且明亮的樣本M1，進行下一步測序。3.4.2序列比對結(jié)果將測序ITS2序列上傳至GenBank數(shù)據(jù)庫，與數(shù)據(jù)庫中草麻黃物種序列進行分析比對。結(jié)果如圖3.3所示，相似性介于98.7%與100%之間，確定采集的植物樣本為草麻黃（Ephedrasinica）。3.5討論與小結(jié)我國野生麻黃資源豐富，分布范圍較廣。即使同一個物種，不同時間和不同地點，都存在著微進化、變異的可能，同時伴隨著其附屬內(nèi)生菌和代謝物含量的變化[66]。因此，對所采集樣本進行準確的物種鑒定成為后續(xù)工作的基礎(chǔ)和前提。本實驗采用圖3.3草麻黃ITS2序列GenBank比對結(jié)果圖3.1基因組DNA的PCR電泳圖圖3.2PCR產(chǎn)物電泳圖

內(nèi)生真菌與草麻黃根-莖代謝差異物形成的相關(guān)關(guān)系研究12取的基因組DNA電泳條帶整齊、純度較高，適宜用作PCR反應。PCR產(chǎn)物的電泳圖譜如圖3.2所示，選取條帶均一且明亮的樣本M1，進行下一步測序。3.4.2序列比對結(jié)果將測序ITS2序列上傳至GenBank數(shù)據(jù)庫，與數(shù)據(jù)庫中草麻黃物種序列進行分析比對。結(jié)果如圖3.3所示，相似性介于98.7%與100%之間，確定采集的植物樣本為草麻黃（Ephedrasinica）。3.5討論與小結(jié)我國野生麻黃資源豐富，分布范圍較廣。即使同一個物種，不同時間和不同地點，都存在著微進化、變異的可能，同時伴隨著其附屬內(nèi)生菌和代謝物含量的變化[66]。因此，對所采集樣本進行準確的物種鑒定成為后續(xù)工作的基礎(chǔ)和前提。本實驗采用圖3.3草麻黃ITS2序列GenBank比對結(jié)果圖3.1基因組DNA的PCR電泳圖圖3.2PCR產(chǎn)物電泳圖

【參考文獻】：
期刊論文
[1]淺談麻黃與麻黃根的異同[J]. 李慧,楊會,宋珂,白云綺,聶波.  中國現(xiàn)代中藥. 2018(09)
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[3]內(nèi)生菌與植物的互作關(guān)系及對藥用植物的影響[J]. 崔晉龍,郭順星,肖培根.  藥學學報. 2017(02)
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[9]HPLC法測定不同產(chǎn)地和種屬麻黃中麻黃堿與偽麻黃堿的含量[J]. 晉玲,張弦飛,崔治家,朱田田,王振恒,馬毅,林麗,高天鵬.  中獸醫(yī)醫(yī)藥雜志. 2013(01)
[10]真菌誘導植物次生代謝產(chǎn)物積累的信號機制及在藥用植物中的應用[J]. 崔晉龍,付少彬,高芬,王夢亮.  中草藥. 2012(08)

博士論文
[1]麻黃根及羊齒天門冬化學成分研究[D]. 陶華明.吉林大學 2009

碩士論文
[1]麻黃內(nèi)生真菌及其主要活性研究[D]. 孟竹.吉林農(nóng)業(yè)大學 2014
[2]草麻黃化學成分研究[D]. 趙巍.中國協(xié)和醫(yī)科大學 2009



本文編號：3428466