目的:電針預處理（EAP）能有效減輕心肌缺血（MI）損傷,但是其機制尚未完全闡釋。越來越多的證據表明梗死后心臟的炎性反應直接影響心室功能的重塑,其中炎性體活化和巨噬細胞極化在該過程扮演重要角色,因此,擬通過本研究從調控NLRP3炎性體活化和巨噬細胞表型變化的角度探索電針預處理減輕MI損傷的可能機制。方法:以C57BL/6小鼠為研究對象,隨機分為4組,正常組（Ctrl）、正常電針預處理組（EA+Ctrl）、心肌缺血模型組（MI）、電針預處理3d后造模組（EA+MI）。采用結扎小鼠冠狀動脈左前降支（LAD）構建急性心肌缺血模型;預處理方案為電針雙側“內關”,電針頻率2Hz/15Hz,疏密波,強度2mA,每次20min,1次/d,共干預3d。采用超聲心動圖和TTC染色用于評估缺血24h后MI小鼠的心功能和心臟梗死面積;HE染色法和免疫組織化學法觀察小鼠心臟梗死區(qū)域的炎癥水平,以Western blot檢測NLRP3炎性小體的活化程度,流式細胞術檢測巨噬細胞極化和中性粒細胞浸潤程度。結果:（1）與正常組相比,模型組心肌梗死面積比例和心功能降低;與模型組相比,電針預處理后造模組心肌梗死面積比例和... 

【文章來源】：南京中醫(yī)藥大學江蘇省

【文章頁數】：60 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖１技術路線圖??

反應以及??缺血組織修復的關鍵環(huán)節(jié)。調控ＮＬＲＰ３炎性小體的活化，可以平衡急性心肌缺??血階段缺血心肌組織中的炎性平衡，有利于缺血心肌組織損傷后的修復與重塑。??ＮＬＲＰ３?ＡＳＣ?Ｐｒｏ－ｃａｓｐａｓｅ－１??ＩＨＷＨ?ＮＡＣＨＴ?ＭＭ?ＣＡＲＤ?｜?｜?ＣＡＲＤ??ＬＲＲ?，?．??＼?！?／??＼?ｖ?ｚ??ＤＱＤＱｉ?ｍ?ｃｕｍａｍ?／?一??ＮＬＲＰ３?ｉｎｆｌａｍｍａｓｏｍｅ?＿??Ｂ「盯ＢＢｌ，??Ｃａｓｐａｓｅ－１?ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ??圖２?ＮＬＲＰ３炎性體的結構及在炎性反應中的作用??大量的動物實驗也表明，小鼠ＡＭＩ模型中，缺血心肌組織中ＮＬＲＰ３表達升??高，炎性反應加�。郏福矗福担�，相反，缺乏ＮＬＲＰ３炎性體成分可減輕炎性反應并促進??心臟的保護作用［２９］。另外，ＮＬＲＰ３７－小鼠ＡＭＩ模型也驗證了?ＮＬＲＰ３的缺乏可有??效降低心肌炎性反應，實現(xiàn)心肌保護效應［８６］。??３．?２巨噬細胞、中性粒細胞與心肌缺血??ＡＭＩ早期的急性炎性反應是由針對缺血心肌細胞壞死的固有免疫觸發(fā)的。??壞死的心肌碎片作為ＤＡＭＰＳ被固有免疫識別，誘發(fā)急性的劇烈的炎性反應Ｐ，??８８）。ＡＭＩ后，當固有免疫系統(tǒng)被激活后，免疫細胞在缺血心肌組織中聚集，誘導??最初的炎性反應［８９］。ＡＭＩ發(fā)生后，中性粒細胞是最早進入缺血心肌的免疫細胞，??隨后單核巨噬細胞被募集到缺血心肌組織，誘發(fā)急性炎性反應，吞噬壞死心肌細??８??

?第一部分理論研究???Ｃｄ２０６ｌｏｗ??Ｃｄ２０６ｈｉｅｈ??圖３巨噬細胞的極化對炎性反應的影響??Ｍｌ和Ｍ２巨噬細胞極化的概念最早來源于體外研究，Ｍｌ型巨噬細胞的極??化主要由脂多糖（ＬＰＳ）和ＩＦＮ－ｙ聯(lián)合誘導，通過誘導信號轉導子（ＪＡＫ）和轉錄??激活因子ｌ（ＳＴＡＴｌ）下游磷酸化，激活Ｔｏｌｌ樣受體，進一步影響絲裂原活化蛋白??（ＭＡＰＫ）通路、干擾素調節(jié)因子（ＩＲＦ）通路和ＮＦ－ｋＢ通路，促使分泌一系列的促炎??因子［１Ｑ９，?ＵＱ］。Ｍ２型巨噬細胞的極化由ＩＬ－４和ＩＬ－１３信號通過ＪＡＫ－ＳＴＡＴ通路激??活ＳＴＡＴ６，ＳＴＡＴ６的信號傳遞使巨噬細胞向Ｍ２型表達［ｍ］。雖然理論上可以根??據巨噬細胞極化表達的不同受體來分選，但是由于巨噬細胞有許多細微的表型，??目前我們仍然不能對其進行精確的分類。研究者使用Ｆ４／８０和ＣＤｌｌｂ標記對小??鼠的Ｍｌ和Ｍ２型巨噬細胞進行了分選［８６］；也有研究者通過ＣＤ２０６ｌｍ＾Ｐ?ＣＤ２０６ｈｉｇｈ??對小鼠的Ｍｌ和Ｍ２巨噬細胞進行了區(qū)分…２］。另外Ｍ２型巨噬細胞因為具有組??織修復、抑制炎性反應、吞噬活性、免疫調節(jié)等作用，所以又將Ｍ２型巨噬細胞??分為Ｍ２ａ，Ｍ２ｂ，Ｍ２ｃ等亞型［｜１３］。Ｍ２ａ和Ｍ２ｃ巨噬細胞對免疫調節(jié)和組織修復??至關重要，而抑制炎性免疫反應則主要由依賴Ｍ２ｂ細胞［｜１４］。巨噬細胞亞型的轉??化并不是簡單割裂的，而不同的巨噬細胞亞型在心肌缺血病理過程中是交替激活??的，巨噬細胞這種多亞型、多功能表達的特點，也為治療心肌缺血創(chuàng)造了無限的??可能性。??在目前的實驗研究中發(fā)現(xiàn)，在心肌缺血后，通過將Ｍｌ型巨噬細胞轉變?yōu)??Ｍ２型巨噬細

【參考文獻】：
期刊論文
[1]基于線粒體通透性轉換孔道探討電針預處理抗心肌缺血/再灌注損傷的保護作用[J]. 張小蕾,王書國,林依夢,向麗莉,薛藝璇,李佳,黃偉.  湖北中醫(yī)藥大學學報. 2019(06)
[2]電針預處理對心肌缺血再灌注大鼠的保護作用及FXR/SHP基因的調控作用[J]. 李晨,張小蕾,薛藝璇,程德均,嚴江天,吳松,黃偉.  中國針灸. 2019(08)
[3]電針對心肌缺血小鼠心肌組織交感神經相關物質的影響[J]. 袁璟,王軍蒙,蔡云,傅淑平,朱冰梅,盧圣鋒.  中國針灸. 2019(05)
[4]再灌注期不同時間電針對心肌缺血再灌注損傷大鼠心肌組織中Bcl-2、Beclin1表達的影響[J]. 張宏如,仲澤昊,陳婉瑩,白樺,肖燕,顧一煌,盧圣鋒.  中國針灸. 2018(11)
[5]電針減輕大鼠心肌缺血損傷的AMPKα-HDAC5-HIF-1α信號級聯(lián)機制[J]. 盧圣鋒,丁亞娟,于美玲,傅淑平,洪浩,朱冰梅.  中國針灸. 2018(09)
[6]電針對急性心肌缺血模型小鼠心肌組織中炎性反應的影響[J]. 王軍蒙,袁璟,蔡云,傅淑平,李敏慧,洪浩,盧圣鋒,朱冰梅.  中國針灸. 2018(05)
[7]電針心經對心肌缺血大鼠小腸腸道菌群的影響[J]. 吳生兵,劉苗苗,王堃,吳欣,崔帥,周美啟.  中醫(yī)藥臨床雜志. 2018(03)
[8]心肌缺血動物模型實驗研究進展[J]. 范英蘭,胡麗萍,朱竟赫,劉禾,武曉琳,趙文婷,袁宇.  實驗動物科學. 2018(01)
[9]電針、艾灸預處理對心肌缺血再灌注損傷大鼠心肌自噬相關蛋白LC 3、Beclin 1表達的影響[J]. 譚成富,王超,杜琳,劉薇薇,宋瑾,馮果,嚴潔,陽晶晶,唐雅妮,陳美琳,李姣蘭.  針刺研究. 2018(01)
[10]腸道菌群與心血管疾病的研究進展[J]. 劉煦,逯茂洋.  世界最新醫(yī)學信息文摘. 2018(06)



本文編號：3326131