目的:建立實(shí)驗(yàn)性自身免疫性心肌炎大鼠模型。經(jīng)大鼠尾靜脈注射內(nèi)皮素B受體（endothelin B receptor,ETBR）過表達(dá)慢病毒干預(yù)自身免疫性心肌炎,觀察ETBR過表達(dá)對(duì)自身免疫性心肌炎的影響。在此基礎(chǔ)上,探討ETBR過表達(dá)調(diào)控ICAM-1等T淋巴細(xì)胞歸巢相關(guān)分子治療自身免疫性心肌炎的相關(guān)機(jī)制。方法:制備ETBR基因過表達(dá)慢病毒。從購(gòu)買的24只雄性Lewis大鼠中隨機(jī)選出6只正常大鼠（NC組）,剩余18只大鼠在第0天（免疫注射當(dāng)天）及第7天分別注射豬心肌肌球蛋白,建立實(shí)驗(yàn)性自身免疫性心肌炎大鼠模型。初次注射心肌肌球蛋白的18只大鼠隨機(jī)分為3組:實(shí)驗(yàn)性自身免疫性心肌炎組（EAM組）,ETBR基因過表達(dá)慢病毒自身免疫性心肌炎組（ETBR-oe組）和空載慢病毒自身免疫性心肌炎對(duì)照組（GFP組）。ETBR-oe組大鼠在初次免疫當(dāng)天,將1×10⁸ TU慢病毒/只（200μL）注入大鼠尾靜脈內(nèi),GFP組大鼠注入相同劑量的空載慢病毒,NC組和EAM組注入相同劑量的生理鹽水。大鼠初次免疫后第21天,進(jìn)行心臟超聲心動(dòng)圖檢測(cè)評(píng)價(jià)心功能變化;當(dāng)天處死大鼠取血和心臟標(biāo)本;ELI... 

【文章來源】：南昌大學(xué)江西省 211工程院校

【文章頁(yè)數(shù)】：57 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

大鼠心肌組織病理學(xué)檢查（HE染色，×200）

第3章實(shí)驗(yàn)結(jié)果18表2第21天大鼠心肌組織炎癥評(píng)分情況（均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差）組別NCEAMETBR-oeGFP炎癥評(píng)分03.28±0.46*1.56±0.41**3.17±0.49△注：NC：正常對(duì)照組；EAM：實(shí)驗(yàn)性自身免疫性心肌炎組；ETBR-oe：ETBR基因過表達(dá)慢病毒組；GFP：空載慢病毒對(duì)照組。*：與正常對(duì)照組比較，P<0.05；**：與實(shí)驗(yàn)性自身免疫性心肌炎組比較，P<0.05；△：與實(shí)驗(yàn)性自身免疫性心肌炎組比較，P>0.05。3.4免疫組化法檢測(cè)蛋白分布情況免疫組化陽(yáng)性染色結(jié)果顯示為在細(xì)胞膜、細(xì)胞漿及部分間質(zhì)中可見棕黃色顆粒，藍(lán)色為細(xì)胞核，特定蛋白表達(dá)越多，棕黃色顆粒顏色越深。初次免疫后第21天，免疫組化示內(nèi)皮素B受體主要表達(dá)于心肌細(xì)胞膜、細(xì)胞漿中。內(nèi)皮素B受體蛋白表達(dá)在EAM組心肌組織中染色深度高于正常對(duì)照組，但ETBR-oe組又明顯高于EAM組，GFP組與EAM組顏色深度無明顯差異。細(xì)胞間黏附分子-1在EAM組的心肌組織中染色深度明顯高于正常對(duì)照組，相比于EAM組ETBR-oe組明顯降低，GFP組與EAM組顏色深度無明顯差異。連接黏附分子-C、E-選擇素在EAM組、ETBR-oe組、GFP組三組心肌炎大鼠心肌組織中的染色無明差異，但棕黃色顆粒顏色深度均高于正常對(duì)照組。圖2大鼠心肌組織免疫組化（IHC×400）


本文編號(hào)：3278017