背景:目前的研究表明,生物鐘基因Per1在多種腫瘤中表達(dá)下調(diào),在促進(jìn)腫瘤進(jìn)展中發(fā)揮重要作用。然而,生物鐘基因Per1在腫瘤中的生物學(xué)功能和作用機(jī)制尚不清楚。目的:研究口腔鱗癌（oral squamous cell carcinoma,OSCC）中生物鐘基因Per1的表達(dá)水平及其表達(dá)改變的臨床意義,并探索Per1表達(dá)在體外和體內(nèi)的生物學(xué)功能。方法:收集有完整隨訪資料和臨床資料的86例OSCC患者癌及癌旁病理組織標(biāo)本,用免疫組化檢測(cè)86例OSCC患者癌組織及癌旁組織標(biāo)本中Per1的表達(dá)水平,Per1表達(dá)差異對(duì)OSCC患者預(yù)后的影響采用Kaplan-Meier生存分析和log-rank檢驗(yàn),Per1的表達(dá)與OSCC患者臨床病理參數(shù)的相關(guān)性分析采用卡方檢驗(yàn)。在OSCC細(xì)胞中分別用過表達(dá)Per1的慢病毒和Per1-shRNA慢病毒對(duì)Per1進(jìn)行過表達(dá)和敲減后,在電鏡下觀察自噬體形成,用MTT實(shí)驗(yàn)和CCK8實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞增殖,細(xì)胞凋亡檢測(cè)使用Tunel實(shí)驗(yàn)和流式細(xì)胞實(shí)驗(yàn),LC3B、Beclin1、P62、p-mTOR、mTOR、p-AKT、AKT蛋白的表達(dá)水平檢測(cè)使用western blotting... 

【文章來(lái)源】：重慶醫(yī)科大學(xué)重慶市

【文章頁(yè)數(shù)】：65 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

生物鐘基因Per1在口腔鱗癌組織和細(xì)胞中表達(dá)降低

重慶醫(yī)科大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文41圖2.過表達(dá)和沉默Per1后，OSCC細(xì)胞增殖和凋亡的變化。FIGURE2.ChangesintheproliferationandapoptosisofOSCCcellsaftertheoverexpressionandsilencingofPer1.A-B.穩(wěn)轉(zhuǎn)過表達(dá)和沉默Per1OSCC細(xì)胞的效率檢測(cè)表明，Per1過表達(dá)SCC15細(xì)胞中，Per1mRNA和蛋白表達(dá)水平顯著升高；Per1敲減的TSCCA細(xì)胞中，Per1mRNA和蛋白表達(dá)顯著降低。C.流式細(xì)胞實(shí)驗(yàn)檢測(cè)結(jié)果顯示：SCC15細(xì)胞中過表達(dá)Per1后細(xì)胞凋亡指數(shù)顯著升高，TSCCA細(xì)胞中沉默Per1后細(xì)胞凋亡指數(shù)顯著降低。D.TUNEL實(shí)驗(yàn)檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，在TSCCA細(xì)胞中沉默Per1后Tunel陽(yáng)性率明顯降低，而在SCC15細(xì)胞中過表達(dá)Per1后Tunel陽(yáng)性率明顯升高。E-F.MTT實(shí)驗(yàn)和CCK8實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示：在SCC15細(xì)胞中過表達(dá)Per1后增殖能力明顯降低，沉默Per1的TSCCA細(xì)胞的增殖能力明顯升高。*P<0.05；**P<0.01；***P<0.001；****P<0.0001。

重慶醫(yī)科大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文42圖3.過表達(dá)和沉默Per1后，OSCC細(xì)胞自噬和AKT/mTOR通路活性的變化。FIGURE3.ChangesinautophagyandAKT/mTORpathwayactivityinOSCCcellsaftertheoverexpressionandsilencingofPer1.A.TEM實(shí)驗(yàn)檢測(cè)結(jié)果表明：過表達(dá)Per1的SCC15細(xì)胞中的自噬小體密度顯著增加，沉


本文編號(hào)：3261937