目的觀察缺氧對軟骨細胞體外培養(yǎng)時的失分化過程的影響,探討膠原蛋白脯氨酰4-羥化酶（collagen prolyl 4-hydroxylases,C-P4Hs）在其中的作用。方法對軟骨細胞進行不同濃度的COCl2處理,篩選用于缺氧誘導的最佳COCl2濃度為100 μmol/L后,將小鼠肋軟骨細胞分為:常氧組、缺氧組,分別檢測第3代0.5-72 h及1、3、5、7代于72 h的各項指標。使用CCK8法及細胞計數測定增殖率,RT-qPCR、免疫熒光染色、Western blot檢測各組HIF-1α、P4Hα1、P4Hα2和Col-II的動態(tài)變化。結果肋軟骨細胞在不同濃度COCl2條件下培養(yǎng)48 h,100 μmol/L的COCl2組增殖率最高,呈典型的鋪路石狀;當COCl2濃度>150 μmol/L時,增殖率（P<0.05）降低。常氧與缺氧下誘導肋軟骨細胞0-72 h,RT-qPCR顯示缺氧組P4Hα2、ColⅡmRNA表達升高（P>0.05）。免疫熒光顯示缺氧下HIF-1α與P4Hα2累積于胞核內,P4Hα2逐漸由胞核進入胞漿中。Western-blot顯示缺氧組HIF-... 

【文章來源】：中華骨科雜志. 2020,40(12)北大核心CSCD

【文章頁數】：12 頁


本文編號：3103573