發(fā)布時間：2021-01-02 03:17

　　目的:采用UHPLC-PDA-Q-TOF/MS（超高效液相色譜-二極管陣列檢測器-四級桿飛行時間質(zhì)譜）通過定性和相對定量的方法對中藥淫羊藿和山楂葉進行質(zhì)量研究。方法:本文第一部分以當(dāng)前栽培產(chǎn)業(yè)的主要種類箭葉淫羊藿、柔毛淫羊藿和天平山淫羊藿為研究對象,首先運用UHPLC-Q-TOF/MS結(jié)合UNIFI數(shù)據(jù)分析平臺對淫羊藿化學(xué)成分進行快速鑒定。其次,結(jié)合PCA及OPLS-DA等化學(xué)計量學(xué)方法對淫羊藿不同部位樣品和三個種淫羊藿栽培種質(zhì)、相應(yīng)野生種質(zhì)以及國內(nèi)其他野生種質(zhì)進行差異性分析。最后利用UHPLC-PDA（λ=270nm）結(jié)合熱圖可視化分析對三個種淫羊藿不同部位化學(xué)成分以及栽培、相應(yīng)野生和其他野生淫羊藿樣本中12個黃酮類成分和總黃酮進行相對定量。本文第二部分以不同種（野山楂和山里紅）和不同季節(jié)山楂葉（山里紅）為研究對象,首先運用UHPLC-Q-TOF/MS結(jié)合UNIFI數(shù)據(jù)分析平臺對山楂葉化學(xué)成分進行分析鑒定。其次,通過PCA及OPLS-DA等化學(xué)計量學(xué)方法對不同種山楂葉進行差異性分析。最后利用UHPLC-PDA（λ=280nm）對不同季節(jié)山里紅葉中含量較高的5個黃酮類成分和總黃酮以及3... 

【文章來源】：山西醫(yī)科大學(xué)山西省

【文章頁數(shù)】：100 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

淫羊藿中黃酮類化合物主要母核類型以及糖基取代基結(jié)構(gòu)

山西醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文8圖1-2UHPLC-Q-TOF/MS結(jié)合UNIFI數(shù)據(jù)分析平臺快速鑒定淫羊藿中黃酮類化合物示意圖碎片裂解規(guī)律及色譜規(guī)律如下：1)淫羊藿中黃酮類化合物在負離子低能量時易出現(xiàn)[M-H]的準(zhǔn)分子離子峰且多數(shù)化合物會伴隨較高豐度的[M＋HCOO]以及[M-H+2H2O]的加合離子峰，在正離子低能量時存在豐度較高的[M+H]+的準(zhǔn)分子離子峰，通過準(zhǔn)分子離子峰及特征加合離子峰可判斷化合物的分子量和分子式。2)在負離子高能量下，可觀察到連續(xù)脫糖后的特征母核碎片，其中m/z367是A類黃酮化合物的特征碎片，m/z353是B類黃酮化合物的特征碎片，m/z383是C類黃酮化合物的特征碎片，m/z369是D類黃酮化合物的特征碎片，m/z285是E類黃酮化合物的特征碎片，m/z301是F類黃酮化合物的特征碎片，通過特征母核碎片可判斷化合物母核的類型。3)在負離子模式下，淫羊藿中黃酮類成分會優(yōu)先脫去C-7位上的糖基而在正離子模式下更傾向于脫去C-3位上的糖基，通過正負離子模式下糖基脫落的順序可以判斷糖基所連位置。4)在正負離子高能量通道下，會觀察到一系列脫糖的特征碎片，例如162mDa意味著脫掉一分子葡萄糖，132mDa意味著脫掉一分子木糖，146mDa意味著脫掉一分

山西醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文9子鼠李糖等，通過一系列脫糖的特征碎片可以判斷淫羊藿中黃酮類化合物所連糖基的類型。5)此外，對比糖基類型相同但連接位點不同的對照品以及相關(guān)文獻報道的該類化合物色譜行為發(fā)現(xiàn)[28]，在反相C18色譜柱上，當(dāng)C-3位糖基為rha-glc或rha-xyl連接時，出峰時間順序為1-4位連接>1-3位連接>1-2位連接;當(dāng)C-3位為rha-rha連接時,出峰時間順序為1-3位連接>1-2位連接>1-4位連接。2.2.2淫羊藿不同部位化學(xué)成分的鑒定采用所建立的UHPLC-Q-TOF/MS方法快速分析箭葉、柔毛、天平山淫羊藿葉、莖以及根莖樣品，箭葉淫羊藿不同部位樣品BPI圖見圖1-3，柔毛淫羊藿不同部位樣品BPI圖見圖1-4，天平山淫羊藿不同部位樣品BPI圖見圖1-5。將建立的淫羊藿數(shù)據(jù)庫導(dǎo)入UNIFI軟件中，創(chuàng)建分析方法并對采集到的數(shù)據(jù)進行分析，UNIFI軟件會對樣品中的色譜峰與數(shù)據(jù)庫中化合物進行自動匹配同時給出經(jīng)處理后的可信數(shù)據(jù)，包括化合物名稱、保留時間、質(zhì)量數(shù)誤差、標(biāo)識的高能量碎片數(shù)目以及化學(xué)式等信息。將UNIFI給出的初步鑒定結(jié)果與2.2.1項下總結(jié)的規(guī)律進行匹配與確證，共鑒定箭葉、柔毛、天平山淫羊藿不同部位化合物74個，見表1-1。其中分別以色譜峰3、7、10、11、16、17、21以及33為例，詳細論述化合物結(jié)構(gòu)鑒定過程。圖1-3負離子模式下箭葉淫羊藿不同部位樣品UHPLC-Q-TOF/MS表征BPI圖(a):葉；(b):莖；(c):根莖

【參考文獻】：
期刊論文
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