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糖基化終產(chǎn)物促進(jìn)氧化型低密度脂蛋白誘導(dǎo)的巨噬細(xì)胞泡沫化與內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激

發(fā)布時間:2016-12-17 22:36

  本文關(guān)鍵詞:糖基化終產(chǎn)物促進(jìn)氧化型低密度脂蛋白誘導(dǎo)的巨噬細(xì)胞泡沫化與內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。


《東南大學(xué)》 2015年

糖基化終產(chǎn)物促進(jìn)氧化型低密度脂蛋白誘導(dǎo)的巨噬細(xì)胞泡沫化與內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激

孟思明  

【摘要】:目的:觀察羧甲基賴氨酸(Carboxymethyl-lysine, CML)對荷脂巨噬細(xì)胞脂質(zhì)調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)運子的影響及干預(yù)巨噬細(xì)胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激發(fā)生的作用,探討糖基化終產(chǎn)物致動脈粥樣硬化發(fā)生的相關(guān)機(jī)制。方法:使用4-6代RAW264.7細(xì)胞株,巨噬細(xì)胞復(fù)蘇后進(jìn)行連續(xù)培養(yǎng),根據(jù)干預(yù)條件不同分為對照組、oxLDL組,CML+oxLDL混合干預(yù)組。分別用不同濃度CML和氧化型低密度脂蛋白孵育細(xì)胞48小時后,用油紅O染色鑒定泡沫細(xì)胞形成,膽固醇檢測試劑盒檢測各組細(xì)胞中游離膽固醇(FC)、膽固醇酯(CE)、總膽固醇(TC)濃度來選擇能誘導(dǎo)巨噬細(xì)胞源性泡沫化的最佳濃度。利用流式細(xì)胞學(xué)技術(shù)檢測各組細(xì)胞氧化型低密度脂蛋白受體CD36和三磷酸結(jié)合盒轉(zhuǎn)運子ABCA1表達(dá)量的變化;實時熒光定量逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)檢測定各組內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激分子C/EBP同源蛋白(CHOP)、PKR樣內(nèi)質(zhì)網(wǎng)激酶(PERK)的表達(dá)量。結(jié)果:油紅染色顯示小鼠巨噬細(xì)胞源性泡沫細(xì)胞誘導(dǎo)成功,膽固醇試劑盒檢測顯示50 μg/mL oxLDL+10 pM CML可誘導(dǎo)RAW264.7細(xì)胞最大泡沫化。糖基化終產(chǎn)物影響膽固醇逆轉(zhuǎn)運,與對照組和oxLDL單獨干預(yù)組相比,oxLDL+CML共處理巨噬細(xì)胞組中CD36的表達(dá)顯著升高(P0.05),同時三磷酸腺苷結(jié)合盒轉(zhuǎn)運子ABCA1的表達(dá)量顯著降低(P0.05)。oxLDL+CML共處理RAW264.7細(xì)胞較oxLDL單獨干預(yù)組顯著上調(diào)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激標(biāo)志分子CHOP、PERK的表達(dá)(P0.05)。結(jié)論:CML可通過上調(diào)細(xì)胞膜表面糖蛋白CD36促進(jìn)膽固醇吸收和下調(diào)三磷酸腺苷結(jié)合盒轉(zhuǎn)運子ABCA1抑制膽固醇流出,進(jìn)而加速小鼠巨噬細(xì)胞中脂質(zhì)堆積,促進(jìn)巨噬細(xì)胞向泡沫細(xì)胞轉(zhuǎn)化,并可協(xié)同ox-LDL增強內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激關(guān)鍵分子表達(dá),這一機(jī)制可能與細(xì)胞內(nèi)膽固醇流入流出失衡有關(guān)。

【關(guān)鍵詞】:
【學(xué)位授予單位】:東南大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2015
【分類號】:R543.5
【目錄】:

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  本文關(guān)鍵詞:糖基化終產(chǎn)物促進(jìn)氧化型低密度脂蛋白誘導(dǎo)的巨噬細(xì)胞泡沫化與內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激,,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。



本文編號:217600

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