發(fā)布時間：2018-06-22 19:13

  本文選題：人心臟瓣膜間質(zhì)細胞 + 鈣化　； 參考：《中國動脈硬化雜志》2017年02期

【摘要】：目的用人心臟瓣膜間質(zhì)細胞(hVICs)在體外培養(yǎng)并用鈣化誘導液建立瓣膜鈣化模型,觀察hVICs鈣化過程中Notch1蛋白表達及細胞凋亡情況,探討Notch1蛋白在hVICs凋亡與鈣化關系中的作用。方法將體外培養(yǎng)的hVICs隨機分為兩組,鈣化組用含鈣化誘導液的培養(yǎng)基培養(yǎng),以建立鈣化模型,并按1~7天分別誘導細胞,觀察鈣化的動態(tài)過程;空白組用正常培養(yǎng)基(I-GRO PLUS)培養(yǎng)。所有hVICs均培養(yǎng)7天。檢測兩組細胞鈣化結節(jié)數(shù)目、BMP-4蛋白、Notch1蛋白的表達及hVICs凋亡率。然后將鈣化組中誘導鈣化細胞再隨機分脂多糖組(LPS)、Notch1抑制劑組(γ分泌酶抑制劑,DAPT)、對照組(只加鈣化誘導液)體外培養(yǎng)3天,檢測BMP-4、Notch1、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Caspase3)的表達。結果與空白組細胞比較,鈣化組細胞鈣化及Notch1蛋白的表達均高于空白組,且隨著誘導天數(shù)的增加而增加;細胞凋亡率在鈣化誘導3天時最高,隨后逐漸下降。LPS組與對照組比較,細胞凋亡和鈣化均隨著Notch1蛋白的表達增加而增加;DAPT組與對照組比較,細胞凋亡和鈣化均減少。結論hVICs鈣化與細胞凋亡有著密切的關系,且Notch1蛋白在hVICs凋亡與鈣化關系中起著重要的作用。
[Abstract]:Objective to observe the expression of Notch1 protein and the apoptosis of human cardiac valve interstitial cells (hVICs) in vitro and to investigate the role of Notch1 protein in the relationship between apoptosis and calcification. Methods the hVICs cultured in vitro were randomly divided into two groups. The calcification group was cultured on the medium containing calcification inducer to establish the calcification model, and the cells were induced for 1 ~ 7 days to observe the dynamic process of calcification, and the blank group was cultured in I-GRO plus. All hVICs were cultured for 7 days. The number of calcified nodules and the expression of BMP-4 protein Notch1 and the apoptosis rate of hVICs were detected in both groups. Then the calcified cells in calcification group were randomly divided into lipopolysaccharide group (LPS) / Notch1 inhibitor group (緯 secretory enzyme inhibitor DAPT) and control group (plus calcification inducer only) cultured for 3 days. The expression of BMP-4, Notch1 and caspase3 were detected. Results compared with the control group, calcification and Notch1 protein expression in calcified group were higher than those in blank group, and increased with the increase of induction days, and the apoptosis rate was the highest at 3 days of calcification, and then decreased gradually in LPS group compared with the control group, and the expression of Notch1 protein in the calcified group was higher than that in the control group. Apoptosis and calcification increased with the increase of Notch1 protein expression in DAPT group compared with the control group, both apoptosis and calcification decreased. Conclusion hVICs calcification is closely related to apoptosis, and Notch1 protein plays an important role in the relationship between hVICs apoptosis and calcification.
【作者單位】： 安徽醫(yī)科大學無錫臨床學院;
【基金】：國家自然科學基金資助項目(81371657)
【分類號】：R542.5

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本文編號：2053930