本文選題：高尿酸血癥腎病 + 足細(xì)胞　； 參考：《湖北民族學(xué)院》2017年碩士論文

【摘要】：目的1、通過(guò)雄性Sprayue-Dawley(SD)大鼠動(dòng)物實(shí)驗(yàn)建立高尿酸血癥腎病模型,檢測(cè)造模前后大鼠血尿酸(UA)、血肌酐(Scr)及尿素氮(BUN)的值,通過(guò)腎臟病理學(xué)觀察足細(xì)胞足突(foot process FP)的融合情況,應(yīng)用免疫組化和western-Blot檢測(cè)足細(xì)胞標(biāo)記蛋白的表達(dá)水平,確立造模成功。2、應(yīng)用刺五加水煎液灌胃各組高尿酸血癥腎病(hyperuricemianephropathy HN)大鼠,觀察治療后各組大鼠的血UA、Scr及BUN的變化情況,通過(guò)腎臟病理學(xué)觀察治療后足細(xì)胞的修復(fù)情況,應(yīng)用免疫組化和western-Blot檢測(cè)治療后足細(xì)胞標(biāo)記蛋白的表達(dá)水平,初步探討其對(duì)高尿酸血癥腎病的保護(hù)作用。方法方法1:將40只SD大鼠,隨機(jī)分成空白組(BG)8只、模型組(MG)32只�？瞻捉M(BG)用等量0.9%氯化鈉注射液灌胃,模型組(MG)用氧嗪酸鉀鹽(oxanine acid OA)按 500mg/kg.d 的劑量,加羧甲基纖維素(carboxy methyl cellulose CMC)配成濃度為0.8%的懸浮液灌胃,2小時(shí)后酵母膏(Yeast Extract YE)以30g/kg.d的劑量灌胃,3周后兩組大鼠各取8只,通過(guò)心臟取血及開(kāi)腹取出腎臟,檢測(cè)大鼠血尿酸值及腎功能,觀察足細(xì)胞足突(FP)的融合情況,通過(guò)免疫組織化學(xué)及western-Blot方法檢測(cè)各組大鼠足細(xì)胞podocin、podocalyxin(PCX)表達(dá)水平情況。方法2:將模型組(MG)剩下的24只SD大鼠隨機(jī)分成中藥低劑量組(LCG)、中劑量組(MCG)、高劑量組(HCG),各組8只大鼠,刺五加水煎液按低、中、高劑量分別以l08mg/kg、216mg/kg、432mg/kg灌胃,每天一次,療程5周后,以同樣的方法心臟取血及剖腹收集腎臟組織兩小塊,一塊快速置于-80℃冰箱保存,一塊以4%多聚甲醛固定。觀察各組治療后BUN、UA、Scr的值及腎臟足細(xì)胞的變化,并通過(guò)免疫組化及western-Blot方法檢測(cè)各組足細(xì)胞標(biāo)記蛋白的表達(dá)情況。結(jié)果1、應(yīng)用尿酸酶抑制劑聯(lián)合酵母膏法造模3周后,MG大鼠Scr、UA、BUN值均明顯高于BG(P0.05)。光鏡下可見(jiàn)兩組大鼠的腎小球基底膜(GBM)無(wú)明顯增厚,系膜細(xì)胞(MC)及系膜基質(zhì)(MM)無(wú)明顯的增生,均未見(jiàn)嗜復(fù)紅蛋白沉積,模型組(MG)有腎間質(zhì)炎性細(xì)胞的浸潤(rùn)。電鏡下可見(jiàn)MG足細(xì)胞腫脹、空泡變性、足突(FP)節(jié)段性的融合。免疫組化染色PCX、podocin主要在腎小球足細(xì)胞上表達(dá),可見(jiàn)空白組PCX、podocin沿腎小球毛細(xì)血管襻呈線性強(qiáng)陽(yáng)性表達(dá),呈棕褐色、著色深,模型組表達(dá)明顯減少或者缺失,經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析MG組AOD值與BG組比較顯著降低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05)。凝膠電泳條帶見(jiàn)MG組條帶亮度明顯減低,說(shuō)明模型組PCX、podocin的表達(dá)量減少,通過(guò)光密度值分析見(jiàn)模型組PCX、podocin表達(dá)與BG組比較顯著降低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05)。2、應(yīng)用刺五加水煎液灌胃5周后,中藥組大鼠的血肌酐、血尿酸值均明顯低于模型組(P0.05);中藥各組與BG比較,Scr、UA的值之間無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);光鏡下可見(jiàn)各組大鼠GBM未見(jiàn)增厚,MC及MM無(wú)明顯的增生,腎小球內(nèi)均未見(jiàn)明顯嗜復(fù)紅蛋白的沉積,BG腎間質(zhì)炎性細(xì)胞的浸潤(rùn)較其它組減輕;電鏡下中藥各組與模型組比較,FP融合,足細(xì)胞腫脹、空泡變性等明顯減輕。免疫組化染色模型組PCX、podocin表達(dá)明顯減少或者缺失,中藥各組腎組織PCX、podocin沿腎小球毛細(xì)血管襻呈線性陽(yáng)性表達(dá),呈淺褐色、著色較深,以中劑量組著色加深明顯,統(tǒng)計(jì)學(xué)分析與MG組比較明顯升高,且差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05);凝膠電泳條帶MG組PCX、podocin表達(dá)量減少,中、高劑量組PCX、podocin表達(dá)量增加;通過(guò)光密度值分析中、高劑量組PCX、podocin表達(dá)與MG比較顯著升高,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05)。結(jié)論1、應(yīng)用氧嗪酸鉀鹽(OA)聯(lián)合酵母膏(YE)法成功造模出高尿酸血癥大鼠模型,持續(xù)可靠的高尿酸血癥可導(dǎo)致足細(xì)胞的腫脹、空泡變性,足突(FP)的融合,標(biāo)記蛋白分子podocalyxin(PCX)、podocin的表達(dá)下調(diào),加速了腎功能的損害。2、刺五加水煎液可以顯著降低血尿酸、血肌酐的值,并部分逆轉(zhuǎn)高尿酸血癥對(duì)腎臟足細(xì)胞足突的融合,上調(diào)腎組織足細(xì)胞標(biāo)記蛋白分子PCX、podocin,對(duì)高尿酸血癥腎病起一定的修復(fù)保護(hù)作用。
[Abstract]:鐩殑1,閫氳繃闆勬，

本文編號(hào)：1825952