本文選題：核殼結(jié)構(gòu)四氧化三鐵@二氧化錳納米顆粒　切入點：循環(huán)腫瘤細胞　出處：《武漢大學(xué)》2017年碩士論文

【摘要】：在物理、化學(xué)和生物等致瘤因素作用下,部分組織細胞在基因水平上失去對其生長、分化的正常調(diào)控導(dǎo)致其生長不受機體生理調(diào)節(jié)無限增殖而破壞正常組織與器官。不僅如此,部分腫瘤細胞還會轉(zhuǎn)移至其他器官形成轉(zhuǎn)移灶,有研究表明,癌癥患者死亡的最主要原因就是腫瘤的轉(zhuǎn)移。應(yīng)用目前的癌癥檢測手段往往出現(xiàn)的結(jié)果就是查出癌癥的時候就已經(jīng)是癌癥中晚期了,極大的加大了治療的難度,這也是癌癥死亡率高居不下的一個重要原因。循環(huán)腫瘤細胞(Circulating Tumor Cells,CTCs)是指原發(fā)腫瘤組織或者轉(zhuǎn)移灶上脫離并進入到腫瘤患者外周血循環(huán)中的腫瘤細胞。有研究表明,循環(huán)腫瘤細胞在腫瘤組織形成的早期就已經(jīng)存在于外周血中,因而對腫瘤的早期診斷有很重要的臨床研究價值。但是循環(huán)腫瘤細胞是血液中的稀有細胞,通常癌癥患者每毫升外周血中僅僅含有幾顆到幾百顆循環(huán)腫瘤細胞卻有著數(shù)十億顆正常血細胞作為干擾細胞,因此從外周血中捕獲循環(huán)腫瘤細胞仍然是個巨大的技術(shù)難題。免疫磁珠,是將特異性的單克隆抗體用生物或者化學(xué)的方法修飾到磁性顆粒表面形成既具有免疫學(xué)相關(guān)功能又具有磁性的顆粒。用免疫磁珠分離特定細胞的原理是連接在磁珠表面的特異性單克隆抗體能與目標(biāo)細胞表面抗原特異性結(jié)合,在外加磁場中,目標(biāo)細胞因為與磁珠相連被外磁場吸引而滯留在磁場中,非目標(biāo)細胞由于不能與磁珠上特異性單抗結(jié)合而不與磁珠相連,因而沒有磁性,不被外磁場吸引從而使目標(biāo)細胞得以分離。然而應(yīng)用這種方法分離的細胞表面仍然粘附有免疫磁珠,對后續(xù)深入的生物分子分析有不良影響。二氧化錳因為具有生物兼容性好,表面富含羥基易于功能化修飾等優(yōu)點在生物研究領(lǐng)域有著很好的應(yīng)用前景,不僅如此,二氧化錳可以被低濃度的草酸溶解。本文首先概括性的介紹了 CTCs的相關(guān)背景知識和目前常用的CTCs捕獲手段。然后為了克服免疫磁珠捕獲腫瘤細胞后磁珠仍然黏附在細胞上影響后續(xù)生化分析的缺點,我們制備了核殼結(jié)構(gòu)四氧化三鐵@二氧化錳納米顆粒,然后在顆粒表面進行功能化修飾,嫁接上了 anti-EpCAM,實現(xiàn)了對腫瘤細胞的捕獲。并且,通過低濃度草酸的處理,溶解了殼層的二氧化錳,實現(xiàn)了細胞的釋放。最后對我們的研究工作進行了總結(jié)并對未來的工作方向進行了展望。
[Abstract]:Under the action of physical, chemical and biological tumorigenic factors, some tissues and cells lose their growth at the gene level, and the normal regulation of differentiation results in the destruction of normal tissues and organs without unlimited proliferation by physiological regulation of the body. Some tumor cells also metastasize to other organs to form metastatic foci. The main cause of death of cancer patients is the metastasis of the tumor. The result of using current methods of cancer detection is that the cancer is found at the middle and late stages of cancer, which greatly increases the difficulty of treatment. This is also an important reason for the high cancer mortality. Circulating Tumor cells (CTCs) are tumor cells that are isolated from primary tumor tissues or metastases and enter the peripheral blood circulation of cancer patients. Circulating tumor cells exist in peripheral blood at the early stage of tumor tissue formation, so they have important clinical value for early diagnosis of tumor. But circulating tumor cells are rare cells in blood. Cancer patients usually have only a few to hundreds of circulating tumor cells per milliliter of peripheral blood, but billions of normal blood cells as interfering cells. So capturing circulating tumor cells from peripheral blood is still a huge technical challenge. Specific monoclonal antibodies are modified to the surface of magnetic particles by biological or chemical methods to form particles that have both immunological and magnetic properties. The principle of separating specific cells from immunomagnetic beads is to attach them to the magnetic field. The specific monoclonal antibody on the bead surface can specifically bind to the surface antigen of the target cell. In the external magnetic field, the target cell is trapped in the magnetic field because it is attached to the magnetic beads and the non-target cells are not connected to the magnetic beads because they cannot bind to the specific monoclonal antibody on the magnetic beads. Not attracted by the external magnetic field, so that the target cells can be separated. However, the cells separated by this method still have immunomagnetic beads attached to the surface, which has a negative effect on the subsequent in-depth biomolecules analysis. The surface rich in hydroxyl groups is easy to functionalize and has a good application prospect in the biological research field, not only that, Manganese dioxide can be dissolved by low concentration of oxalic acid. This paper firstly introduces the background of CTCs and the current CTCs trapping methods. Then, in order to overcome the immune magnetic beads trapping tumor cells, the magnetic beads are still sticky. The disadvantages attached to the cell that affect subsequent biochemical analysis, We prepared core-shell Fe _ 2O _ 3 @ manganese dioxide nanoparticles, then functionalized the particles, grafted with anti-EpCAM to capture tumor cells, and treated with low concentration oxalic acid. The manganese dioxide in the shell layer was dissolved and the cell release was realized. Finally, our research work was summarized and the future work direction was prospected.
【學(xué)位授予單位】：武漢大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號】：R730.4;TB383.1

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