本文關(guān)鍵詞：線粒體融合蛋白2表達(dá)下調(diào)對(duì)于多柔比星誘導(dǎo)的心肌細(xì)胞凋亡的影響　出處：《江蘇大學(xué)》2017年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

  更多相關(guān)文章： 心肌細(xì)胞凋亡 多柔比星 線粒體融合蛋白2 線粒體活性氧族成分

【摘要】：背景多柔比星(Doxorubicin,DOX)是一種臨床上廣泛使用且效果顯著的抗腫瘤藥物,然而它的臨床應(yīng)用卻受限于其心肌毒性,即能通過尚未明確的機(jī)制誘導(dǎo)心衰。線粒體融合蛋白2(Mitofusin2,Mfn2)是一種橫跨于線粒體外膜且具有GTP酶活性的蛋白,通過細(xì)胞內(nèi)復(fù)雜的信息交流調(diào)控線粒體的融合過程。目的探索心肌細(xì)胞內(nèi)Mfn2表達(dá)下調(diào)在多柔比星誘導(dǎo)的心肌細(xì)胞凋亡過程中的作用。方法本實(shí)驗(yàn)用的是培養(yǎng)的原代心肌細(xì)胞,來源于1到3天內(nèi)出生的Sprague Dawley(SD)大鼠。建立多柔比星誘導(dǎo)的心肌細(xì)胞凋亡模型,實(shí)驗(yàn)組然后分為3組,DOX組和Mfn2轉(zhuǎn)染處理組以及Mitotempo預(yù)處理組,以正常心肌細(xì)胞作為對(duì)照組,對(duì)照組不做任何處理,Mfn2轉(zhuǎn)染組先在心肌細(xì)胞內(nèi)轉(zhuǎn)入Mfn2激活質(zhì)粒然后再用DOX處理,Mitotempo預(yù)處理組先用Mitotempo預(yù)處理1小時(shí)然后再用DOX處理。用免疫蛋白印跡法(Western Blotting,WB)檢測(cè)心肌細(xì)胞中Mfn2的表達(dá)。分別用DCFDA法和線粒體特異性熒光染料MitoSOX檢測(cè)心肌細(xì)胞內(nèi)和線粒體中的活性氧族成分(Reactive oxygen species,ROS)。通過檢測(cè)心肌細(xì)胞內(nèi)Caspase3的活性和TUNEL染色法兩種手段來檢測(cè)心肌細(xì)胞的凋亡。結(jié)果1.DOX誘導(dǎo)心肌細(xì)胞產(chǎn)生大量的ROS并且誘導(dǎo)了心肌細(xì)胞的凋亡。2.與此同時(shí),在DOX的刺激下,心肌細(xì)胞中Mfn2含量的表達(dá)也隨之下降。增加心肌細(xì)胞中Mfn2的表達(dá)可以抑制心肌細(xì)胞線粒體中有害活性氧成分的升高。3.增加心肌細(xì)胞內(nèi)Mfn2的表達(dá)和使用線粒體特異性抗氧化劑Mitotempo均能夠減少DOX誘導(dǎo)的心肌細(xì)胞凋亡。結(jié)論在DOX誘導(dǎo)的心肌細(xì)胞凋亡中,心肌細(xì)胞Mfn2的表達(dá)下調(diào)發(fā)揮了重要的作用,這一作用的實(shí)現(xiàn)與心肌細(xì)胞內(nèi)損害性活性氧的產(chǎn)生有關(guān);線粒體特異性抗氧化劑Mitotempo能抑制D0X誘導(dǎo)的心肌細(xì)胞凋亡。
【學(xué)位授予單位】：江蘇大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號(hào)】：R96

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本文編號(hào)：1330188